食管鳞状细胞癌中pinch蛋白的表达及意义

食管鳞状细胞癌中pinch蛋白的表达及意义

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时间:2018-11-28

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1、食管鳞状细胞癌中PINCH蛋白的表达及意义作者:朱振龙,杨艳红,张钰,王政民,崔冬生,张金廷 王铭维,孙晓峰,AnnRearden【摘要】目的探讨PINCH蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组化ABC法检测10例正常食管粘膜组织和64例食管鳞状细胞癌组织中PINCH蛋白的表达,并分析其临床意义。结果PINCH蛋白在鳞癌组织相关间质中呈异质性表达,其阳性率为56.25%(36/64),明显高于正常食管粘膜组织(0/10)(P<0.05),差异有显著性,而且在肿瘤浸润边缘阳性更明显。PINCH蛋白表达与患者性别、年龄及鳞癌组织学分级

2、无相关性;淋巴结转移组的鳞癌组织中PINCH蛋白阳性表达率为90%(18/20),未转移组鳞癌病例中阳性率为40.91%(18/44),二者相比差异有显著性(P<0.05)。结论PINCH蛋白在食管鳞癌中异常表达,可能利于肿瘤的浸润和转移。提示PINCH蛋白可作一个肿瘤相关间质的标志物来预测肿瘤浸润和淋巴结转移的能力。在肿瘤的预后判断上有重要意义,并可能成为与肿瘤间质相关的抗肿瘤治疗的一个新靶点。【关键词】PINCH蛋白;鳞癌;食管;免疫组织化学ExpressionandSignificanceofPINCHProtEininEsophagusSqua

3、mousCellCarcinomaKeyouscellcarcinoma;Esophagus;Immunohistochemistry在信号传导中,接头蛋白通过蛋白相互反应结构域而发挥作用,其中一个重要的结构域是一种双锌指结构,该结构是LIM(Lin11,Isl1andMec3Proteins)家族的特征[1,2]。PINCH(Particularyinterestingne连续切片,常规HE染色和免疫组织化学ABC法染色。所用兔抗人PINCH蛋白多克隆抗体由Prof.AnnRearden惠赠(DepartmentofPathology,Univ

4、ersityofCalifornia,U.S.A.),二抗、三抗购自福州迈新生物技术开发有限公司。免疫组织化学主要染色过程:①切片脱蜡水化;②3%H2O2甲醇灭活内源性过氧化物酶;③依次滴加一抗、二抗和三抗;④DAB显色;⑤苏木精复染;⑥常规脱水,透明、封片。用已知阳性的乳腺癌组织作为阳性对照。1.4染色结果判断以组织间质中纤维母细胞样细胞的胞膜及胞质出现棕黄色颗粒为阳性细胞。每例随机选出10个不重复、不重叠的高倍镜视野(10×40),计数阳性细胞数及所有细胞数,计算阳性细胞率=∑阳性细胞数/∑细胞数×100%。根据阳性细胞率进行分级,PINCH()

5、,阳性细胞率<20%;PINCH(+),阳性细胞率20%~50%;PINCH(++),阳性细胞率>50%。1.5统计学分析用χ2检验进行统计学处理,P<0.05为差异有显著意义。2结果2.1PINCH蛋白在正常食管粘膜组织中的表达在10例正常食管粘膜组织中,除1例在上皮层下1/3有灶性阳性表达外,见图1,其余所有被检组织,无论是上皮、还是间质,均无阳性表达。且这1例的阳性表达部位主要在基底层细胞连接处和棘细胞层下1/3的细胞间连接处特别在棘细胞层细胞连接处表达明显,见图2。2.2PINCH蛋白在食管鳞癌组织中的表达在64例被检癌组织中,有36例PINC

6、H蛋白在肿瘤间质中阳性表达,见图3。此外,尚发现有少量癌细胞的胞质及胞膜上有PINCH阳性表达,强度较弱,见图4。高倍镜下,阳性表达部位在癌细胞间的细胞间桥上,见图5。在36例间质阳性表达病例中,发现PINCH蛋白的表达呈明显异质性,同一切片不同区域阳性细胞多少不一,分布不均,阳性反应染色深浅不一;特别是其中的13例肿瘤中,在肿瘤浸润的边缘间质组织中PINCH蛋白表达更显著,见图6。统计学分析表明PINCH蛋白在食管鳞癌间质中的阳性表达率为56.25%(36/64)明显高于正常食管粘膜组织0(0/10),二者差异有显著性(P<0.05)。2.3PINC

7、H蛋白表达与患者临床病理特征的关系研究结果显示,PINCH蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达与患者性别、年龄及肿瘤的组织学分级无明显相关性(P>0.05);但在淋巴结转移组其阳性表达率为90.00%,明显高于淋巴结无转移组40.91%,二者相比差异有显著性(P<0.05),见表1。表1PINCH蛋白表达与食管鳞癌患者3讨论PINCH蛋白是一种含有5个LIM结构域的配体蛋白(adaptorprotein)蛋白,免疫印迹结果表明其单体相对分子质量为3.7×104[4]。它与整合素一起参与了细胞的粘附作用,调节细胞的形态改变和迁移。然而PINCH并不是直接与整合素

8、相结合,而是借其LIM结构域的第一个双锌指结构与ILK(integrinlinkedkina

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