参麦注射液对急性缺血再灌注大鼠心肌细胞抗氧化能力的研究论文

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时间:2018-11-24

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1、参麦注射液对急性缺血再灌注大鼠心肌细胞抗氧化能力的研究论文.freelyocytesafteracuteischemia-reperfusioninrats【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofShenmainjectiononantioxidativeabilityofcardiomyocytesafteracuteischemia-reperfusioninrats.MethodsTheischemia-reperfusionheartmodelyocardiumandCKa

2、ctivityofserumined.ResultsTheactivitieofcNOS,GSH-Px,SODagroupasparedia-reperfusiongroup(P0.01).CK,iNOSactivityandMDAcontentagroup.ConclusionTheresultssuggestedthattheprotectedeffectsofShenmainjectiononthemyocardialischemia-reperfusioninjurymaybereiatedtoitsactlo

3、nofscavergingtheoxygenfreeradicals,protectingtheantioxygenfreeradicalenzymesandinhibitingthelipidperoxidationinthemyocaydium.【Keyainjection;ischemia-reperfusion;NOS;GSH-Px;SOD;MAD;CK冠状动脉缺血引起缺血性心脏病是心血管系统疾病的主要死亡原因,临床治疗主要是解除冠脉痉挛,恢复血流供应,这又使心脏经历一个缺血后恢复灌流的过程,有可能引起细胞死亡

4、或进一步功能障碍。设法解除或减轻再灌注损伤成为此类心脏病防治研究的重点。临床研究已证实[1]参麦注射液(Shenmainjection,SM)能减轻急性心肌梗死患者溶栓后再灌注损伤,本实验通过结扎/松解左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注模型,以心肌组织cNOS、iNOS、GSH-Px、SOD、MAD及血清CK的水平变化反映心肌受损程度,并用SM干预,探讨SM抗心肌细胞脂质过氧化的作用机制,以此为中医药防治缺血再灌注损伤的应用,加强心肌保护提供理论依据。1材料与方法1.1材料和动物分组1.1.1实验仪器和试剂ECG-65

5、11型心电图仪(上海医疗器械厂);TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);数显恒温水浴锅(金坛市富华仪器有限公司);结构型、诱导型一氧化氮合酶(cNOS,iNOS)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)双缩脲法蛋白定量试剂盒(南京建成生物工程研究所),肌酸激酶(CK)试剂盒(北京化工二厂);参麦注射液(SM杭州正大青春宝药业有限公司)。1.1.2实验动物及分组采用健康成年I)组、缺血再灌注(MI/R)组、参麦(SM)组,每组6只。1.

6、2动物模型的制作20%乌拉坦腹腔注射麻醉(7ml/kg),用针形电极插入四肢皮下,观察记录标准肢体Ⅱ导联心电图。气管切开,呼吸机人工呼吸,呼吸频率80次/min,开胸暴露心脏,于左心耳下缘约1mm处用6号医用缝针和0号医用缝线穿过心肌浅层作一结扎线,稳定10min左右行实验处理。各组手术步骤:Sham组:穿线不结扎,旷置25h;MI组:在穿线间置宽3mm橡皮条,双活结结扎左冠状动脉前降支,以心电图S-T段明显上抬,结扎线以下心肌颜色变暗为心肌缺血标志,缺血30min;MI/R组:如缺血30min方法处理,缺血30mi

7、n后松开结扎线,恢复再灌注120min;SM组:在结扎左冠状动脉前降支前3天,每日腹腔注射2ml(含参麦0.4g)参麦注射液,而后处理同缺血再灌注组。以上各组动物实验完毕,摘除眼球采血备检,同时摘取心脏。1.3标本采集及检测方法1.3.1CK的检测上述各组动物摘除眼球采血1ml后立即置入加有20μ1EDTANa2和10μl抑肽酶的预冷离心管内充分混匀、4℃下3500r/min,离心5min,吸取管内上清液密封后于-20℃低温冰箱保存待测。1.3.2cNOS、iNOS、GSH-Px、SOD、MDA的检测实验完毕,摘除部分

8、结扎线以下左心室心肌,置于冰冷的生理盐水冲洗,除去血液,滤纸试干,分析天平称取0.2g心肌组织,放入5ml小烧杯内,用刻度吸管加入组织块重量9倍的生理盐水,制备成10%的组织匀浆,倒入离心管中,3000r/min离心15min,取上清液-20℃低温冰箱保存待测。按照试剂盒说明测定心肌组织NOS、SOD、GSH-Px的活性及MDA含

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