药学毕业论文研究捷安肽素抗真菌作用机理

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1、XX大学毕业论文研究捷安肽素抗真菌作用机理姓名:2014年6月25日研究捷安肽素抗真菌作用机理【摘要】目的研究捷安肽素的抗真菌作用机理。方法采用形态学方法和同位素标记法。显微形态观察经捷安肽素处理后的供试真菌的形态学变化。进一步采用14C同位素标记的特异底物“尿晋二磷酸・(14C)■葡萄糖”示踪,研究捷安肽素对真菌(1,3)-P-D-葡聚糖合成酶活性反应的影响。结果显微形态观察表明,经捷安肽素处理后,供试真菌呈现球形膨胀,而且随着捷安肽素作用强度增强,球形膨胀的程度和发生频率也增加,提示捷安肽素的作用位点在真菌细胞壁。同位素标记实验表明,捷安肽素可

2、抑制(1,3)0D■葡聚糖合成酶的活性,降低真菌细胞壁合成过程屮(1,3)■卜D■葡聚糖的放射性掺入,对疫霉菌和辣椒炭疽病菌(1,3)・0・D・葡聚糖合成酶的抑制率分别达到77.7%和77.5%。结论捷安肽素的抗真菌作用机理为:抑制细胞(1,3)■卩・D■葡聚糖合成酶的活性,破坏真菌细胞壁的合成,造成真菌细胞壁组分(1,3)■卜D■葡聚糖的缺损和病原真菌生长抑制。【关键词】捷安肽素;抗真菌作用机理;(1,3)葡聚糖合成酶Abstract:ObjectiveToinvestigatetheantifungalmechanismofJiean・pept

3、ide.MethodsThemodeofactionofJiean-peptideagainst4phytopathogenicfilamentousfiingiassociatedwithphytopathy:Phytophthorasp.,Colletotrichumgossypii,SouthwBotrytiscinereaandFusariumoxysporumf.sp.vasinfectumwasinvestigatedbythemethodofmorphologyandisotopelabelling.The(1,3)-(3・D-glu

4、cansynthaseassaywasprocessedusingisotopelabelledsubstrate一urdinediphosphate(14C)glucosetostudytheeffectofJiean・peptideonfungal(l,3)-pglucansynthase.ResultsMicrographicobservationrevealedthattheJiean-peptidemadethehyphalexpandedandglobulaiThe(l,3)・[3・D・glucansynthaseassayshowe

5、dJiean-peptidecouldinhibittheactivityoKl,3)・0・D・glucansynthaseandreducetheradioactivityincorporationof(l,3)・卩・D-glucan.TheinhibitionpercentagesofJiean-peptideagainstPhytophthorasp.andColletotrichumgossypiiSouthwwere77.7%and77.5%respectively.ConclusionTheantifungalmechanismofJi

6、eapeptidewastheinhibitionofenzymeactivityof(l,3)・

7、3-D-ghicansynthase.Keywords:Jiean-peptide;antifiingalmechanism;(l,3)-0・D-glucansynthase捷安肽素是一种由芽泡杆菌产生的抗真菌活性多肽,具有广谱抗真菌活性,而且稳定性好、抑菌持久,具有很好的开发前景[1,2]。从捷安肽素对疫霉菌、辣椒炭疽病菌、灰霉菌、棉花枯萎病菌等多种常见重要植物病原真菌的抑菌性能可知,捷安肽素可以通过抑制真菌抱子萌发、菌丝生长而发挥抗真菌生长作用。

8、形态观察发现,捷安肽素可以破坏真菌的细胞壁结构,使真菌细胞呈现原牛质球状[3]。(1,3)■卩・D・葡聚糖合成酶(EC2.4.1.34;尿昔二磷酸■葡萄糖/(1,3)-P-D-葡聚糖・3■卜葡糖基转移酶)是一细胞膜结合酶,在细胞膜内侧聚合UDPG形成葡聚糖纤维,葡聚糖纤维分泌岀细胞膜形成网状支架,对真菌细胞壁的完整性及保护真菌抵抗低渗透压起重要作用[4,5]o本文作者釆用形态学方法和同位素标记法研究捷安肽素对真菌细胞壁及其(1,3)■卩・D■葡聚糖合成酶的作用,进一步深入探讨捷安肽素的抗真菌作用机理,为捷安肽素的进一步开发提供理论基础。1材料1」菌

9、种疫霉菌(Phytophthorasp.)、辣椒炭疽病菌(ColletotrichumgossypiiSouthw)灰霉菌

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