棉织物生物整理之纤维素酶应用基础研究

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1、棉织物生物整理之纤维素酶应用基础研究第一章文献综述1.1纤维素酶的组成与生产纤维素酶是降解天然纤维素生成葡萄糖和纤维二糖的一组晦的总称，它是一种多组分复合酶系。现已确定纤维素酶含有三种主要组分，即外切型-P-葡聚糖酶(EC3.2.1.91,也称纤维二糖水解酵、C1酶或CBH)，内切型-P-葡聚糖酶(EC3.2.1.4,也称CMC酶、Cx酶、EG)和纤维二糖酶（EC3.2.1.21，也称P-葡萄糖苷酵或BG)。许多细菌、放线菌和真菌都能产生纤维素酶。目前应用于纤维素晦生产的菌株，包括曲霉属、Aspergillus、、木霉

2、属Trichoderma)、青霉属(enicilium)等，其中最主要的是木霉属中的里氏木霉，它可产生高活力的内切型-P-葡聚糖酶和外切型-P-葡聚糖酶，但纤维二糖酶活力不是很高，而曲霉属菌种如黑曲霉[Aspergillusniger)产生的纤维二糖酶活力较高⑴。内切型-P-葡聚糖酶，又称P-1,4-葡聚糖酶、内切型纤维素酶，是一种水解酶，可作用于纤维素分子内的无定形区，随机水解P-l，4糖眘键，产生大量的纤维素末端。内切型-P-葡聚糖酶可为外切型纤维素酶提供大量的反应末端，同时它也能水解小分子的纤维寡糖。里氏木霉的纤

3、维素酶系中至少可分离出5种内切酶成分，其中的重要成分是EGI和EGIII。EGI是主要的内切葡聚糖晦，它的pi值约为4.7，分子量约54KD。EGIII的pi值为4.8?5.6，分子量约为49kD。EGI为特异性酶，而EGII、EGIII的特异性较差。在内切酶中EGm是唯一有能力催化纤维三糖水解的酶。1.2纤维素海的作用原理纤维素雖各组分在催化水解过程中各尽其职，相互合作，对底物起着协同作用，但是各组分到底是怎么发挥作用的，各组分之间的影响和作用机理如何，其研究过程经历了从1950年Reese等提出了Ci-Cx理论开始

4、，到目前比较认同的EG、CBH和BG酶协同作用的认识过程。Ci-Cx理论认为纤维素酶由C

5、酶（P-l，4-葡聚糖纤维二糖水解酶）、Cx酶（分为外切P-l，4-葡萄糖酶和内切(3-1,4-葡萄糖酶）和P-葡萄糖苦酶组成。Ci酶主要作用于纤维素结晶区的某些P-1,4-糖苷键,使其转化可被Cx酶作用的非结晶形式(也可称为无定形纤维素），Cx酶采取随机反应的方式水解纤维素上以及被酶水解成的非结晶形式纤维素，使其转化为纤维二糖、纤维三糖、糊精等糖类，最后P-葡萄糖苷酶与纤维二糖作用，将纤维二糖转变为葡萄糖。而Nisizain、l

6、OOml水的条件下，分别在摇瓶中加入拂织物(5cm><5cm)以及0.5rnlBL-703酶液进行水洗，让其在自然条件下冷却，水洗过程中一直监控温度的变化，并在5niimlOmin、20min、30min测滤纸蹄活力的变化。在温度恒定为5(rC、缓冲溶液pH值为4.8，时间30min、100ml水的条件下，分别在摇瓶中加入棉织物(5cmx5cm)以及0.5mlBL-703酶液，恒温水浴振荡器120r/niin、140r/min、160r/min进行水洗实验，并在5min、lOmin、20min、30min测

7、滤纸酶活力的变化。在温度恒定为50°C、pH值为4.8(盐酸溶液调制）、时间30min、lOOml水的条件下，分别在摇瓶中加入棉织物(5cmx5i)以及0.5mlBL-703晦液，恒温水浴振荡器（140r/min)进行水洗实验，水洗过程中一直监控温度的变化，并在5min、lOmin、20min.30min测滤纸酶活力的变化。2.2.2.4_浓度对失重率的影响第三章纤维素酶各组分以及与其他生物酶协同作用.......273.1引言......273.2材料与方法......273.2.1实验材料......273

8、.2.2实验方法......283.3结果与讨论......313.4结论......42第四章综合评判纤维素酶水洗蓝色牛仔......434.1引言......434.2材料与方法......434.3模型的建立......454.3.1综合评价模型的建立......454.3.2主观综合评价各个集合的确定......464.3.3客观综合评价各个集合的确定......464.4结果与讨论......474.4.1主观评价结果......474.4.2客观评价结果......494.4.3主客观评价结果的比较....

9、..504.5结论......50第五章建议与结论......515.1建议......515.2结论......55第五章建议与结论5.1建议前面已经探讨了纤维素酶的一些酶系组成对其水洗效果的影响。而对于一个商品酶制剂来说，不仅要考虑到水洗效果而且要考虑其在储存运输，应用过程中的优化，制剂的配方等问题。而酶制剂中除了纤维素酶为主