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1、心房钠尿肽对急性肺损伤的治疗作用及其可能机制论文闫志强,李志超,李志斌,宋景春,魏敏【关键词】心钠素【Abstract】AIM:Tostudytheprotectiveeffectofatrialnatriureticpeptide(ANP)onalveolartypeⅡcells(ATⅡ)fromlipopolysaccharide(LPS)inducedacutelunginjury(ALI).METHODS:Eighteenratsaleicdialdehyde(MDA)contentoft
2、heBALFeasured.Theactivityoflactatedehydrogenase(LDH)andalkalinephosphatase(AKP)inBALFN/m］decreasedinLPSgroup(P0.05),butnodifferenceN/m］andcontrolgroup.ANPpreventedtheincreaseoftheAKPactivity［ControlGroup(0.10±0.08)μkat/L,.freelinjurybyLPSinALI.Oneofth
3、emostimportantmechanismsispossiblythatANPcanprotecttheATⅡandfacilitatethesecretionofPS.【Keyonarysurfactants;respiratorydistresssyndrome,adult【摘要】目的：研究心房钠尿肽(ANP)对急性肺损伤时肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)的保护作用及其机制.方法：SD大鼠18只随机等分为生理盐水对照组、脂多糖(LPS)模型组、ANP治疗组.通过颈外静脉给药，给药4h后处死动物，
4、收集肺泡灌洗液(BALF)，测定BALF表面张力、总磷脂含量(TPL)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)、丙二醛(MDA)及总蛋白(TP)含量.结果：与对照组比较，LPS可使BALF中LDH活性［(4.8±1.9),（8.4±1.9）μkat/L］及TP含量升高(P0.05)，ANP［(5.1±1.7)μkat/L］可逆转此现象；LPS可使BALF中TPL［(0.43±0.04)vs(0.34±0.06)μg/kg］明显降低(P0.05)、表面张力［(19.8±2.6)vs(23.3±2
5、.9)mN/m］升高(P0.05)，ANP治疗后TPL［(0.41±0.06)μg/kg］升高、表面张力［(18.6±2.9)mN/m］降低；与对照组比较，LPS组AKP活性［(0.10±0.08)vs(0.36±0.10)μkat/L］升高(P0.05).freela公司；碱性磷酸酶(AKP)，乳酸脱氢酶(LDH)，丙二醛(MDA)试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品；磷标准溶液由第四军医大学预防系营养与食品卫生学教研室高双斌高级实验师惠赠；725C型紫外可见分光光度计(上海).1.2方法1.2
6、.1实验分组及模型建立将动物随机等分为3组：①对照组(n=6)，经颈外静脉导管注射等容积生理盐水;②LPS组(n=6)，经颈外静脉导管注射LPS2mg/kg复制ALI动物模型，注射LPS后再立即注射等容积的生理盐水；③ANP组(n=6)，经颈外静脉导管注射LPS2mg/kg后立即注射ANP2μg/kg.1.2.2手术及标本采集大鼠腹腔注射200g/L乌拉坦5mL/kg,麻醉后固定于鼠板;沿颈部正中切开皮肤,分离一侧颈外静脉,插入导管给药，给药后4h颈椎脱臼处死，行气管插管术，以20mL/kg的生理
7、盐水进行支气管肺泡灌洗，连续3次，取第１次灌洗所得肺泡灌洗液(BALF)0.2mL用于表面张力的测量，收集所有BALF并记录BALF回收量，1000r/min离心10min，取上清，留1.4mL于-20℃保存，用于测AKP,MDA,LDH和总蛋白(TP)等，剩余上清用于磷脂提取.1.2.3表面张力的测定毛细管法测定肺泡BALF表面张力,即将毛细玻璃管垂直插入到BALF中,测量毛细管内外液面高度差,根据拉普拉斯方程σ=rρg(ｈ+ｒ/3)/2计算出BALF的表面张力,以此来反映PS的活性.其中,σ为
8、表面张力(单位为Ｎ/ｃｍ),ｒ为毛细管半径,ρ为液体密度,ｇ为重力加速度,ｈ为内外液面高度差.1.2.4总磷脂(TPL)的测定采用Bartlett法［2］略有改进.BALF中加入２倍体积的氯仿甲醇（2∶1，V/V）萃取液，震荡1min，2500r/min离心10min，弃上层液体但不弃界面杂质.加入1/4体积的甲醇水（1∶1，V/V）萃取液，震荡1min，2500r/mim离心10min.弃去上层液及界面杂质，氮气吹干，即得到磷脂，-20℃保存待测.将磷脂加入1mL高氯酸加热，温度
