鲍曼不动杆菌氨基糖苷类修饰酶和i类整合酶基因研究论文

《鲍曼不动杆菌氨基糖苷类修饰酶和i类整合酶基因研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、鲍曼不动杆菌氨基糖苷类修饰酶和I类整合酶基因研究论文陈琳蔡挺张顺许小敏【摘要】目的了解我院鲍曼不动杆菌(Aciobacterbaumannii，AB)氨基糖苷类修饰酶和I类整合酶基因存在情况。方法根据美国CLSI/NCCLS2004年版要求进行抗菌药物敏感性试验，应用PCR技术对AB菌进行氨基糖苷类修饰酶和I类整合酶基因检测。结果AB菌对13种抗菌药物耐药严重。27株AB菌中氨基糖苷类修饰酶基因aac(3)I阳性23株(85.2%)、aac(6′)I阳性18株(66.7%)、ant(3")I阳性22株(81.5%)。氨基糖苷类修

2、饰酶基因总检出率为85.2%。I类整合酶基因(intI1)阳性23株(85.2%)。结论我院AB菌不仅具有多重耐药性，而且氨基糖苷类修饰酶基因、I类整合酶基因携带率高。【关键词】鲍曼不动杆菌；多重耐药；氨基糖苷类修饰酶；I类整合酶基因ABSTRACTObjectiveTostudytheaminoglycosidesmodifyingenzymegenesandintIgeneinAciobacterbaumanniiinNingboNo.2Hospital.MethodsThesusceptibilityof13antibacter

3、ialsinoglycosidesmodifyingenzymegenesandintI1geneultidrugresistanceofA.baumannii.In27strainsofA.baumannii,thepositivestrainsofaac(3)IinoglycosidesmodifyingenzymegeneultidrugresistancebutalsohighpercentageofaminoglycosidesmodifyingenzymegeneandintI1geneinA.baumannii

4、isolatedfromthehospital.KEYultidrugresistance;Aminoglycosidesmodifyingenzyme;intI1不动杆菌属细菌广泛分布于自然界，也可从人的各种体液、皮肤和粘膜中分离到。由于该属细菌在环境中的存活时间长，因此易于在患者之间播散并引起医院内感染。鲍曼不动杆菌(A.baumannii，AB)是医院感染的常见菌种之一。氨基糖苷类药物与β内酰胺类药物联合用药曾是治疗AB菌感染的有效药物，但近年来这二类药物耐药性逐步升高。在革兰阴性菌耐药机制中.freell离心管内(内预置

5、200ng/ml蛋白酶K溶液200μl)，56℃水浴2h，改95℃水浴10min，加入Chelex10040μl，离心(15000r/min)30s。上清液即为基因检测的模板液，-20℃冰箱保存备用。1.4基因检测基因检测均采用PCR法。各种靶基因引物序列和目的产物长度见表1。PCR扩增体系均为：每反应体系P1、P2引物各0.5μmol/L，dNTPs各200mmol/L，KCl10mmol/L，(NH4)2SO48mmol/L，MgCl22mmol/L，TrisHCl(pH9.0)10mmol/L，NP400.5%，BSA0.0

6、2%(、blaOXA23群、blaADC等β内酰胺酶的AB菌(另文报道)。氨基糖苷类药物自1944年首次发现链霉素以来，因抗菌谱广、疗效显著，在医学临床和畜牧兽医业得到广泛应用，但泛用和过度使用其耐药问题随之凸现，细菌对该类药物耐药是通过产氨基糖苷类修饰酶(aminoglycosidemodifyingenzyme，AME)、细菌16SrRNA基因甲基化酶(编码基因为rmtA)和氨基糖苷类药物作用靶位16SrRNA基因(16SrDNA)突变而致，其中前者为主要原因。氨基糖苷类修饰酶按功能可分成乙酰转移酶(AAC)、磷酸转移酶(A

7、PH)、核苷转移酶(ANT)［曾称腺苷转移酶(AAD)］三类，目前已发现的有30余种［9］。本研究发现宁波市第二医院AB菌不仅具有多重耐药性，而且aac(3)I、aac(6′)I和ant(3")I氨基糖苷类修饰酶编码基因携带率高(总检出率为85.2%)，与庆大霉素、阿米卡星的高耐药性(耐药率均为88.89%)相近。整合子是继转座子之后新发现的可移动基因元件，它不仅可携带多种β内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶基因，而且更易在同种细菌和不同种类细菌中进行基因的水平转移，使细菌的耐药性得以快速传播［10］。在耐药机制中，I类整合子最常见并

8、起着非常重要的作用，5′保守端有编码整合酶的intI1基因(1009bp)及启动子，其整合酶是含有337个氨基酸的蛋白，3′末端为耐消毒剂和磺胺基因(qacE△1sul1)。intI1与qacE△1sul1均为I类整