pparδ基因+294t-c多态性与代谢综合征的关系探讨论文

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1、PPARδ基因+294T/C多态性与代谢综合征的关系探讨论文.freelpactofperoxisomeproliferator-activatedreceptorδgene(PPARδ)singlenucleotidepolymorphism(SNP)onmetabolicsyndrome(MS)inChinese.MethodsThegenotypesofPPARδ+294T/CinedbyTouch-doetabolicsyndromeand118patientsetabolicsyndrome.Phenotypemeasuredassindex

2、(BMI);aglucoselevel，seruminsulinlevelofbloodobtainedbothat0，30，60and120minuteduringoral75gglucosetolerancetest(OGTT);serumlipidlevelincludingtotalcholesterol，triglyceride，high-densityandloetabolicsyndromeinChinese.Keyeproliferator-activatedreceptorδ；Polymorphism，singlenucleotide

3、;Metabolicsyndrome代谢综合征(MS)是多种代谢危险因素在个体内聚集的状态，其主要组分包括肥胖、糖尿病或糖调节受损、血脂紊乱及高血压。PPARα、PPARγ分别是高脂血症和胰岛素抵抗的治疗靶点，该两种受体的激动剂已应用于临床。PPARδ编码基因位于6p21.1～21.2［1］，PPARδ可被长链脂肪酸及其衍生物、前列腺素、过氧化物酶增殖物激动剂GI的关系［9-13］，得出的结论有矛盾之处。本文目的是探讨PPARδ+294T/C与中国MS患者血脂、肥胖、胰岛素敏感性及胰岛β细胞分泌功能的关系。1资料与方法1.1研究对象1.1.1来自南京大

4、学医学院附属鼓楼医院门诊及病区MS患者118例(男79，女39)，年龄（54.47±12.11)岁，体重指数(BMI)（26.97±2.25）kg/m2。非MS患者228例(男125，女103)，年龄(51.46±11.91)岁，体重指数(BMI)（23.37±2.99）kg/m2。以上两组所选研究对象间无亲缘关系，所有入选者均未服降糖、降脂、降压药物，并且无服用影响糖及脂代谢药物史，非妊娠，无垂体、甲状腺、肾上腺和其他慢性炎症性疾病等影响糖代谢的疾病。所有受试者均在知情同意下接受检查并留取全血标本。1.1.2MS的诊断按照中华医学会糖尿病分会(CDS

5、)建议［14］。各组分诊断标准分别为：(1)肥胖：BMI≥25.0(kg/m2)；(2)高血糖:FPG≥6.1mmol/L及(或)2h血糖(2hPG)≥7.8mmol/L；(3)高血压：收缩压/舒张压≥140/90mmHg；(4)血脂紊乱：空腹血TG≥1.7mmol/L，及(或)空腹血HDL-C0.9mmol/L(男)或1.0mmol/L(女)。同时满足3条及以上的患者诊断为MS。1.2研究方法1.2.1对受试者进行身高、体重、腰围、臀围、收缩压及舒张压测量，并计算BMI、腰臀比（A-IR=FPG×FINS/22.5，胰岛素敏感性指数QUICKI=1/

6、(lgFPG+lgFINS)，李光伟胰岛素作用指数IAI=1/(FPG×FINS)评价胰岛素敏感性；应用HOMA-β=20×FINS/(FPG-3.5)评价胰岛β细胞分泌功能。1.2.2PPARδ+294T/C多态位点的检测：枸橼酸钠抗凝全血4ml，常规酚和氯仿法抽提外周血基因组DNA。在DNA热循环仪(AppliedBiosystems2720)上扩增。上游引物(P1):5′-CACAAACCCACTACAAGAGC-3′;下游引物(P2):5′-TCTGGCATCGTCTGGGTC-3′(上海生工生物工程技术服务有限公司合成)。25μlPCR反应体

7、系:DNA模板1μl，Taq酶0.2μl，dNTP2μl，Mg2+2μl，上下游引物各1μl。Touch-doin，94℃变性30s，前16个循环退火温度62～54℃，每次循环递减0.5℃，反应30s，72℃延伸30s；后38个循环均为94℃变性30s，54℃退火30s，72℃延伸30s，72℃终末延伸10min，4℃保存。PCR产物为274bp片断，经2%琼脂糖凝胶电泳确认后，15μl酶切反应体系:PCR产物10μl，内切酶Bsl1(NEB)1μl，10×NEB31.5μl，灭菌双蒸水补齐，继在55℃酶解8h。酶切产物采用2.5%的琼脂糖凝胶电泳分型

8、(DNAMarker:DL2000)。酶切结果:CC纯合型:238bp/36bp;TC杂合型: