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1、大鼠小肠缺血再灌注后血中NO和SOD浓度与肺损伤的相关性研究作者：李纪鹏 董光龙 王为忠 项红军【摘要】目的：探讨大鼠小肠缺血再灌注后血中一氧化氮（NO），超氧化物歧化酶（superoxidediamutase,SOD）的浓度变化与肺组织中Bax、Bcl-2、p53的表达及肺组织超微结构变化的相关性。方法：建立小肠缺血再灌注模型，分为对照组，再灌注后0、30min，1、2h，1、3、7d共8组，于各时相点检测血中NO和SOD的浓度，用免疫组织化学SP法观察肺组织中Bax、Bcl-2、p53的表达情况，透射电子显微
2、镜观察肺组织细胞超微结构变化。结果：大鼠小肠缺血再灌注后0minNO浓度升高，但至再灌注2h时则明显降低，其后又持续升高，至再灌注7d时达高峰。SOD浓度在再灌注0min明显下降，再灌注2h时升高，随后持续下降，至再灌注7d时达最低水平。Bax、Bcl-2免疫阳性细胞主要位于肺组织中血管内皮细胞和肺泡上皮细胞。再灌注0min，Bax、Bcl-2阳性细胞表达率升高，30min时其阳性细胞表达率均分别升高为17.1%和78.1%，Bcl-2表达高于Bax（P＜0.01）。2h时降低，其后升高，7d时阳性细胞表达率达到
3、高峰，分别为94.1%和83.4%，Bax表达明显高于Bcl-2（P＜0.01）。透射电子显微镜显示肺组织细胞超微结构损伤改变。结论：血中NO、SOD浓度变化和肺组织中超微结构的改变说明小肠缺血再灌注后可引起肺组织细胞凋亡和损伤，而大鼠小肠缺血再灌注后Bax、Bcl-2、p53在肺组织细胞中的阳性表达均有明显改变并可能引起细胞凋亡和损伤。【关键词】缺血再灌注损伤·小肠·肺损伤·一氧化氮·超氧化物歧化酶【ABSTRACT】Objective:TostudythechangesofconcentrationofNO,
4、SODinserumandtheexpressionofBax,Bcl-2,P53andthechangesofultrastructureinthelung.Methods:Modelsofischemiareperfusionofsmallintestinein,1,2h,1,3,7dafterreperfusion.TheconcentrationofNO,SODintheseruminedatthesametime.TheexpressionsofBax,Bcl-2andP53inthelungmunoh
5、istochemicalSPmethodandthechangesofultrastructureinthelungissionelectronmicroscopy.Results:TheconcentrationofNOincreasedapparently0minuteafterreperfusion,butdecreasedaftertinuteafterreperfusion,increasedaftertinandincreasedcontinuouslyafterreperfusion30min,is
6、sionelectronmicroscopyshoall·Lunginjury·Nitricoxide·Superoxidedismutase 缺血再灌注损伤（ischemiareperfusioninjury,IRI）是临床上常见的一种损伤现象，缺血再灌注（ischemiareperfusion,IR）所产生的反应性氧中间产物激活炎症免疫细胞，产生全身炎性反应，随后早期即可引起远处器官如肺、肝、肾等损伤，有研究表明严重的肢体缺血再灌注（limbischemiareperfusion,LIR）可致急性肺损伤（a
7、cutelunginjury,ALI）［1］。这种ALI的病理组织学变化主要为肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞广泛受损，但其确切机制和损伤方式仍不十分清楚［2］。本研究通过建立大鼠小肠IR模型，研究血清中超氧化物歧化酶（superoxidediamutase,SOD）的表达及肺中Bax、Bcl-2、p53的表达及电子显微镜下组织超微结构的变化情况，探讨小肠IRI后对于肺的损伤及其机制，为研究不同因素引起的IR对远处器官的次级损害的机制和防治建立基础。1 材料与方法1.1 实验材料 采用由第四军医大学实验动物中心提供的
8、雄性BI公司），SP免疫组织化学染色超敏试剂盒（福州迈新生物技术公司），DAB显色试剂盒（Sigma公司），速眠新（购自长春农牧大学兽医研究所）。1.3 制备模型 以速眠新（0.5mL/kg）肌肉注射麻醉后，仰卧位固定于操作板上，按无菌手术操作开腹、提出小肠，于肠系膜根部分离肠系膜上动脉，用10号丝线结扎阻断30min后松开恢复血流。于开放后0（动脉开放即刻）、30min
