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时间:2018-11-25
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1、淡竹叶清热作用药效植物基础研究论文刘明,吴启南,宋秋烨,邬云霞【摘要】目的研究淡竹叶清热作用有效部位及化学成分,为淡竹叶的进一步开发利用和质量标准的制定提供科学依据。方法采用体外抑菌实验筛选淡竹叶有效抑菌部位,并采用HPLC-MS法分析抑菌部位的化学成分。结果淡竹叶甲醇提取部位具有抑菌作用,根据液质联用图谱及文献,分析鉴定出淡竹叶甲醇提取部位中6个化学成分.freelentandestablishmentofqualityspecificationofHerbLophatheri.MethodsScreeneffectiveantiblasticpartbybacteriostasi
2、sexperimentinvitro,andanalyzethechemicalpositionsaricacid,vitexin,Tricin7-β-D-glucosyloxy-flavone,arundoin,andTricin.ConclusionThepartextracted,thispartmaybecorrelatedentandimprovementofqualityspecificationofherbLophatheri.Keyedicines;Herblophatheri;Bacteriostasisexperiment;HPLC/MS/MS淡竹叶为禾本科植物淡
3、竹叶LophatherumgracileBrongn.的干燥茎叶[1]。始载于《本草纲目》,1977年以来的历版《中国药典》均有收载,具有清热除烦、利尿的功效。用于热病烦渴,小便赤涩、淋痛,口舌生疮。淡竹叶为卫生部公布的药食两用中药之一,近年来多有制成保健凉茶[2]、淡竹叶酸奶[3]等。淡竹叶的有效成分物质基础研究一直较为薄弱,现有化学成分的研究显示淡竹叶主含黄酮、三萜类、多糖、酚性成分、氨基酸、有机酸及多种微量元素等[4~6]。依据现代医学理论,结合淡竹叶的中医临床功效,本实验对淡竹叶不同溶剂的提取部位进行了抑菌活性的研究,对淡竹叶清热有效物质基础进行初步筛选,并运用液质联用分析手
4、段对所筛选的部位进行化学成分分析,为淡竹叶的进一步开发利用和质量标准的制定提供科学依据。1仪器与材料1.1仪器手提式压力蒸气灭菌器(上海华线医用核子仪器有限公司);移液枪(北京金花移液器厂);HPLC-MS/MS液质联用仪(CC(B)44103;金葡菌CMCC(B)26003;乙链菌CMCC(B)32210;绿脓菌CMCC(B)24430。1.3药物营养琼脂(国药集团化学试剂有限公司,批号F20040304);肉汤培养基(国药集团化学试剂有限公司,批号20060310);血琼脂基础(国药集团化学试剂有限公司,批号20060228);葡萄糖肉汤(国药集团化学试剂有限公司,批号10010
5、518);香草酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号110776-200402)。牡荆苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号11876-200501)。淡竹叶采于江苏省宝华山,经南京中医药大学鉴定教研室吴启南教授鉴定为禾本科(Gramineae)植物淡竹叶LophatherumgracileBrongn.的干燥茎叶。2方法与结果2.1不同提取部位抑菌实验2.1.1提取部位制备淡竹叶置于多功能提取罐,60%乙醇回流提取5h,提取液减压回收溶剂得到淡竹叶总浸膏,总浸膏与硅藻土拌匀,分别加入石油醚、二氯甲烷、甲醇、水逐级超声提取,减压回收溶剂,得石油醚提取部位、二氯甲烷提取部位、甲醇提取部
6、位和水提取部位,作为供试品。2.1.2不同提取部位抑菌实验取上述供试品各1g,加入蒸馏水1ml,超声溶解。在超净工作台上将灭菌后的培养基倒入无菌培养皿中,待冷却凝固后,用无菌移液管吸取1∶1000稀释的大肠、金葡、绿脓菌液加到平皿上,用刮铲将菌液涂匀,再用打孔器在培养基上打孔,打孔后每个孔内注入25μl药液,37℃培养24h,观察实验结果。结果见表1。表1淡竹叶不同提取部位抑菌实验结果(略)从药敏实验中发现,淡竹叶的石油醚、二氯甲烷及水提取部位对该3种细菌抑菌效果为阴性,甲醇提取部位对该3种细菌抑菌效果为阳性,故对甲醇提取部位的抑菌效果做进一步的实验。2.2甲醇提取部位抑菌实验2.2
7、.1对金葡菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的抑菌实验将甲醇提取部位的浸膏配成相当于生药浓度为40,20,10,5,2.5,1.25,0.625g·ml-1。同“2.1”项下方法实验,制作培养基,将菌液涂匀于培养基上,打孔,分别注入20μl的药液,37℃培养,24h后观察抑菌结果。结果见表2。表2不同浓度甲醇提取部位对3菌种抑菌圈直径平均值(略)从表2中我们可以看出淡竹叶甲醇提取部位对金葡菌、绿脓杆菌和大肠杆菌均有一定的抑菌效果,抑菌效果依次为:绿脓杆菌金葡菌大肠杆菌
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