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时间:2018-12-06
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1、第一章绪论第二章植物组织培养的基木原理笫三章植物胚胎培养第四章植物细胞培养第伍章植物花药和花粉培养第六章原牛质体培养与体细胞杂交第七章植物离体无性繁殖笫八章植物脱毒技术植物组织培养是指在无菌和人工控制的条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官(如根、茎、叶、花、果实、种了、胚、花药、了房等)、组织(如形成层、皮层、胚乳等)、细胞(如体细胞、生殖细胞花粉等)、原生质体、幼小的植株进行培养,使其再生细胞或完整的植株的技术。由于培养的植物材料己经脱离的母体,也称植物离休培养。无菌(asepsis):使培养器皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微牛.物的状态,以保证植物材料在培养皿
2、中正常生长和发育。人工控制的环境:光照(1000-5000lx)>温度、湿度(70-80%气体(02)等。外植体(explant):由活植物体(invivo)上切収下來以进行培养的那部分组织或器官。离体培养的材料,包括:器官、组织、细胞、原生质体。愈伤组织:原义…植物在受伤之示在伤口表面形成的一团薄壁纽织;在组织培养中指在人工培养基上由外植体氏出来的一团无序生长的薄壁细胞。组织培养分为五种类型:1、愈伤组织培养2、细胞培养3、器官培养(胚、花药、了房、根、茎、叶)4、茎尖分生组织培养(脱毒)5、原生质体培养培养基(culturemedium):是植物组织培养的重要基质,为培养物提供主长发育及
3、分化的营养物质及支持。培养基的营养组成:1、无机营养大量元素:氮、磷、钾、硫、钙、镁;2、无机营养微量元素:铁、硼、猛、铜、锌、钳、氯3、有机营养:维牛索、肌醇、氨基酸等4、植物生长调节剂:生长素类(2,4・D、NAA、IAA、IBA)细胞分裂索类(KTBAZT)其他类(GAABA)5、附加物:琼脂、活性碳、一些天然复合物氮是细胞中核酸的组成部分,也是生物体许多酶的成分,氮被植物吸收后转化为氨基酸再生成蛋白质被植物利用。氮还是叶绿索、维生索和植物激索的组成分。主要以钱态氮和销态氮形式被利用。磷参少植物生命中核酸及蛋白质全成、光合作用、呼吸作用及能量的贮存、转化、禅放等重要的生理生化过程,提高
4、抗逆性,促进早熟。钾是许多酶的活化剂。纽织培养屮钾能促进器官和不定胚分化促进叶绿体ATP的合成,增强植物光介作用和产物的运输,调解植物细胞的水势,调解气孔运动,提高抗逆性。钙、镁、硫参与细胞壁的构成影响光合作用,促进代谢等生理活动。组织培养的生理依据1.细胞全能性学说植物体的每一个细胞都含有一个完整个体的全套基因,这些基因在适宜的外界条件下按照某种特定的程序先后表达,最终分化形成一个完整的植株,称为细胞全能性(totipotency)全能性只是一种可能性。要把这种可能性变为现实性必须满足两个条件:一是要把这些细胞从植物体其余部分的抑制性影响下解脱出來,也就是说必须使部分细胞处于离休的条件下。
5、二是要给予它们适当的刺激,即给予它们一定的营养物质,并使它们受到一定的激素的作用。1.全能性体现的两个过程一个已分化的细胞要表现它的全能性,必须经历两个过程,即首先要经历脱分化过程,然后再经历再分化过程。再分化的过程冇两种方式:一是器官发生方式二是胚胎发生方式脱分化愈伤‘1组织再分化胚状体植物体脱分化一个成熟细胞转变为分住状态并形成未分化的愈伤组织的现象叫做脱分化。再分化一个成熟的植物细胞经历了脱分化Z后,经过培养还能形成完整的植株,这个过程叫再分化。再生:指纽织、器官、悬浮细胞和原牛质休经培养后获得植株的过程。继代:植物组织培养过程中,外植体在培养基上培养一段时间以后需要转移到新的培养基上
6、进行培养,这称为继代。离体培养条件下,细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的。组织培养的类眾翻组级培养(1)愈伤组织培养将外植体接种在培养基上,由于植物生长调节剂的存在,其细胞脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。愈伤组织是一种最常见的培养形式,因为除茎尖分生组织和一部分器官以外,其他的几种培养形式最终也都要经过愈伤组织才能再生植株。愈伤组织的形态发生途径:①胚胎发生途径②器官发牛•途径(1)器官培养器官培养是通过培养器官的类别来分类的。培养的是什么器官,就称为什么培养。如根、茎、叶、花、果实、种子的培养。(2)器官培养胚培养是器官培养的一种。选用的外植体是成熟或未成熟的胚
7、进行离体无菌培养。具具体方法是将其収岀放在液体或固体培养基上培养,山于胚包含在胚珠和子房里,因而进行胚胎培养时,常常是将胚珠和了房放在培养基上培养。胚培养用途:1•拯救胚。1.研究胚的发育营养。2.—些特殊的领域的研究。常用仪器与设备1、超净工作台或接种箱2、空调3、除湿机或加湿器4、恒温培养箱5、高压灭菌锅6、冰箱7、天平8、显微镜9、水浴锅10、摇床与转床11、蒸馆水发生器12、酸度计13、离心机无机营养
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