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时间:2018-11-20
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1、PTEN基因和增殖细胞核抗原在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义论文【摘要】目的:探讨喉鳞状细胞癌中PTEN和增殖细胞核抗原(proliferatingceunuclearantigen,PA)的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测40例喉鳞癌中PTEN和PA的表达,并取30例声带息肉作对照。结果:PTEN在喉鳞癌中阳性表达率为52.5%,低于对照组的93.3%(P0.05)。PTEN在喉鳞癌中的表达与病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(均P0.05),与年龄、原发部位无显著相关(P0.05)。PA在喉鳞癌中的表
2、达率为77.5%,在声带息肉中为16.7%,两者间比较差异有显著性(P0.05)。PA的表达强度与喉癌的病理分级、临床分期及淋巴结转移呈显著相关,与年龄、原发部位无关。PTEN和PA的表达具有相关性(P0.05)。结论:PTEN表达的下调和PA的过表达在喉鳞癌的发生、发展及转移过程中发挥重要作用.freelouscellCarcinoma(LSCC).Methods:TheexpressionofPTENandPAin40casesoflaryngealsquemouscellCarcinoma(LSCC)munoh
3、istochemicalmethod(SP)、Thirtycasesofpolypofvocalcordalcontrols.TheexpressionofPTENinLSCCetastasisoflymphnode(P0.05),butetastasisoflymphnode(P0.05),butorsite.PTENactivityaybecorrelatedentandmetastasisofLSCC,andreverselycorrelatedaybehelpfultoevaluatetheprogressa
4、ndprognosisofLSCC.Keys;carcinoma,squamouscell;PTEN;proliferatingcellnuclearantigen;immunohistochemical喉癌是头颈部常见的恶性肿瘤,且发病率呈逐年上升趋势。通过对肿瘤的深入研究,人们发现肿瘤也是一种基因异常变化的疾病,有多种癌基因及抑癌基因参与发病。PTEN基因是一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,其基因的突变或丢失必然引起编码蛋白异常表达。增殖细胞核抗原(Proliferatingceunuclearantigen,PA)
5、是一种与细胞周期相关的蛋白,参与细胞DNA复制,其表达水平与肿瘤细胞增殖有关。近年来有学者发现,PTEN和PA蛋白与许多肿瘤中的发生、发展有关,但与喉鳞状细胞癌的关系研究较少文献报道。本研究应用免疫组化方法,对喉癌中PTEN和PA的表达水平进行分析,旨在探讨两者之间及其与喉癌临床特点的关系。1材料和方法1.1材料收集2002-2004年温州市第三人民医院及温州医学院附属第一医院手术治疗的喉癌患者病倒40例,术后经病理证实为鳞状细胞癌,术前均未进行放疗和化疗。40例中,男31例,女9例,年龄40~80岁,平均年龄59.
6、56岁。根据2002年AJCC的分期标准:TNMI期12例,II期11例,III期10例,IV期7例。其中高分化10例,中分化19例,低分化11例。术后证实无淋巴结转移25例,有淋巴结转移15例。另外选取30例声带息肉作为对照组。1.2方法所有标本均经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,3μm厚连续切片。参考说明书操作:石蜡切片,二甲苯脱蜡,梯度酒精水化,高压抗原修复,3%过氧化氢阻断后,分别加入鼠抗人PTEN单抗、鼠抗人PA单抗,4℃过夜后,加二抗,DAB显色,苏木精复染,常规脱水,中性树脂封片。以已知阳性片为阳性对
7、照,以PBS代替一抗作阴性对照。鼠抗人PTEN单克隆抗体、鼠抗人PA单克隆抗体、SP试剂盒及DAB底物显色剂购自北京中杉金桥生物有限公司。1.3结果判断PTEN蛋白和PA表达产物均主要定位于细胞核。每张切片随机选取5个高倍视野,由同一位医师用显微镜进行细胞计数。按染色强度及阳性细胞数所占百分比综合计分。染色强度:无色计为0分,淡黄色计为1分,棕黄色计为2分,棕褐色为3分;阳性细胞数:5%时计为0分,5%~25%为1分,26%~50%为2分,50%为3分。染色强度得分与阳性细胞数得分相加,0分计为(-),1~3分计为弱
8、阳性(+),4~5分计为中度阳性(++),6分计为强阳性(+++)。1.4统计学处理方法采用x2检验,并作Pearson相关分析。2结果2.1PTEN在喉癌中的表达PTEN蛋白表达产物定位于细胞核,呈棕黄色或棕褐色均匀颗粒(见图1)。PTEN在喉鳞癌组织中阳性表达率为52.5%(21/40),对照组为93.3%(28/30),差异有显著性(x2
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