黄芩提取物抗炎镇痛耐缺氧及抗疲劳作用的研究

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1、黄芩提取物抗炎镇痛耐缺氧及抗疲劳作用的研究作者：熊娟欧阳昌汉黄胜堂【摘要】目的探讨黄芩苷对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉局灶性脑栓塞模型，缺血2h，再灌注24h。评价神经功能状态，测定脑梗塞体积和丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性以及血脑屏障通透性。称重法测定组织脑水肿含量。结果黄芩苷能显著降低缺血再灌注后脑梗塞体积，改善神经功能状态，降低脑组织MDA、NO含量、血脑屏障通透性和脑水肿程度，升高SOD活性并降低MPO活性，与模型组比较，具有显著性差异（P<0.05或P<0.01）。

2、结论黄芩苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，其机理与其清除氧自由基、抗炎和减轻脑水肿有关。【关键词】黄芩苷脑缺血再灌注损伤脑水肿　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectofbaicalinoncerebralinjuryinducedbytransientfocalischemiaanditsmechanisms.MethodsTransientfocalcerebralischemiainjurymodelinratsiddlecerebralarteryfor2h,folloeandneurologicaldefi

3、citdeterminedbythemethodsofTTCstainingandtheLonga'sscorealondialdehyde(MDA),nitricoxide(NO),activitiesofsuperoxidedismutase(SOD)andmyeloperoxidase(MPO)andblood-brainbarrier(BBB)permeabilityinbraineasuredbyspectrophotometer.Thecontentofbrainethod.ResultsPretreatmentarkedlyreducedbraininfarctionvolu

4、meandneurologicaldeficitinducedbytransientischemicinsult,inhibitedMPOactivity,decreasedNO,MDAandbraineability,increasedSODactivity.ConclusionBaicalinmightplayaprotectiveeffectoncerebralischemiareperfusioninjurythroughinhibitinginflammatoryprocess,peroxidationanddecreasingbrainia;Reperfusioninjury;

5、Braing/kg)腹腔注射麻醉大鼠，分离、结扎并切断右侧颈外动脉，由颈外动脉残端沿颈总和颈内动脉缓慢插入头端膨大的尼龙栓线约18mm，阻塞大脑中动脉入口造成缺血。缺血2h后拔除栓线进行24h再灌注；假手术组栓线只插入10mm，其余步骤同模型组。动物苏醒后出现手术侧Homer征和对侧体运动障碍即为模型制备成功。　　1.3.2动物分组与给药实验动物随机分为4组，即假手术组、模型组和药物组（60,120mg/kg）。实验动物于缺血前30min和再灌注后12h两次腹腔注射受试药物，假手术组和模型组分别注射等容积的生理盐水。　　1.3.3神经缺陷评分和脑梗塞体积测定按照Longa5分制评分标准于再

6、灌注后24h进行行为学评分［4］。脑梗塞体积的测定采用红四氮唑(TTC)染色法。大鼠于再灌注24h后断头取脑速冻15min，行2mm厚的冠状切片，置于2%TTC溶液中37℃孵育30min。正常脑组织着深红色，梗塞脑组织不着色。10%甲醛固定24h后数码相机拍照，应用图像分析系统测量脑梗塞面积并计算脑梗塞体积。水肿对梗塞体积的影响采用Sin离心10min，弃沉淀，取上清液以10000r/min离心15min，沉淀物为线粒体组分，加0.5ml生理盐水制备线粒体组分悬液，－80℃保存待测。SOD，MPO，NO测定按照试剂盒说明书进行；MDA测定采用硫代巴比妥酸法；蛋白质测定采用考马斯亮蓝法。　　

7、1.3.5脑组织含水量的测定脑含水量用干湿重法测定。大鼠断头取脑后，左右半球分开，分别称湿重后，置于110℃烤箱内24h，迅速测干重。脑含水量=(湿重－干重)/湿重×100%。　　1.3.6血脑屏障通透性测定大鼠处死前经股静脉注射2%伊文思蓝（Evansblue,EB），20min后迅速断头取脑，左右大脑半球分开，去除皮质表面的蛛网膜、血凝块及脑室脉络丛，置于已知体积甲酰胺中，测定脑体积。继续加甲酰胺至脑体积的5倍，置3