欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:26508072
大小:51.50 KB
页数:5页
时间:2018-11-27
《β2微球蛋白的检测及临床意义》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、β2微球蛋白的检测及临床意义【关键词】蛋白β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-M)是一种相对分子量为11800的蛋白质。β2-M存在于除红细胞和胎盘滋养层细胞以外的所有有核细胞表面,特别是淋巴细胞和肿瘤细胞,在免疫应答中起重要作用。1生理与生化β2-M是人类白细胞抗原(HLA)Ⅰ类分子的β链(轻链部分),因电泳时出现于β2区带而得名。β2-M是由100个氨基酸组成的单链多肽,它以非共价键与HLAⅠ类分子中的重链结合,并参与维持三级结构。β2-M分子内含有一对二硫键,不含糖基,等电点(pI)为5.7,半衰期约为107m
2、in。在健康人中β2-M以相对稳定的速率合成,约为150~200mg/d,随HLA的更新、代谢、降解释放入体液。因其相对分子量小且不与血浆蛋白结合,可自由地经肾小球滤入原尿,滤过的β2-M在近端小管几乎全部被重吸收,吸收率达99.9%,重吸收的β2-M在肾小管上皮细胞中被分解破坏,因此,正常情况下仅有微量β2-M向尿中排出。血清中β2-M浓度与排泄率和合成两者相关,健康人群其血清浓度相对稳定。尿液中β2-M排出量取决于肾小管的重吸收能力和血中β2-M浓度。2标本采集与分析前变异2.1血液标本血清、血浆标本皆可,以血清标本为佳。在抽取血
3、液标本后,应尽快分离血清或血浆,在室温不宜超过3h,分离后的标本4℃可保存1周,-20℃下可较长时间稳定。2.2尿液标本分子量尿液标本中β2-M在pH<6.0时很不稳定,2h内发生变性,即使在膀胱内也是同样的。故尿液标本不宜采集清晨第一次尿(晨尿往往pH<6.0),而通常收集在白天任意时间的尿样本。排尿后必须检测pH,必要时可以在盛器内加几滴2mol/LNaOH使其碱化。如收集24h尿液标本,宜在采集尿液标本的前1天,给患者服用NaHCO3等碱性药物,使尿液pH>6.0,按要求收集的尿液标本放4℃可保存4周,-70℃可稳定2年,但应避
4、免反复冻融。3检测方法主要采用免疫测定法,目前已报道的测定血清(血浆)及尿液中β2-M的方法有多种:包括放射免疫分析法(RIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、时间分辨荧光免疫分析法、免疫透射比浊法、免疫散射比浊法、胶乳免疫散射比浊法、胶乳增强免疫比浊法等。以上方法国内外不少公司推出了商品化试剂盒,具体操作方法详见试剂盒使用说明。4检测法举例胶乳增强免疫比浊法。4.1原理β2-M与包被在乳胶颗粒上的抗人β2-M抗体结合产生浊度,其浊度与β2-M浓度成正比。4.2试剂盒组成(1)R1:Tris缓冲液(pH8.2)。(2)R2:胶乳包被抗
5、人β2-M抗体。(3)标准液1瓶。4.3标本来源与保存(1)血清:在2℃~8℃可稳定7天,-20℃可稳定3个月。(2)尿液:用K2HPO4调整pH至7~8,在2℃~8℃可稳定2天,在-20℃可稳定2个月。4.4注意事项(1)试剂中含有叠氮钠作保存剂,不要吞入,避免接触皮肤和黏膜。(2)高溶血及脂血样品不适于测定。(3)可适用于自动分析仪。4.5参考值范围(1)血清(血浆):1.0~3.0mg/L。(2)随机尿:≤300mg/L。(3)24h尿:33~363mg/L。4.6临床意义4.6.1血清β2-M浓度增高的意义血清β2-M浓度受体
6、内合成速度与尿液排泄率的影响。一些导致β2-M合成增加的疾病会使血清β2-M浓度升高。肾功能异常导致β2-M滤过减少时,血清β2-M浓度也会增高。(1)肾功能是影响血清β2-M浓度的主要因素。β2-M可自由经肾小球滤入原尿,滤过的β2-M在近端小管几乎全部被重吸收。在急性肾炎、慢性肾炎及慢性肾功能不全等疾病时,因肾小球滤过率(GFR)及肾血流量降低,导致β2-M滤过减少,血清β2-M浓度升高,β2-M与GFR呈负相关。测定β2-M血清能了解肾小球滤过功能。但由于其他疾病也可引起血清β2-M升高,为此,血清β2-M评价GFR的应用有一定
7、局限性。肾衰竭患者血清β2-M显著升高。肾移植时如有排斥反应,一方面β2-M合成增多,另一方面肾功能受影响,β2-M滤过减少,血清β2-M常升高,上升可先于临床诊断移植排斥2~7天,也较血清肌酐的增高早1~3天。对于同种骨髓移植的急、慢性排斥反应,监测β2-M浓度是一项很好的指标。此外,高血压糖尿病等引起肾损伤亦可使血清β2-M增高,具有早期诊断意义。(2)一些恶性肿瘤,如恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金病、多发性骨髓瘤、肝癌、肺癌及胃癌病人血清β2-M浓度可明显升高。血清β2-M浓度还可用于评价骨髓瘤的预后及治
8、疗效果。(3)病毒感染如巨细胞病毒、EB病毒、乙肝或丙肝病毒及HIV感染时,血清β2-M可増高。血清β2-M可用来监测HIV感染者的发病过程。(4)自身免疫疾病时,尤其是系统性红斑狼疮(SLE)活动期,血清β2-M往往升
此文档下载收益归作者所有