大肠菌群的测定方法

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1、大肠菌群的测定论文目录1普通光学显微镜的使用2微生物大小的测定3微生物直接计数法4细菌的简单染色和革兰氏染色法5常用玻璃器皿的清洗及包扎6牛肉膏蛋白胨培养基的制备7灭菌8微生物溶液的十倍稀释法9微生物平板菌落计数法10微生物的分离、接种和培养大型实验：水中细菌总数和大肠菌群的检测厌氧菌的分离、培养及鉴定第一节普通光学显微镜的使用一．实验器材普通光学显微镜，切片标本，香柏油，二甲苯，擦镜纸。二．实验步骤图？显微镜的结构1-目镜2-镜筒3.物镜转换器4.物镜5.通光孔6.聚光器7.光圈8.反光镜9.粗调节器  10.细调节器11.镜臂12.推进器13.载物台14.倾斜关节  15.镜柱

2、  16.镜座  17.照明装置   18.粗调限位环凸柄(一)低倍镜的使用1.把显微镜放在桌面的左侧，镜臂对向胸前，坐下进行操作。用手转动粗调螺旋，使镜筒上升，然后转动物镜转换器，使低倍镜对准镜台中央圆孔（当转动到听见“咔”声响，或同时亦感到有阻力时立即停止转动，说明物镜已与镜筒成一直线）。2.对光：拨动聚光镜底部圆环的小柄，使光栏完全打开。旋转聚光镜升降螺旋，使聚光镜上升到和镜台相平。用左眼（两个眼睛都要睁开）在目镜上观察，同时用手调整反光镜，对好光源。要求视野达到完全均匀明亮。3.放置玻片标本：取玻片标本放在镜台上，有盖玻片的一面朝上。玻片两端用移动器夹住，然后转动螺旋，使玻

3、片上要观察的标本对准镜中央圆孔。注意，镜台上的刻度可以标示玻片的坐标位置。4.调节物距：转动粗调螺旋，使低倍镜距玻片标本0.5mm左右。注意：必须从显微镜侧面观察物镜与玻片的距离。切勿用眼在目镜上观察的同时转动粗调螺旋，以防镜头碰撞玻片造成损坏。用左眼从目镜上观察，用手慢慢转动粗调螺旋下降镜台，当视野中出现物像时，再调节细调螺旋，直至视野中出现清晰的物像（许多椭圆形的红细胞）为止。如果物像不在视野中央，可稍微移动玻片位置（注意：移动玻片的方向与观察物像移动的方向恰好是相反的）。5、使用推动器移动标本认真观察标本各部分，寻找要观察的目标。(二)高倍镜的使用1.一定要先在低倍镜下找到要

4、观察的标本物像后，并把要放大的部分移至视野正中，同时调节到最清晰程度，才能进行高倍镜的观察。2.转动物镜转换器，用高倍镜（40×）观察。使高倍镜转到镜台中央圆孔处。转换高倍镜时速度要慢，要细心，并从侧面进行观察（防止高倍镜碰撞玻片）。如果高倍镜碰到玻片，说明低倍镜的物距没有调节好，应重新进行操作。3.调节物距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察。这时物像往往不清楚、或者要观察的部分不在视野当中，可用细调螺旋慢慢向上或向下转动（切勿用粗调螺旋）即能清楚看到物像。一般只需转动半圈或一圈就能达到要求。注意：此过程中不动任何旋钮，只用细调节器稍加调节，就可获得清晰的图像。转动转换器时，不要

5、用手指直接扳动物镜镜头。(三)油镜的使用1.首先在高倍镜下找到所要观察的标本后，把所要观察的部分移至视野中央。2.转动物镜转换器，移开高倍镜，调转高倍镜（40×）和油镜（100×）呈“八”字，在标本上所要观察的位置加一滴镜油（香柏油）。3.转动物镜转换器，转换油镜，使之对准镜台中央圆孔处，旋进油镜。调节光线至最大光圈。4.转换好油镜后，用左眼在目镜上观察。物像如不清楚，可用细调螺旋慢慢向上或向下转动，直至视野中出现清晰的物像。如仍看不清标本，需重新用低倍镜、高倍镜观察，然后再转换油镜。（四）观察完毕的处理油镜镜头：先用干净擦镜纸擦1～2次，然后用二甲苯润湿擦镜纸，再擦1次，最后再用

6、干净的擦镜纸擦2次。擦拭镜头应顺着一个方向擦，不能来回擦拭。切片标本：先用吸水纸擦去香柏油；再滴一滴二甲苯在上面，用吸水纸擦去，最后用水清洗。显微镜：物镜镜头转成“八”字形，下降载物台至最低点，取下切片标本，关闭开关，拔掉电源线，如实填写使用情况，填罩上皮罩。将显微镜放回镜箱。搬动显微镜时应一手握镜臂，一手托镜座。（五）使用显微镜注意事项1.持镜时要一手紧握镜臂，一手托住镜座，绝不能一把提起显微镜便走，以防目镜从镜筒滑出或反光镜脱落。2.轻拿轻放，不要把显微镜放在实验台边缘，防止碰翻落地。3.显微镜光学系统部件要用清洁的擦镜纸轻轻揩擦，切勿口吹、手抹或用粗布揩擦。4.使用时先用低倍

7、镜调整光线。观察活体标本或染色较浅的标本时，要适当关小可变光栏便视野变暗，方能看得清楚。5.放置玻片标本时要对准镜台孔正中央，并且不能反放玻片，如标本玻片反放时高倍镜下看不到物像，并容易压坏玻片或物镜。6.观察时要双目睁开，切勿闭上一只眼睛。左眼观察视野，右眼用以绘图。低倍镜用粗调螺旋调节物距，高倍镜要用细调螺旋，粗、细调节螺旋都不能单方向过度地旋转。单向上升粗调螺旋会压碎镜片和损坏物镜。7.不要随便取出目镜，以防尘土落人物镜上。也不要任意拆卸任何零件，以防损坏。8.