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时间:2018-12-08
《显微复习地的题目最终答案详解详解全版》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、实用标准文案显微技术包括哪些部分内容?显微技术:利用光学系统或电子光学系统设备,观察肉眼所不能分辨的微小物体形态结构及其特性的技术。包括1各种显微镜的基本原理操作和应用的技术2显微镜样品的制备技术3观察结果的记录分析和处理的技术。固定时应注意事项1注意固定材料本身的结构性质,选用适合的固定液,固定时间根据材料特点增减2固定微小材料直接投入固定液中,对于较大材料先将其解剖成较小材料迅速投入固定液,完成杀生固定作用3固定体积较大材料时,会出现外部固定过度,而内部未固定好,考虑选用渗透快的固定液(乙酸乙醇或苦味酸乙醛混合液),加
2、用超声波发生器能达到迅速固定目的4对多毛的芽或根茎的固定时,先投入乙酸乙醇液浸泡数分钟,然后再入纳瓦申固定液或其他固定液完成固定。同时,要进行抽气,另可用超声波发生器进行固定抽气5一般固定液多为酸性固定影像,盐基性固定影像较少,除考虑影像外,还应在脱水剂、渗入剂方面进行观察6固定剂的浓度不可忽视7固定材料的记录:固定标本瓶上必须贴上标签,用笔书写以下内容:编号,采集时间、地点、处理者的姓名简写,固定液的名称,保存液的名称等常用的染色剂类型根据来源:天然染料和人工染料根据化学性质:碱性染料酸性染料中兴染料根据染色性能:核染料
3、细胞质染料细胞壁染料组织化学染料荧光染料活体染料注意事项1应根据观察目的、样品结构、性质选择适当的染色方法2材料从某一溶液进入染色液时,两种溶液的浓度必须相同3酸性染料着色速度快于碱性染料,双重染色时,先用碱性染料染色,再用酸性4染色宁可深,因为水洗和脱水会使颜色变浅5用分色剂时,要在低倍显微镜下随时观察,分色适度即彻底洗净6染色的时间不是一成不变,要根据染色剂的性质,配方,切片的厚薄,材料的结构等在使用时灵活掌握常用的透明剂透明剂都是石蜡溶剂,不能与水混合例如:二甲苯氯仿冬青油浸蜡1浸蜡瓶放在温箱中过夜时,材料不能太多2
4、浸蜡一般从低温到高温,从低浓度到高浓度,使石蜡慢慢渗入组织内,将透明剂替代出来包埋1注意安全防火防烫伤2包埋速度不能太慢以免石蜡凝固3包埋石蜡温度不能太高以免损伤材料4蜡中出现气泡可将镊子烧热烫去5未冷却前不能将蜡盒移入水中6应注意包埋材料的位置、方向,要有利于切割切片及研究7熔蜡时人不能离开,如果石蜡出现冒烟情况时,不要揭开蜡杯盖,要及时切断电源徒手切片方法制片过程。取样—固定—水洗—切片—染色—脱水—透明—封藏1取材:用FAA固定或不固定2徒手切片的步骤a取一套小培养皿,皿内盛有清水b切片c挑选好的切片3染色与保存a临
5、时装片:加1d1%番红水溶液,短期保存则加1d10%的甘油使切片更透明,避免失水变干变黑b永久存片:染色滑走切片法制片过程特殊步骤过程1固定切片2固定样品3调整材料的高度4调节切片的厚度5切片6每次切片结束后,要用软布将切片机擦拭干净,滑槽内切下的碎屑也需清除,将切片刀取下擦干净并滴注机油后放入刀盒保存特殊步骤:材料若太坚硬,需经过软化处理压片法制片过程1精彩文档实用标准文案取材和前处理:种子萌发后待初生根长到1cm长左右,切取根尖前端5mm置于装有前处理液(秋水仙素、对二氯苯、a-溴代萘、8-羟基喹啉)的指形瓶中,处理3
6、~5h2固定:将材料固定于乙醇:乙酸(3:1)固定液0.5h以上3水洗:将材料用自来水浸泡、清洗20min以上,期间要换水4酶解:用纤维素酶和果胶酶各2.5%的混合酶液对材料酶解30min5水洗:用自来水短暂冲洗,洗去酶液6酸解:将材料用1mol/LHCl在60摄氏度水浴中酸解10min7水洗、压片:弃去盐酸,加清水于材料中,浸泡20min以上,卡宝品红染色,压片镜检倒置显微镜的特点1物镜与照明系统颠倒2用于观察培养的活细胞,通常具有相差或DIC物镜,有的还具有荧光装置透射电镜中样品处理方法1加入物镜光阑2提高样品中某些部
7、分的原子序数Z3选用较低的加速电压4暗场显微法5适当的切片厚度蜡带不直,成弯曲状:主要原因是蜡块切面的上下边缘不平行,将蜡块边缘修片即可2切片纵裂:主要原因是刀有缺口或者劈刀时间太短,组织软化不够等。可移动刀刃位置或者劈刀、软化组织(取下台木,将蜡块倒放在有水的培养皿中浸泡半天,使组织软化)后再切片3材料破碎:主要原因是脱水不彻底,浸蜡不完全,石蜡没有完全填充植物组织而形成空洞,须重做材料石蜡切片法的优点1易操作2能把材料切均匀,极薄(1~12mm)的切片3切下的单个蜡片可以连接形成蜡带,有利于作连续切片,是其他制片法难以
8、达到的4可永久保存解离法制片的过程1解离:将被检查的木质部切成火柴梗粗细,长约1~2cm的小条2水洗:尼龙纱网滤去酸液,换水浸泡数次至酸液除尽3保存:用玻璃棒捣散组织,转入离心管离心,弃去上清液,加入50%乙醇保存4染色:取少量木质部解离组织,置于1%番红水溶液染5min5水洗:数次去浮色6粘片:用玻璃
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