土传病害生防菌哈茨木霉fjat-9040 的绿色荧光蛋白基因转化及其在土壤中的存活能力示踪

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1、11土传病害生防菌哈茨木霉FJAT-9040的绿色荧光蛋白基因转化及其在土壤中的存活能力示踪收稿日期:作者简介:肖荣凤(1977-),女,硕士,助理研究员,从事植物病理学研究。通讯作者:刘波(1957-),男,研究员,从事农业微生物技术与农业生物药物研究(E-mail:liubofaas@163.com)。基金项目:公益性行业(农业)科研专项(200903049),福建省属公益项目(2010R1020-6),福建省杰出青年科学基金,2009J06010 肖荣凤,刘波*,史怀,张衡宇,朱育菁(福建省农业科学院农业生物资源研究所,福建福州350003)摘要:利用PEG-CaCl2介导的原生

2、质体转化体系,将绿色荧光蛋白基因转入至哈茨木霉(Trichodermaharzianum)菌株FJAT-9040中。从所获得的转化子中选择了1株荧光强且性状稳定的菌株FJAT-9295跟踪分析了该菌株在不同生境类型土壤中存活能力,同时比较了其在有植株及无植株土壤中的存活能力差异。研究结果表明:就处理不同时间而言,菌株FJAT-9295在不同类型的土壤中随着时间的延长,菌落数逐渐下降;前8天处于一个波动状态,16-64天时土壤中菌落数基本趋于稳定,下降了约1个数量级,仍能维持在105CFU/g。就不同土壤类型而言,育苗土最适宜该菌株的存活,其次为沙土及菜园土,而山坡黄土最不利于该菌株的存

3、活与定殖。在处理的前8天,菌株FJAT-9295在种植植株的各类型土壤中菌落数均显著高于未种植株的各类型土壤,但16-64天期间,两者的菌落数差异不明显。关键词:哈茨木霉,绿色荧光蛋白基因,土壤类型,存活能力Transformationofbiocontrolagent,TrichodermaharzianumstrainFJAT-9040,withthegreenfluorescentproteingene(gfp)andit’ssurvivabilityinthedifferenttypesoilsXIAORong-feng,LIUBo*,SHIHuai,ZHANGHeng-yu,

4、ZHUYu-jing,(InstituteofAgrobiologicalResources,FujianAcademyofAgriculturalSciences,Fuzhou350003,China)Abstract:TrichodermaharzianumstrainFJAT-9040hadbeentransformedwithgenecodingfor11greenfluorescentprotein(GFP)byusingprotoplast-mediatedgenetictransformationsystem.Atransformant,FJAT-9295,withstr

5、ongfluorescentexpressionwaschosentovisualizethesurvivabilityinthedifferenttypesoils.Simultaneity,thesurvivabilityofstainFJAT-9295wascomparedbetweenthesoilwithplantsandwithoutplants.Theresultsshowedthecolonypopulationsdecreasedgraduallyduring64daysinthedifferenttypesoils,andthepopulationskeptfluc

6、tuatingupanddown8daysafterinoculation.However,theykeptstabilizationfrom16dto64dandwereabove105CFU/ginthesoils.Forthedifferenttypesoils,thebestsurvivabilityforthestrainwasinthesoilwithplantingseedling,inturn,soilinfiled,sandandyellowsoilfromhill.Then,thesurvivabilityofthestraininthesoilwithhostpl

7、antsshowedthatthecolonypopulationwashigherthanthatwithoutplants8dayspostinoculation,butithadnodistinctnessdifferentfrom16to64days.Keywords:Trichodermaharzianum,GreenFluorescentProteingene,soiltypes,survivability木霉(Trichoderm

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