双料喉风散的提取工艺优化研究

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1、双料喉风散的提取工艺优化研究刘娜，林华庆,邓红，张蜀【摘要】　　目的研究双料喉风散中4味药材的最佳提取条件。方法采用正交设计法，以体外抑菌效果和苦参碱、盐酸小檗碱的含量为指标，以醇浓度、提取液倍数、提取次数、提取时间为因子进行实验。结果双料喉风散中4味药材的最佳提取条件是A1B1C2D3：即是用8倍量70%乙醇回流提取3次，第1次1h，第2次1h，第3次30min。结论优选得到的工艺稳定可行。【关键词】正交实验体外抑菌山豆根黄连提取工艺　　Abstract:ObjectiveTostudythebestextractionprocessforfourherbsthatarepose

2、dofShuangliaoHoufengmedicament.MethodsUsinginvitroinhibitoryeffectextractiontimeandthecontentsofmatrineandberberinehydrochlorideintheextractasindexes,orthogonaldesignizetheprocess.Theeffectoffourfactorssuchasalcoholconcentration,theproporationofeandthemumberofextractionumprocessconditionseant8

3、timesamountof70%ethanolbycycleextractionfor3times,thefirsttimeandthesecondtimeizedprocessisfeasiblefortheextraction.　　Keye;Extractiontechnology　　双料喉风散由山豆根、黄连、甘草和青黛等中药组成，具有清热解毒、消肿利咽等功效，用于肺胃热毒炽盛所致的咽喉肿痛、口腔糜烂、齿龈肿痛、鼻窦脓肿、皮肤溃烂等症；同时，对褥疮、脓疱疮、脚气、外耳道炎、新生儿臀部红斑等病症的治疗，经临床验证，疗效显著，可明显减轻症状〔1〕。但该方为散剂，在口腔中停留时间短，

4、影响其疗效。为将其制成制剂，本实验对该方中的部分组分（山豆根、黄连、甘草和青黛）提取工艺进行筛选，确定该复方的最佳提取工艺。　　1仪器与试药　　Ultimate3000液相色谱仪(美国戴安)，PDA-3000型检测器，CHROMELEONVersion数据处理机；SGC-300H智能型人工气候箱；旋转蒸发RE52-05，上海亚荣生化仪器厂。　　苦参碱、盐酸小檗碱对照品，购自中国药品生物制品检定所；含量测定用水为重蒸馏水，甲醇、乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。　　山豆根、黄连、甘草、青黛均购自广州致信中药饮片有限公司，批号060901。黄连产地四川、山豆根产地广西、甘草产地内蒙古、

5、青黛产地广东，经检验符合《中国药典》规定。　　菌株：金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌（本院微生物实验室保留菌株）。培养基：普通营养琼脂培养基。　　2方法与结果　　2.1正交实验设计在　　2.3.3盐酸小檗碱的含量测定方法对照品溶液的制备：精密称取盐酸小檗碱对照品，用甲醇溶解，制得每毫升中约含盐酸小檗碱50μg的对照品溶液；供试品溶液的制备：同“2.3.2”项中供试品溶液的制备方法；色谱条件与系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；乙腈-0.033mol·L-1KH2PO4水溶液（磷酸调pH至3.70）(28∶72)为流动相；检测波长为345nm，进样量10μl，理论塔板

6、数按盐酸小檗碱峰计算，应不低于2000；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，外标法计算，即得。　　2.4指标测评及处理正交实验结果见表3，方差分析结果见表4～6。表3L9(34)正交实验结果（略）表4体外抑菌方差分析（略）表5苦参碱方差分析（略）表6盐酸小檗碱方差分析（略）　　从表4～6可以看出，用对体外抑菌实验影响最为显著的是提取次数，优先顺序为：D>A>B>C；对苦参碱的含量影响最为显著的是醇的浓度，优先顺序为：A>B>D>C；对盐酸小檗碱含量影响最为显著的是提取次数，优先顺序为：D>C

7、>A>B。从表3可以看出，用正交设计表得出的最佳工艺，体外抑菌和盐酸小檗碱的完全相同为A1B3C3D3，苦参碱为A1B1C1D1。结合生产实际，综合考虑，3个评价指标确定。该复方的最佳提取工艺为A1B1C2D3，即是用8倍量70%乙醇回流提取3次，第1次1h，第2次1h，第3次30min。　　2.5验证最佳提取工艺按确定的最佳提取工艺：用8倍量70%乙醇回流提取3次，第1次1h，第2次1h，第3次30min。重复提取3批，测的苦参碱含量分别为：1.46%，