毕设:探讨rna分析技术在法庭刑事案件中的应用

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1、毕设:探讨RNA分析技术在法庭刑事案件中的应用-->无忧毕设:探讨RNA分析技术在法庭刑事案件中的应用在刑事案件的侦破中,毕业论文范文越来越多地受益于法医学检验方法的协助。近十多年来,DNA分析技术在法医学领域可以在罪犯和作案现场之间找到关联证据,缩小嫌犯范围。尽管DNA分析方法作为鉴定刑事案件的重要辅助手段已经得到普遍认可,但由于案件形式的多样化,仅靠DNA的检验方法已不能满足所有刑事案件的需要。随着对RNA特性的认识不断加深以及RNA技术的逐渐成熟,研究人员开始利用RNA分析方法解决法医学问题,如推断死亡时间,鉴别体液,检测血痕形成

2、时间等。本文现将RNA分析技术在法庭刑事案件中的应用做一综述。1应用于法医学的RNA技术方法及进展由于RNA代谢活跃,易于降解。RNA一直被认为不适合作为法医科学研究的客观指标。然而最新研究[1]发现某些RNA分子远比人们想象的稳定,通过相应的RNA技术可以检测出死后个体不同组织中特异性表达的RNA分子,利用RNA分子的降解与时间的相关性可为案件的侦破起到一定指示作用。目前应用于法医学领域中较常见的RNA检测方法有RNA分离纯化技术、Northernblot法、原位杂交(in-situhybridization)法[2-3]、RT-PC

3、R(reversetranscription-polymorphychainreaction)法及最新发现应用于小RNA分子研究中的微列阵技术[4]等。这些技术方法不同程度上满足了法医学中微量RNA检测的需要,能够很好地应用于法医学中痕量样本的检测。随着科技的发展和成熟,这些RNA分析技术将会更广泛地应用于法医学物证学、法医病理学及临床医学等各个方面,而发挥出巨大的社会和经济效益。2RNA分析技术在法医学中的应用2.1死亡时间推断死亡时间[5](postmorteminterval,PMI)推断,即推测死亡至尸体解剖时经历或间隔的时间。

4、准确PMI推断能为侦察工作提供线索,对于划定侦查范围、确定嫌疑犯或凶犯有无作案时间、确定案情性质、阐明作案过程均具有重要价值。EPI的检测[6]一直是法医病理学研究的重点和难点,传统方法主要依据不同时期尸体现象及胃内容物的消化程度进行检验,但由于受外界因素影响较大,检测结果往往带有一定的主观性、经验性。由于人们普遍认为RNA易于降解,其稳定性不如DNA,以RNA作为PMI特别是较晚期PMI推断的观测指标似乎不合适。然而对尸体检材的检测发现管家基因mRNA同样具有较高的稳定性[7],利用RT-PCR技术可以从干血中提取出管家基因GAPDH

5、的mRNA,这暗示了血痕中的RNA具有足够的稳定性,这些结果为RNA应用于EPI的检测提供了可行性依据。磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehydephosphatedehydrogenase,GAPDH)是参与糖酵解的关键酶,GAPDH作为管家基因几乎在所有组织中都高水平表达,在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的。β-肌动蛋白(β-actin)是细胞骨架的基本成分[8],作为细胞的结构蛋白在各种组织和细胞内稳定存在,表达几乎不随年龄及环境改变而发生变化。朱方成等[9]应用一步法荧光标记RT-PCR扩增技术检测大鼠死后不同时

6、间脑、肝、脾、肾组织中的GAPDH及β-actinmRNA的降解规律并进一步印证了管家基因mRNA的稳定性,这个发现可为PMI推断的法医学研究提供一种新的、客观、有效的观测指标,可作为常规PMI推断方法的补充。通过系统检测发现不同组织器官mRNA的稳定性(即检测时限)存在差异:肝、脾、肾组织中的GAPDH及β-actinmRNA对早、中期PMI推断有一定的应用价值,而脑组织尤其适合较晚期尸体,甚至是腐败尸体的PMI推断;与GAPDHmRNA相比,β-actinmRNA则更不易降解。随着PMI的延长,管家基因GAPDH及β-actinmR

7、NA的扩增产物逐渐减少并最终于不同时间内消失,呈现出一定的规律性。2.2损伤时间判定DNA分析技术虽然能够对个体进行认定识别,但难以提供案发现场所采集的生物样本的具体沉积时间。损伤时间推断(datingofRNA的降解速率远远大于GAPDHmRNA。为了检测死后个体组织内不同类型RNA的衰减率,一些学者对rRNA和mRNA的相对稳定性进行了比较研究[10]。研究发现人类血痕中的18SrRNA和β-actinmRNA的衰减比率在150天的时间里呈线性改变。利用RT-PCR技术定量分析两个RNA分子的降解情况[11],发现18SrRNA对β

8、-actinmRNA分子的比率随着时间的增加呈线性上升趋势。实验结果展示了两个RNA分子衰减程度的持续稳定性变化,同时这项技术不会受采集检材的大小差异的影响。目前损伤时间推断的研究主要是采用免疫组织化学、电

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