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1、国家食品药品监督管理局保健食品产品技术要求方格牌破壁灵芝孢子粉fanggepaipobilingzhibaozifen【配方】灵芝孢子粉【生产工艺】本品经干燥、粉碎、分装等主要工艺加工制成。【感官要求】应符合表1的规定。表1感官要求项目指标色泽棕色至棕褐色滋味、气味具本品特有的滋味、气味，无异味性状均匀粉末状，无结块杂质无肉眼可见外来杂质【鉴别】无【理化指标】应符合表2的规定。表2理化指标项目指标检测方法蛋白质，g/100g彡12.0GB5009.5破壁率，％彡951破比率的测定水分，％彡9.0GB5009.3灰分，％彡2.0
2、GB5009.4铅（以Pb计），mg/kg彡0.5GB5009.12砷（以As计），mg/kg彡0.3GB/T5009.11亲（以Hg计），mg/kg彡0.3GB/T5009.17/、/、/、，mg/kg彡0.2GB/T5009.19滴滴涕，mg/kg彡0.2GB/T5009.191破壁率的测定1.1原理：单位质量样品未破壁孢子数与同单位质量标样（未经破壁的孢子）中的孢子数之比为样品中孢子的未破壁率。破壁率=1-未破壁率。未破壁率孢子表现为完整的卵形且外壁光滑。1.2标样配制与计数：精密称取0.lg标样，稀释至100mL。充分
3、搅拌均匀，立即取少许悬浮液均匀涂抹在血球计数板框内，盖上玻片。在显微镜下（600倍以上）观察，计数，一般每一检样观察不少于50个视野。1.3样品测定：同上1.4结果计算W<）XnX=（1X100WXno式中：X—样品中孢子破壁率，％;W。一标样的质量；W一样品的质量重量；n0—标样50个（或m个）视野屮的孢子总数；n—标样50个（或⑺个）视野中的完整未破壁孢子总数。附：在无未破壁孢子予以对照的情况下，可用下面方法检测破壁孢子计算其破壁率。按1.2项操作步骤，每检测样分别计破壁和未破壁孢子数。观察视野数根据破壁情况自行调整，一般
4、不少于10个视野。在视野下的破壁孢子表现为不呈完整卵形的大小不等形状各异的碎片，或表现为外壁粗糙的卵形个体。破壁孢子数=碎片数/相当于一个完整孢子的碎片数（取平均值，通常为2〜4）+外壁粗糙的卵形体数。未破壁孢子数=完整卵形且外壁光滑的个体数P破破壁率％=（1）X100P破+1）未破式中：Pf>.:所观察的视野下破壁孢子数总和P所观察的视野下未破壁孢子数总和n：观测视野数总和测一个平行样，得出破壁率后取两破壁率的平均伉【微生物指标】应符合表3的规定。表3微生物指标项目指标检测方法菌落总数，cfu/g<30000GB4789.2
5、大肠菌群，MPN/lOOg<90GB/T4789.3-2003霉菌，cfu/g^25GB4789.15酵母，cfu/g<25GB4789.15致病菌（指沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌）不得检出GB4789.4、GB4789.5、GB4789.10、GB/T4789.11【标志性成分含量测定】应符合表4的规定。表4标志性成分含量测定项目指标检测方法粗多糖（以葡萄糖计），mg/100g彡15001粗多糖的测定灵芝=萜（以齐墩果酸计），mg/100g彡5002灵芝三萜的测定1粗多糖的测定1.1仪器1.1.1分光光度
6、计1.1.2离心机（4000r/min）1.1.3旋转混匀器1.2试剂除特殊注明外，本方法所用的试剂均为分析纯；所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。1.2.1无水乙醇1.2.2乙醇洗涤液：20mL水巾加入无水乙醇lOOmL,混匀。1.2.3硫酸1.2.4苯酚溶液（50g/L）:称取精制苯酚5.Og,加水溶解并稀释至100mL,混匀。溶液置冰箱中可保存1个月。1.2.5葡萄糖标准溶液：准确称取1.OOOOg经过98〜100°C干燥至恒重的葡萄糖，加水溶解后以水稀释至lOOOmL,此溶液ImL含葡萄糖lmg,用前稀释10倍（0.lm
7、g/mL），现用现配。1.3标准曲线的绘制：精密移取葡萄糖标准溶液0、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.OOmL,分置于具塞试管中。加蒸馏水补充至体积2.OOmL,再加苯酚溶液l.OOmL,摇匀，依次加入浓硫酸5.00mL，摇匀，置沸水浴中2min,取出置室温，于485nm波长处，以试剂空白溶液为参比测定吸收度。以含糖量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。1.4样品处理：称収样品2.0g,置圆底烧瓶巾，精密加水lOOmL，称定重量，分散均匀后加热回流3h,放冷，再称定重量，加水补足减失的重量，摇匀，静
8、置数小时，取上清液供沉淀多糖。准确吸取以上清液5.OOmL,加入无水乙醇25mL,摇匀，4°C静置过夜，以4000r/min离心15min,弃去上淸液。沉淀用水溶解并定容至25.OmL，混匀后供测定用。1.5样品测定：吸取供试品溶液1.OOmL,加水补充至2.OOmL,再加苯
