实验七叶绿素ab含量的测定及植物光合强度的测定

《实验七叶绿素ab含量的测定及植物光合强度的测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、实验七叶绿素a、b含量的测定及植物光合强度的测定一、叶绿素a、b含量测定实验原理（含量占3/4）（含量占1/4）叶绿体色素叶绿素类胡萝卜素胡萝卜素叶黄素叶绿素b叶绿素a分光光度法根据叶绿素对某一特定波长的可见光具有吸收能力，用Lambert-Beer定律计算出叶绿素的含量。Lambert-Beer定律A＝KC吸光度吸收系数浓度叶绿素a的最大吸收峰：663nm叶绿素b的最大吸收峰：645nmLambert-Beer定律A＝KCA――吸光度K――吸收系数C――浓度Ka663：82.04Kb663：9.27Ka

2、645：16.75Kb645：45.60A663=82.04Ca+9.27CbA645=16.75Ca+45.60CbCa=12.7A663-2.69A645Cb=22.9A645-4.68A663CT=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663(mg/L)？器材与试剂实验仪器：研钵、漏斗、分光光度计、三角烧瓶实验试剂：丙酮、石英砂、碳酸钙实验材料：青菜叶片实验步骤色素提取：过滤取叶1g加少许石英砂、碳酸钙丙酮5ml研磨成匀浆再用15ml丙酮转移至试管中，避光保存至残渣发白3.计算2.提取液1ml，用丙

3、酮稀释至10ml分光光度计下分别读取A663、A645Ca=12.7A663-2.69A645Cb=22.9A645-4.68A663CT=Ca+Cb=20.2A645+8.02A663(mg/L)以丙酮为对照，叶绿素a、b含量：C×提取液体积（20ml）×稀释倍数（10）(mg/g)样品的重量（1g）二、植物光合强度的测定CO2+H2O(CH2O)+O2光能叶绿体测定干物质的积累测定O2的释放测定CO2的吸收半叶法红外气体分析仪法氧电极法改良半叶法破坏韧皮部的运输选择测定样品叶片基部处理剪取样品称重比较结

4、果计算mg（干重）dm-2h-1光合速率=W光照-W未光照S×t红外线CO2分析仪法CO2对红外线4.26微米处有较强的吸收能力，其吸收关系遵循Lambert-Beer定律。CO2气体分析仪(infraredCO2gasanalyzer简称IRGA)进气泵参比室叶室排气IARGACeCo光合速率：f（Ce–Co）/S20世纪50年代国外设计制造出红外线C02气体分析仪20世纪70年代我国制造出了红外线C02气体分析仪美国LI-COR生产的LI-6400便携式光合作用仪英国ADC公司生产LCPRO+便携式光合

5、作用仪LC智能便携式光合作用仪系统演示LCPRO+光合作用仪实验操作分光光度法测叶绿素a、b含量实验基本技能（二）试剂的配制及化学试剂的规格溶液配制的一般步骤：计算称量转移洗涤定容摇匀溶解装瓶贴签1.计算如：配制500mL0.4mol/LNaCl溶液需要称量的氯化钠的质量：n=cV=0.4mol/L×0.5L=0.2molm=nM=0.2mol×58.5g/mol=11.7g如：配制100ml质量分数为5％的NaCl溶液水的密度近似看作1g/ml用天平称取5gNaCl,在烧杯中用水溶解，最后定容到100ml

6、2.称量仪器：托盘天平、砝码（镊子）、称量纸、药匙注意事项：⑴使用前要调零⑵两个托盘上各放一张大小相同的称量纸⑶称量时遵循左物右码的原则⑷用镊子夹取砝码应按照从大到小的顺序⑸称量完毕应将砝码放回盒中，游码归零思考：NaOH能否直接放在称量纸上称量？为什么？应如何操作？3.溶解应在烧杯中溶解，不能在容量瓶中溶解。思考：若量取的是浓硫酸需要稀释，应如何操作才是正确的？4.转移由于容量瓶瓶颈较细，为避免液体洒在外面，应用玻璃棒引流。提问：将烧杯中的氯化钠溶液转移到容量瓶中，此时溶质是否完全被转移到容量瓶中？应如何

7、处理？5.洗涤用少量蒸馏水洗涤2～3次，洗涤液要全部转移到容量瓶中。思考：如果用量筒量取液体药品，量筒要洗涤吗？如果用量筒量取液体药品，量筒不必洗涤。因为这是量筒的“自然残留液”，若洗涤后转移到容量瓶中会导致所配溶液浓度偏高。但是使用量筒时应注意选择的量筒与量取液体的体积相匹配。6.定容向容量瓶中加入蒸馏水，在距离刻度1～2cm时，改用胶头滴管滴加蒸馏水至刻度线。思考：若定容时不小心液面超过了刻度线，怎么办？能用胶头滴管把多余的液体取出吗？7.摇匀将容量瓶盖好塞子，如图示，把容量瓶反复倒转，使溶液混合均匀。

8、思考：摇匀后发现液面低于刻线，能否补充水？不能。因为是部分溶液在润湿容量瓶瓶颈处所致。8.装瓶贴签容量瓶中不能存放溶液，因此要把配制好的溶液转移到试剂瓶中，贴好标签，注明溶液的名称和浓度(姓名，时间）。溶液配制的一般步骤：计算称量转移洗涤定容摇匀溶解装瓶贴签化学试剂的规格目前，我国生产的化学试剂规格一般可分为优级纯、分析纯、化学纯和实验试剂4个等级。1.优级纯试剂（保证试剂，guaranteedreagent，简