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时间:2018-11-22
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1、KL-6粘蛋白和E-,丐粘蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义郭秀春刘秀军(通讯作者)秦娜(巴彦淖尔市医院内蒙古巴彦淖尔015000)【关键词】KL-6粘蛋白;E-钙粘蛋白;乳腺癌【中图分类号】R73【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2015)11-0048-02我国乳腺癌的发病率呈明显上升趋势,在女性恶性肿瘤中居首位。目前乳腺癌的临床治疗虽然取得了一定的进展,但其发病率仍高居不下,生存率仍然不能令人满意[1]。木实验拟观察试图通过收集乳腺癌及癌旁组织标木,并通过采用逆转录酶聚合酶链反应技术检测大肠癌组织及癌旁组织中KL-6粘蛋白和E-钙粘蛋白的RNA水平表达变
2、化,更进一步完善对大肠癌组织的早期诊断和预后判断提供一个新的思路。1.对象与方法1.1研究对象收集2013年10月至2015年3只来自我院乳腺外科乳腺癌根治术后癌及癌旁标木各60例.其中年龄22〜80岁,TNM分期I、II、III期分别为13、23和24例,其中淋巴结转移38例。1.2实验方法按一步Trizol法提取样木组织的RNA:按说明书配制20ul的RT反应液(反应液配制请在.冰上进行)。1TotalRNA用量为lug。反转录反应条件如下:37°C15min,85°C5sec按说明书配制50ul的PCR反应液,94°C30sec,56°C*15sec,25Cycle7
3、2°C30sec。设循环25个,实验釆用GAPDH片段作为内参照。KL-6mucin、E-cadherin、GAPDH引物釆用Oligo软件进行设计,由invitrogen公司合成(具体序列见表1)。取PCR产物5ul,加5xLoadingBuffer2ul,2%琼脂糖凝胶电泳110V,100mA,25min,凝胶成像仪成像并保存结果。表1PCR引物详细序列:1.3统计学处理实验数据采用x-±s表示,组间比较采用t检验,两组以上比较采用方差分析,相关分析采用直线相关分析法分析。以SPSS13.0统计软件进行统计学分析。P<0.05为差异有统II•学意义。
4、1.结果KL-6mucin、E-cadherin基因表达量结果一致,癌组织明显高于癌旁组织,差异显著有统计学意义(P<0.05)(见图1,2,表2)。相对应内参基因GAPDH表达无差异(见图3)。乳腺癌组织中KL-6mucin、E-cadherin基因表达与年龄、性别、TNM分期无关(P>0.05),与组织分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)(详见表3)。KL-6mucin、E-cadherin基因相关性分析:60例乳腺癌标本RT-PCR法检测mTOR基因和elF4E基因灰度值相关性分析统计处理后结果为:r=0.892,P<0.05,二者呈明显正相关性
5、。表2RT-PCR法大肠癌及癌旁组织KL-6mucin、E-cadherin基因总RNA表达:(n=60,x-±s)注:Pl为KL-6mucin,P2为E-cadherin2.讨论肿瘤的形成是一个慢性长期渐变过程,而艽肿瘤细胞的侵润及远处转移是一个多因素共同作用的结果,苏中会涉及肿瘤的细胞和宿主得细胞及基质之间的相互作用。多项研究表明,MUC1利用多种方式在肿瘤的侵袭和转移中发挥了相当重要的作用。然而其发挥作用的方式和途径在不同的肿瘤类型中,也会奋所差别[2】。KL-6粘蛋白在肿瘤组织中表现异常的过度表达[3,4],例如乳腺癌、胰腺癌、胃癌、结直肠癌、前列腺癌
6、、肺癌等。本研究结果与冇关参考文献研究结果一•致。KL-6粘蛋白的表达量与年龄、性别、TNM分期无关(P>0.05),与组织分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。进一步预示着KL-6粘蛋白表达随着肿瘤的恶性程度密切相关,恶性程度越高,KL-6粘蛋白表达越强。E-cadherin作为粘附分子的成员之一,具有决定性的作用。在在人类的许多种肿瘤的检测发现,E-cadherin基因的表达奋不同程度的降低。例如胃癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、食管癌等[5,6]。一些中低分化结直肠癌的组织中检测发现,E-cadherin基因整体的表达降低或者缺失,而且其表达的下降
7、程度和肿瘤的转移有明显的正相关性。本研宄结果与有关参考文献研宄结果-致。E-cadherin粘蛋白的表达量与年龄、性别、TNM分期无关(P>0.05),与组织分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。进一步预示着E-cadherin粘蛋白表达随着肿瘤的恶性程度密切相关,恶性程度越高,E-cadherin粘蛋白表达越低。冇文献报道:MUC1能够选择性的减少E-cadherin/catenin复合体的形成,进而加速肿瘤细胞由肿瘤主体中游离出来,促进苏远处转移的发生[7】。本研究发现:乳腺癌癌组织中KL-6粘
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