痛泻二草方对肝郁脾虚型uc模型大鼠肠黏膜屏障损伤的影响

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1、痛泻二草方对肝郁脾虚型UC模型大鼠肠黏膜屏障损伤的影响【摘要】目的探讨痛泻二草方对肝郁脾虚型溃疡性结肠炎（UC）模型大鼠肠黏膜屏障损伤的影响。方法采用综合法成功建立肝郁脾虚型UC大鼠模型并给药治疗后，对比各组大鼠肠黏膜病理、充血积分、组织损伤评分及肠黏膜一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）检测结果。结果痛泻二草方可显著降低UC模型大鼠肠黏膜充血积分、组织损伤评分及NO、NOS的含量（P<0.05或P<0.01），病理切片结果表明痛泻二草方可减轻结肠黏膜损伤。结论痛泻二草方具有减轻UC模型大鼠炎性反应、减缓充血水肿和肠黏

2、膜损害而促进溃疡愈合的作用。【关键词】痛泻二草方溃疡性结肠炎充血积分组织损伤评分NONOS溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis，UC）临床上以腹痛、腹泻和黏液脓血便、里急后重等为主要表现，以肠黏膜物理屏障、生物屏障和化学屏障损伤为病理基础，类似中医学所论“腹痛必泻，泻后痛减，痛泻交作”之症。中医学认为UC病位在肠，但其发病与肝脾密切相关，其病机重点之一为“肝郁脾虚”，故治疗多从调和肝脾入手。痛泻二草方在临床用来治疗肝郁脾虚型UC疗效显著，故本研究选用大鼠作为研究对象，探讨其对肝郁脾虚型UC模型大鼠肠黏膜屏障损伤的影响。1实

3、验材料1.1实验动物采用SPF级in，煎煮滤过，95℃水浴浓缩（痛泻二草方每毫升含生药1.1g；痛泻要方每毫升含生药0.5g）。药物制成后高压灭菌消毒分装，4℃冰箱保存备用。一氧化氮（NO）测试盒，批号20051122；一氧化氮合酶（NOS）测试盒，批号20051201；考马斯亮兰蛋白测定试剂盒，批号20051218,以上均为南京建成医学生物研究所提供。福氏完全佐剂，批号20050923（北京拜尔迪生物技术有限公司）。DF110型电子分析天平、721型可见分光光度计、XYJ80-2离心机、HH-4数显恒温水浴箱。2实验方法2.1动物分

4、组、造模及给药实验大鼠（筛选排除质量偏小、生命活力低下的大鼠10只）按质量编号，按照随机数字表法分为空白组、模型组、痛泻二草方组、痛泻要方组及补脾益肠丸组5组，每组10只。参考3.4各组大鼠肠黏膜病理结果见图1。空白组（A）：结肠黏膜完整，偶见嗜中性粒细胞浸润，腺体排列规则，结构清楚，黏膜下肌层血管未见充血。模型组（B）：结肠黏膜萎缩变薄，腺体细胞增生，层次增多排列紊乱，黏膜下肌层紊乱，血管轻度扩张。痛泻二草方组（C）：结肠黏膜基本完好，无炎细胞浸润及溃疡，黏膜上皮完整、连续，腺体排列规则、结构清楚，黏膜下肌层无异常。痛泻要方组（D）

5、：结肠黏膜萎缩变薄，间质炎细胞浸润，浅小溃疡及灶性糜烂偶见，杯状细胞减少，腺体增生紊乱，黏膜下肌层紊乱。补脾益肠丸组（E）：结肠黏膜萎缩变薄，间质炎细胞浸润，浅小灶性糜烂偶见，杯状细胞减少，腺体增生紊乱，黏膜下肌层基本正常。4讨论中医认为肝郁脾虚型UC机理以脾胃虚弱为主要因素，且与七情内伤、六淫邪气、先天禀赋等有关，多由精神紧张、忧郁恼怒等情志不遂导致肝气郁结之后，肝气横逆脾胃，脾胃运化失职，大肠传导失节，水谷并下而致泄泻；日久则水湿下注大肠，清浊不分，湿浊蕴结，气血凝滞，肠络失和，血败肉腐，而成本病。如《内经》曰：“厥阴之胜，肠鸣夕

6、食泄，少腹痛。”而《景岳全书·泄泻》更明确记载：“凡遇怒气便作泄泻者……此肝脾二脏之病也，盖以肝木克土，脾气受伤而然。”故中医学认为肝郁脾虚是UC的病机重点之一。A.空白组B.模型组C.痛泻二草方组D.痛泻要方组E.补脾益肠丸组图1各组大鼠肠黏膜病理(HE染色，×200)研究表明[3]，精神抑郁、情绪紧张可改变肠道的消化间期动力（类似中医学“木旺乘土”），而消化道功能性疾病的临床表现可能是焦虑和抑郁情绪的躯体化表现，这些躯体化症状又可加重患者的不良精神状态（类似中医学“土虚木乘”），二者相互影响，互为因果。据统计[4]，胃肠动力障碍的

7、患者多有焦虑、抑郁等心理变异表现。而情志异常反应作用于神经中枢—丘脑下部—脑干—植物神经系统—效应器这一途径，引起人体一系列神经—内分泌改变，如儿茶酚胺、促肾上腺皮质激素和糖盐皮质激素等分泌异常，从而产生结肠运动亢进，肠血管和平滑肌痉挛，组织细胞缺血，抵抗力下降，毛细血管通透性增加，导致肠黏膜炎症、糜烂、溃疡出血。同时研究亦表明[5]，脾虚患者不但有消化系统机能减退、胃肠动力异常，而且还存在胃肠道黏膜保护性屏障作用减退、胃肠道激素水平紊乱、肠神经系统功能紊乱等。UC患者存在着结肠物理屏障功能障碍，组织病理学表现为上皮细胞紧密连接、黏液

8、、肠蠕动异常，临床以腹泻、黏液脓血便、腹痛、里急后重等为典型症状，病变主要限于结肠黏膜，表现为灶性炎症、充血水肿或溃疡，并可向远端扩展或遍及整个结肠。目前研究UC的动物实验模型建立有多种，研究已证实免疫法导致的大鼠结肠损