姐妹染色单体互换频率影响因素的研究

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时间:2018-12-08

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1、摘要:[目的]探讨影响姐妹染色单体互换(SCE)频率的因素。[方法]按微量全血培养法,对SCE培养至6h加入5-漠脱氧尿卩密噪核昔(BrdU)后继续培养,对下列3个因素进行研究。①实验条件(a.培养时加入BrdU的浓度:5、10、20、30ug/ml4个点,b.加BrdU后自然光下曝光时间:0、0.5、30、60及120min5个点,c.培养时间:56和72h2个点);②接触有害物质因素[接触苯并(a)芜等沥青作业工人34名];③吸烟因素(吸烟者32名)。[结果]①在实验条件中,SCE值随着BrdU浓度的增加而增加,10ug/ml(最佳实验点)和20ug/ml分别为(5.82±1.85)

2、和(6.83±2.37)次/细胞,差异已有显著性(P关键词:姐妹染色单体互换;BrdU浓度;曝光时间;有毒物质;吸烟ResearchonIncideneeofSisterChromatidExchangeandItsInfluencingFactorsZHENGQiao-ling,LIWei-jun,GUOYi-cao(GuangdongPreventionandTreatmentCenterforOccupationalDiseases,Guangzhou510300,China)Abstract:[Objective]Toinvestigatetheincideneeofsister

3、chromatidexchange(SCE)anditsinfluencingfactors.[Methods]Theculturingmethodofwholebloodwascarriedout,thenBrdUwasaddedafterthesamplesculturedfor6hours・ThreeinfluencingfactorsofBrdUwastestedasfollows:(1)theexperimentalenvironment,including(a)theconcentrationsofBrdUof5ug/ml,10ug/ml,20ug/mland30ug/ml;

4、(b)theexposuretimeof0min,0.5min,30min,60minand120min;and(c)theexposureperiodsof56hoursand72hours;(2)theexposurecondition,34workersexposedtobenzo(a)pyrene;and(3)thesmokinghabit,32workershadsmokinghabit・[Results](1)TheincideneeofSCEincreasedsignificantlywiththeconeentrationofBrdUgettinghigher,theSC

5、Evaluesofthebest(10ug/ml)and20ug/mlresultingconcentrationsofBrdUwereobservedtobe(5.82±1.85)and(6.83±2.37)timespercellrespectively,P0.05),两组人员均不吸烟、嗜酒。吸烟组为某厂只吸烟、不嗜酒、不接触毒物的健康行政人员32人(每天吸烟>20支、烟龄>1年),年龄21〜53(36.6±5.4)岁,年龄与对照组比较差异无显著性(P>0.05)o1.2方法1.2.1SCE标本的培养与制作①取观察对象外周静脉血按本实验室微量全血培养法培养[5],培养至6h时加入5-

6、澳脱氧尿卩密噪核昔(BrdU,Sigma产品),使终浓度为10ug/ml,继续培养至终止前12h加秋水仙素,全程培养56h,除实验需要外,培养过程均避光;②姐妹染色单体差别染色:培养的标本经常规制片后,根据PERRY等[6]的方法改进,即不使用荧光素染色、标本不经老化处理,直接将玻片标本置于载板上,标本面朝上,用2XSSC液(0.3mol/L氯化钠、0.03mol/L柠檬酸钠等量混合)加在玻片上,在56°C条件下,用30W紫外光管距标本4〜6cm的高度照射30min,蒸憾水冲洗,经Giemsa染色后,显微镜下即可观察到姐妹染色单体的差别染色。1.2.2SCE计数选择分散和差别染色良好、数

7、目为46条染色体的第二代中期分裂细胞分析SCE,实验组每一实验点分析240个细胞、其他组每人分析20个细胞,在染色单体末端发生互换者记1次SCE,在中间互换者记2次,被判明在着丝点处互换者也计1次,各实验点结果以平均每细胞的SCE数和标准差表示。1.3研究内容1.3.3实验条件①BrdU浓度实验:于培养体系中加入BrdU系列终浓度分别为:5、10、20、30ug/ml4个点;②曝光实验:将加完BrdU后的培养物置于室内自然光充足处作

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