《倒置荧光显微镜》ppt课件

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1、倒置荧光显微镜操作及注意事项李玉红显微镜部件及名称显微镜机体明视场(BF)镜检关键点：从光路中卸下其它形式观察需要的所有光学组件，聚光器调节好（调节聚焦和对中），转动孔径光阑调节好像的清晰度。1，复位1）逆时针转动，松开透射照明器中的“聚光器再聚焦指紧螺钉”。2）把“目镜筒转盘”设置到＜O＞位。3）把显微镜右侧的“中间放大倍数刻度盘”打到＜1X＞。4）逆时针转动，松开显微镜右侧粗∕微调旋钮后面的“物镜再聚焦定位环”。2.打开透射照明器1）把电源后部的“外部开关”打到开的位置。2）把电源“电源开关”打开。（把开关拨至│

2、）3）按下显微镜左侧的“照明器开关”接通灯泡。3.调节灯泡亮度保证色彩真实。1）把显微镜左侧的“亮度调节盘”设置成＜12V100W＞。2）把透射照明器中的“NCB11滤色片”插入光路中。3）把透射照明器中的“ND4滤色片”插入光路中。4.调节光路1）把10X物镜转到光路中。2）把显微镜右侧的“光路转换盘”转到＜1＞的位置。（100%光到观察口）3）向上推透射照明器上的“视场光阑杆”完全打开视场光阑。4）将系统聚光器上的“孔径光阑杆”转至右侧极限处把“孔径光阑”完全打开。5）转动聚光器调焦旋钮把聚光器调至最低位置。5.明

3、视场观察时对显微镜的调整1）把“聚光器转盘”转到＜A＞位置。6．调节视度及瞳距1）将显微镜前部的“摄影取景框转盘”逆时针旋转，使摄影取景框进入光路。2）用左眼对着左侧目镜，转动目镜“屈光度调节环”，使取景框中的双十字线清晰成像。3）用右眼对着右侧目镜，转动目镜“屈光度调节环”，使取景框中的双十字线清晰成像。4）将显微镜前部的“摄影取景框转盘”顺时针旋转，使其退出光路。5）调节目镜瞳距，将两目镜视场所见的影像重合在一起。7.调焦1）将样品放置载物台中。2）转动同轴粗微调旋钮，将标本对好焦。8.聚光器中心调节1）确信10X

4、物镜在光路中。2）将“视场光阑调节杆”降低直到能从目镜看到视场光阑像。3）转动“聚光器调焦钮”升降聚光器，使视场光阑像清晰地成象在标本面上。4）转动两个“聚光器中心调节螺钉”，使视场光阑像在视场中心。5）更换40X物镜。6）调节“视场光阑调节杆”，使视场光阑的象与视场大致相同。7）转动两个“聚光器中心调节螺钉”，使视场光阑像在视场正中。9.进行观察1）选择要使用的物镜2）移动系统聚光器上的“孔径光阑调节杆”，使孔径为物镜数值孔径的70－80%。（“把目镜筒转盘”设到＜B＞位置，转动勃氏镜调焦螺钉使其聚焦，当观察到物镜的

5、出瞳和孔径光栏的象时，调节其大小。）3）调节“视场光阑调节杆”使视场光阑像与视场相大致相同。4）把透射照明器里的“ND减光片”进入或退出光路以调节视场亮度。◆补充说明如果不需要色温很准确的颜色，可以通过显微镜左侧的“亮度调节盘”，改变灯泡电压来调节亮度。10.更换样品利用显微镜主体上的“物镜再聚焦定位环”，照明器上的“倾斜装置”，“聚光器再聚焦指紧螺钉，可容易更换样品。11.显微镜操作结束后1)关闭电源开关(开关拨至O)2)灯室冷却后，把显微镜上的聚乙烯防尘罩盖好。相差（PH）显微术关键点：将有ph标记的物镜与物镜相同

6、ph标记的聚光器模块一起送入光路，在进行显微术前，校正(对中)物镜里的相差板及聚光器模块里的环形光阑。1.用明视场（BF）显微术对样品聚焦。2.相差观察时对显微镜的调整。1)将ph物镜转入光路。2)转动“聚光器转盘”，使其与在光路中的物镜(步骤1中所安置的)具有相同的ph标记。3)向右转动聚光器上的“孔径光阑调节杆”，完全打开孔径光阑。◆补充说明如果孔径光阑没有完全打开，光路中的环形光阑将受到限制，影响相差效果。4)提高透射照明器中的“视场光阑调节杆”位置，使视场光阑完全打开。3.对中环形光阑1)把“目镜筒转盘”设到<

7、B>位置，转动勃氏镜聚焦螺钉，使环形光阑像清晰。2)用六角起子转动聚光器模块中的两个“环形光阑对中螺钉”，使环形光阑像与物镜中的相差板环形像同心。3)把目镜筒转盘位置再转到上。4.进行观察1)把聚光器“孔径光阑”完全打开。2)移动透射照明器上的“视场光阑调节杆”，使视场光阑像大小与视场大小接近。3)把透射照明器上的“NCB11滤色片”从光路中移开，把“GIF滤色片”移进光路。(提高反差)4)可通过把“ND滤色片”移进或移出光路来调节视场亮度。◆补充说明如果不需要色温准确的颜色，可以通过显微镜左侧的“亮度调节盘”，

8、改变灯泡电压来调节亮度。5.使用不同放大倍数的物镜进行观察1)把所需放大倍数的相差物镜移入光路。2)转动“聚光器转盘”，使其与在光路上物镜（步骤1中所安置的）具有相同的ph标记。3)调节放入光路中的环形光阑中心。(见程序3)6.更换样品利用使用显微镜主机上的“物镜再聚焦定位环”，透射照明器上的“倾斜”装置及“聚光器再聚焦指紧螺钉”