微生物复习题重点

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1、一、微生物的鉴定一三部曲：获得该微生物的纯培养、测定一系列必要的鉴定指标、查找权威性鉴定手册。经典分类鉴定依据：1、形态特征：培养即菌落特征（菌落的形状、大小、颜色、表面状况等）；细胞形态：形状（球形、杆状、弧形、螺旋形、丝状等）；大小（细胞的宽度和直径）；排列方式（单个、成对、成链等）；特殊的细胞结构（鞭毛、芽孢、孢子）2、生理生化特征：营养类型（利用氮源、碳源、生长因子的能力）；需氧性（好氧、厌氧、兼性厌氧）；代谢产物的种类和特性；生化试验（糖发酵试验、甲基红试验、乙酰甲基甲醇试验、吲哚试验、硫化氢试验等）3、生态特征（在自然界的分布情况，与其他生物有否寄生

2、或共性关系，宿主种类及与宿主关系等）4、血清学反应（抗原和抗体相互作用反应）5、噬菌体（phage）的敏感性。6、遗传特性：DNA的碱基组成（G+Cmol%）。现代分类鉴定依据：1、形态学特征（在不同类群中进化速度差异大、不准确）；2、分析和比较生物大分子的结构特征（以蛋白质、DNA、RNA作为主要指征）；3、微生物的遗传型的鉴定（DNA碱基比列的鉴定、核酸分子杂交、16SrRNA寡核苷酸编目分析、氨基酸序列和蛋白质分析、遗传重组）；4、细胞化学成分鉴定（细胞壁的化学成分、全细胞水解液的糖型、磷酸类脂的成分分析、醌类的分析）；5、现代分子生物学和免疫学技术的应用

3、（DNA探针、PCR、DNA芯片、酶联免疫吸附测定、免疫荧光技术、放射免疫技术等）。二、核酸鉴定微生物的方法依据：1、核酸的分子杂交一间接比较不同微生物DNA碱基排列顺序的相似性。©DNA-DNA杂交一将未标记的各种微生物菌株的单链DNA预先同定在硝酸纤维素微孔滤膜上，再用经同位素标记的参考菌株的单链DNA小分子片段在最适复性温度条件下与膜上的DNA单链杂交，杂交完毕后洗去滤膜上未配对结合的带标记的DNA片段，然后测定各菌株DNA滤膜的放射性强度。以参考菌株自身复性结合的放射性计数值为100%,即可计算出其他菌株与参考菌株的相对百分数，这些百分数值即分别代表这些

4、菌株与参考菌株的同源性或相似性水平，同源性在70%以上的菌株可认为是同一个种。②DNA-rRNA杂交…当两个菌株DNA的非配对碱基超过10%到20%吋，DNA-DNA杂交往往不能形成双链，为更进一步比较亲缘关系较远的菌株，可川rRNA与DNA杂交。③核酸探针技术…两条不同来源的核酸链如果具有互补的碱基序列，就能够特异性的结合而成为分子杂交链。裾此，将己知核苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法标记，加入已变性的被检DNA样品中，在一定条件下即可与该样品中有同源序列的DNA区段形成杂交双链，从而达到鉴定样品中DNA的0的，这种能认识到特异性核苷酸序列有标记的单链叫D

5、NA分子核酸探针或基因探针。三、菌株的定义及命名菌株：表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而生成的纯种群体及其一切后代（起源于共同祖先并保持祖先特性的一组纯种后代群）。因此，一种微生物的每一不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。菌株强调的是遗传性纯的谱系。微生物的命名：学名，微生物的科学名称，由拉丁词或拉丁化的外来词组成（第一个词是属名，第二个词是种名）。主要用双名法，少数情况用三名法。双名法：学名=属名+种加词+（首次走名人）+现足名人+现名年份必要，需用斜体表示可省略，用正体表示“菌株”数量是无限的，“种”的数量是有限的。菌株名称：①在种名后面自行加上数

6、字、地名或符号等。如BacillussuhtilisAS1.389ATCC=AmericanTypeCultureCollection美国模式菌种保贼屮心AS二AcademiaSinica（中国科学院的缩写）BacillussubtilisBF7658BF=北坊②当文章中前面己出现过某学名后面再出现时，可将后出现的属名简写成1-3个字母。如：BacillussubillsAS1.398B.subtilisBF7658Bac.brevis---短it:孢杆飽AS=AcademiaSinica（中国科学院的缩写）EscherichiacoliB大肠杆菌B株对酵母类的

7、编号AS2•辦对放线菌的编号AS4.辦AS2.375一株面包酵母AS2.4另一株啤酒酵母AS2.393一株酒精酵母AS2.346一株果酒酵母对细菌类的编号AS1•⑽对霉菌类的编号AS3•辦常用的菌株有：AS2.173—株葡萄糖酵母AS2.14—株啤酒酵母应用：具有典型特征的菌株为标准株，是国际和国内所公认的可供细菌鉴定或研究，生产上对比使用。四、国家标准对于微生物检测指标有三个：菌落总数、大肠杆菌、致病菌（病原菌）。五、微生物抗原性：病原菌包括细菌、病毒、真菌、原生动物等，进入宿主后可作为抗原而引起免疫反应。不同的病原菌因其结构的差异，故抗原性的差别也很大，以细

8、菌病原菌为例：细菌是一类