检疫性真菌病害

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1、第五章检疫性真菌病害小麦矮腥黑穗病Wheatdwarfbunt小麦印度腥黑穗病Wheatkarnalbunt烟草霜霉病Tobaccobluemold马铃薯癌肿病Potatowart榆树枯萎病Dutchelmdisease复习思考题植物检疫性真菌常见检疫检验技术直接检验染色检验洗涤检验保湿萌芽检验分离培养检验1.直接检验适用范围：具明显症状的植物材料主要工具：放大镜或解剖镜，主要是利用肉眼现场快速初检2.染色检验法原理：染病的组织，或病原菌本身，经特殊的化学药品处理后，可带有特殊的颜色例如：马铃薯癌肿病（Sync

2、hytriumendobioticum）薯块上癌瘤不明显时，可做徒手切片，加1滴1％的“藏花红”染色液，健康组织细胞壁呈亮红色，感病组织细胞壁呈暗红色。3.洗涤检验法原理：种子表面常附着真菌孢子，将一定量的样品放入容器内，加一定量的无菌水，充分振荡，可使病菌孢子洗涤下来，而后离心后，可沉淀，镜检沉淀物可确定其种类和数量。主要仪器和试剂：振荡器、离心机、显微镜、0.1％吐温溶液等主要试验流程如下：称取样品洗脱孢子（振荡）离心富集镜检计数影响检验结果的因素：种子表面的病菌孢子不一定能完全洗涤下来；离心管内，悬浮液表

3、面常形成一层极难沉降的孢子薄膜，管壁上也可能黏附孢子；将悬浮液滴于玻片时，由于孢子迅速沉淀，造成一些视野间孢子分布极不均匀；操作不够严格，造成人为误差。4.保湿萌芽检验原理：种子携带的真菌，无论外表黏附的还是潜伏种子内的，在种子萌发阶段即可开始侵染，甚至有些在种子还未萌发时就可长出病菌。主要仪器及试剂：吸水纸、沙土、冰箱、培养箱等。主要包括：保湿培养检验、沙土萌芽和土内萌芽检验等三种方法，其中保湿培养检验法是国内外最常用的一种方法。吸水纸法无菌吸水纸（3层）灭菌培养皿○○○○○吸水1－1.5cm培养、观察12h

4、光照黑暗交替恒温所观察到的结果示意图如下5.分离培养检测常规植物病理学方法小麦矮腥黑穗病Wheatdwarfbunt分布：是麦类黑穗病中危害最大、防治最难的一种病害，它于1847年及1860年先后发现于捷克和美国，在全世界范围内传播和蔓延，目前已在欧洲、北美、南美、澳洲、亚洲、非洲等40多个国家发生。寄主：禾本科5个族，18个属，65个种。主要栽培植物有冬小麦、大麦、黑麦，冰草属为天然发病的主要禾草寄主。危害性：1962年美国减产68.7％，1972年西部7州，平均减产17％，损失1.2亿Kg。菌瘿可存活10年

5、以上。症状：系统侵染性，表现为：病株特矮（1/3～1/2），分孽特多（>1倍），病穗特密，病粒特硬，有鱼腥臭味。病原菌：TilletiacontroversaJ.G.Kühn,inRabenhorst,Hedwigia13:188(1874)Positioninclassification:Tilletiaceae,Tilletiales,Exobasidiomycetidae,Ustilaginomycetes,Basidiomycota,Fungi形态特征：冬孢子，冬孢子萌发。生物学特征：冬孢子萌发-2～1

6、5（3~8）℃，弱光400～600lx，土壤含水量35～88％，萌发周期长>3个月。冬孢子内含有内源孢子萌发抑制剂。生理分化：美国15小种，德国8个小种。初侵染来源：土壤带菌，冬孢子可存活1年，菌瘿可存活3～10年。传播：种子；运输工具、包装材料及下脚料；粪肥；雨水。发病规律：侵染期长，12月～4月，1～2月是盛期，幼嫩分蘖处侵入，细胞间蔓延，50天到生长点，随寄主生长，菌丝进入穗原始体，到各个花器，破坏子房，形成冬孢子堆。长时间3～8℃低温利于侵染；冬麦区苗期日平均温度0～10℃达45d以上，即使没有雪覆盖也

7、同样利于发病。TCK的循环:流行因素：大面积感病品种、足够菌源、冬季日均温0～10℃的日数》40d、稳定积雪70d以上，积雪厚度10cm以上。国内适生区域：西北高原冬麦区和新疆、青藏高原晚播冬麦区极为适宜病害的发生，属高度危险区；江淮流域及华北、东北冬麦区基本适合病害发生，属危险区；西南高海拔地区有时也具备病菌入侵条件，也可能受害；春麦区不发病。检验与检测：直接检查：放大镜菌瘿洗涤检查：50g＋100ml无菌水，振荡5min，10～15ml离心3min，定容，制片观察。冬孢子鉴定：孢子形态鉴定（网脊高度、胶鞘厚

8、度、网目径、孢子大小、不育细胞等）。冬孢子自发荧光实验：TCK孢子于荧光显微镜下有自发荧光现象，而TCT孢子则无。冬孢子萌发试验：5℃、17℃下，光照。矮腥孢子5℃下21d开始萌发，17℃不萌发。PCR技术：引物5`-TGACAACGGATCTCTTGGTT-3`、5`-TCACCAACTCCAAGCAATCT-3`,206bp处有特异扩增带。检疫和防治进口小麦和原粮必须进行检疫，病麦