不同溶剂海芋提取物的体外抗肿瘤活性研究论文

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1、不同溶剂海芋提取物的体外抗肿瘤活性研究论文【摘要】目的研究海芋不同溶剂提取物的抗肿瘤作用。方法体外抗肿瘤活性研究采用MTT比色法，靶细胞采用人肺癌细胞株A549、黑色素瘤细胞株B16、人胃腺癌细胞株BGC-823、神经肿瘤细胞株NG108-15。结果海芋醋酸乙酯提取物对A549，B16，BGC-823的IC50分别为94.6，541.9，629.5μg·ml-1,丙酮提取物对A549，B16的IC50分别为40.9，438.0μg·ml-1.freelAlocasiamacrorrhizainv

2、itro.MethodsMTTmethodorcellstreatedAlocasiamacrorrhizainvitro,tumorcellA549,B16,BGC-823,NG108-15AlocasiamacrorrhizatoA549,B16,BGC-823l-1respectively，andthoseoftheacetoneextractfromAlocasiamacrorrhizatoA549andB1640.9,438.0μg·ml-1respectively.ButthereA

3、locasiamacrorrhizatoallkindsofcelllines.Theobviousacutetoxicitiesacrorrhizaunderthetreatmentdosesof60g·kg-1and36.5g·kg-1respectively.ConclusionThereisgoodcytotoxicityoftheethylacetateandacetoneextractsfromAlocasiamacrorrhizatotumorcells,.freelorprosp

4、ects.Keyacrorrhiza;Extract;Anticancer;Activity海芋，别名广东狼毒、野芋、独脚莲、老虎芋等，为天南星科植物海芋Alocasiamacrorrhiza(L.)Schott的干燥根茎，首载于《本草拾遗》，原称天荷。《本草纲目》始称为海芋，是岭南地区常用民间草药。《本草纲目》记载其主治“疟瘴毒肿风癞”，“可以治疠”［1］。《分类草药性》载其能“治一切恶疮肿毒”。《广西中药志》总结近代临床经验，载其可治“肺结核、痧症、热病等”［2］。本品有清热解毒、消肿散结之

5、功。现代临床用于高热、流感、风湿痛、疮疡肿毒、蛇虫咬伤等病症。近年来，民间也用海芋治疗恶性肿瘤。经上海中医药大学的可燕等［3］调查了解，目前上海市及其邻近地区各中药店、中医院出售的作“蛇六谷”使用的中药原植物均为海芋的根茎。蛇六谷广泛用来治疗各种肿瘤，如上海群力草药店用其治疗胃癌、胃腺癌、鼻咽癌、乳腺癌等，名中医陆德铭教授用其治疗乳腺癌［4］。所有这些资料表明，海芋中有对肿瘤有较好活性的化合物，所以本文对海芋的多种溶剂提取物进行了体外细胞毒活性测定，寻找有效的活性部位，并测定了活性较好的部位的急

6、性毒性，为将该提取物开发为有效的抗肿瘤药物奠定了基础，同时为寻找海芋中的活性单体化合物指明了方向。1材料海芋采自云南省勐腊县勐仑镇，经中国科学院西双版纳热带植物园任盘宇老师鉴定为Alocasiamacrorrhiza(L.)Schott。作为药材用其根部。人肺癌细胞株A549、黑色素瘤细胞株B16、人胃腺癌细胞株BGC-823、神经肿瘤细胞株NG108-15均购自中科院上海细胞库。植物提取、分离过程中用到的溶剂均为分析纯，为天津元立公司产品；MTT(四氮唑)为Sigma公司产品；FBS(胚胎牛血

7、清)为美国Hyclone公司产品；RPMI1640和DMEM培养基为美国Gibco公司产品；Trypsin(胰蛋白酶)为上海林叶生物科技有限公司产品。2方法2．1海芋不同溶剂提取物的制备称取干燥的海芋根部1500g，将其在粉碎机上粉碎，然后从中取1200g，以每份200g等分为6份，分别用环己烷、石油醚、醋酸乙酯、丙酮、乙醇、水为溶剂进行提取，每种溶剂提取方法如下：用800ml溶剂和药材混匀，然后将其放在恒温震荡水浴锅上进行提取，温度控制在50℃，同样的溶剂用量提取两次，12h/次，合并提取液，

8、然后不高于50℃用旋转蒸发仪将其蒸干，得各种溶剂的海芋提取物，然后在真空干燥箱中继续烘干至恒重。2．2MTT法测定细胞培养条件为：37℃，5%CO2，含10%小牛血清的RPMI1640培养基。用胰蛋白酶消化癌细胞，以配制细胞悬液,浓度为1×107cell·L-1，于96孔培养板内每孔接种100μl(每孔含1000个细胞)。用培养基配制样品，设4个浓度：0.1，1，10，100μg·ml-1，每组设3个平行孔，每孔加样0.1ml。置孵育箱中培养96h后弃去培养液，每孔加入0.5%MTT溶液0.1m