免疫色谱法与发光免疫分析法测量血清降钙素原

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1、免疫色谱法与发光免疫分析法测量血清降钙素原【摘要】目的目前临床上常用的检测血清降钙素原（ProcalcitoninPCT）的方法：半定量免疫色谱法（PCT-Q）和定量发光免疫分析法（PCT-L），我们的实验目的是比较这两种方法的一致性，更好地为临床诊断、治疗服务。方法73份人血清标本，分别采用PCT-Q和PCT-L两种方法检测PCT含量。PCT-Q检测结果将样本浓度分为四个级别，即：＜0.5ng/ml、≥0.5＜2ng/ml、≥2＜10ng/ml和≥10ng/ml。一致性用Cohen’s统计获得。结果65.8%样本PCT-Q与PCT-L的

2、检测结果在同一级别，27.4%样本检测结果上或下相差一个级别，一致性检验k=0.506，符合尚好。结论虽然利用PCT-Q检测血清PCT浓度快速并简单易行，但PCT-Q与PCT-L的检测结果并不总是一致的，对于有疑问或要求监测治疗的病例，PCT-L仍是首选的检测方法。【关键词】降钙素原；半定量；免疫色谱法；发光免疫分析法parisonofserumprocalcitonintestbetmunochromatographandimmunoluminometry【Abstract】ObjectiveThecoherenceparisonofs

3、erumprocalcitonin(PCT)betethods:thesemi-quantitativesolidphaseimmunoassay（PCT-Q）andthequantitativeluminometricassay（PCT-L）.MethodsSeventythreesamplesl、≥0.5＜2ng/ml、≥2＜10ng/ml和≥10ng/ml.Inparallel,serumprocalcitoninconcentrationseasuredeasureofconcordance.Results65.8%ofsampl

4、esplesethods.Cohen’skvalueis0.506.ConclusionPCT-QethodsforserumPCTmeasurement.Hoonitoringoftreatment.【Keymunochromatographictest;immunoluminometricassay降钙素原（ProcalcitoninPCT）作为一种新的严重细菌感染早期诊断指标，在国外已广泛应用于ICU，并取得了良好效果。PCT是一个具有创新意义的诊断指标，具有三大突出优点，一是可用于疾病的早期诊断：严重全身性细菌感染2～3hPCT浓

5、度开始升高，24～48h达到峰值。二是用于疾病的鉴别诊断，PCT是一种新的高敏感性和特异性细菌感染与非细菌感染鉴别诊断的指标〔1，2〕。三是它可用于感染病情的监测：PCT浓度与细菌感染严重程度呈正相关关系，随着感染的控制和病情的缓解，PCT浓度下降。目前临床常用检测PCT含量的方法有半定量免疫色谱法（SemiquantitativeimmunochromatographictestPCT-Q）和定量发光免疫分析法（QuantitativeimmunoluminometricassayPCT-L）。我们研究的目的是了解两种方法的符合程度和一

6、致性，更好地为临床诊断和治疗服务。1材料与方法1.1试剂与仪器PCT-Q、PCT-L检测试剂盒（德国BRAHMS公司），LumatLB-9507PCT分析仪（德国BRAHMS公司制造），TS-100脱色摇床（北京市新技术应用研究所）。1.2标本来源及处理本院门诊或病房患者，抽取静脉血2ml，离心10min（3000转/min），收集血清备用。样品在4h内检测，否则-20℃冰箱保存。1.3实验方法血清标本73份，每份样品分别采用PCT-Q和PCT-L两种方法进行检测。1.3.1PCT-Q检测利用一个标记有胶体金的抗catacalcin单克隆

7、小鼠抗体（示踪剂）和多克隆绵羊抗降钙素抗体（固相）做检测。病人的样品（血清）200μl加到检测孔后，示踪元素就结合到样品中的PCT，形成标记的抗原抗体复合物。这个复合物在检测系统中借助毛细作用移动通过含有检测带的区域，在此过程中，标记的抗原抗体复合物就结合到固相的抗PCT的抗体上，形成一个夹心式的复合物。当PCT浓度≥0.5ng/ml，这个复合物呈淡红色条带，条带的颜色强度直接与样品中PCT的浓度成正比。没有结合PCT的示踪剂扩散到对照条带区，在那里被固定，能产生非常强烈的红色条带，这个检测系统的功能是通过这条对照带来测定的。30min后

8、与参考卡片上提供的PCT浓度比色卡进行对比，报告样本的浓度级别(＜0.5ng/ml、≥0.5＜2ng/ml、≥2＜10ng/ml、≥10ng/ml)。1.3.2PCT-L检测利用免疫化学发光检