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时间:2018-11-20
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1、转化生长因子论文【关键词】,转化生长因子【Abstract】AIM:TostudytheeffectsoftransforminggroL/LCO2for24h,anddividedintogroupsasfollog/L)group,andcontinuouslyculturedfor24h.Theculturesupernatanteasuredusingcolorimetry,NOlevelinedbynitratereductasetechnique,andET1contentinthemediumelinkedimmunosorbantassay(ELISA)method.RES
2、ULTS:TGFβ1antibodymarkedlyinhibitedHSCET1secretioninadoseeffectmanner,andET1contentsincontrolgroup,10,15mg/LTGFβ1antibodygroupsultipleparisonbetultaneously,asTGFβ1antibodydoseincreased,.freelg/LTGFβ1antibodygroupsol/Lrespectively.CONCLUSION:TGFβ1antibodycoulddecreaseET1levelandincreaseNOcontentinH
3、SC.【KeyinggroL/LCO2条件下培养24h进行以下分组实验,每组重复4个培养皿:①HSC空白对照组;②HSC+TGFβ1抗体.TGFβ1抗体为5~20mg/L,继续培养24h.取培养上清液,用硝酸还原酶法测定NO水平,化学比色法测定一氧化氮合成酶(NOS)活性.freelg/LTGFβ1抗体组分别为(8.50±0.46),(5.33±0.27),(3.69±0.33)μg/L,且各剂量组之间两两比较差异均有统计学意义(P0.05);随着TGFβ1抗体剂量加大,iNOS活性和NO的合成增加,对照组,10,15mg/LTGFβ1抗体组分别为(1.94±0.16),(3.29±0.4
4、2),(3.88±0.32)ku/L和(46.75±4.72),(80.68±5.44),(88.58±2.84)μmol/L.结论:TGFβ1抗体能降低HSCET1水平,增加NO含量.【关键词】转化生长因子β1抗体;肝星状细胞;内皮素;一氧化氮0引言肝星状细胞(hepaticstellatecells,HSC)活化不仅是肝纤维化的细胞学基础,而且活化HSC的收缩是门脉高压的细胞学基础.目前认为,一氧化氮(NO)、内皮素1(ET1)是调节HSC收缩与舒张的重要因素[1].HSC的活化是通过各种细胞因子经旁分泌或自分泌途径作用的结果,其中转化生长因子β1(transforminggroa公司
5、);NO测定试剂盒、NO合成酶(iNOS)测定试剂盒(南京聚力生物医学工程研究所);酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒(深圳晶美生物有限公司);兔抗ET1多抗(北京中山生物技术公司).1.2方法1.2.1HSC的培养HSC株CFSC由美国GreenL/L胎牛血清、105U/L青霉素、100mg/L链霉素的RPMI1640培养液中,37℃,50mL/LCO2条件下培养.当细胞呈单层致密状时,2.5g/L胰蛋白酶消化后传代.1.2.2TGFβ1抗体处理HSC细胞同步化处理后进行以下分组,每组重复4个培养皿.①HSC空白对照组;②HSC+TGFβ1抗体.TGFβ1抗体分别为5,10,15,20mg
6、/L,继续培养24h.1.2.3NO水平、iNOS活性及ET1含量测定取培养上清液,采用硝酸还原酶法测定NO水平,化学比色法测定NOS活性,ELISA双抗体夹心法检测ET1含量,具体操作按试剂盒说明书进行.统计学处理:所有资料以x±s表示,使用SPSS11.5统计软件包,多组间比较采用单因素方差分析(oneg/LTGFβ1抗体;cP0.05vs10mg/LTGFβ1抗体;dP0.05vs15mg/LTGFβ1抗体.2.2TGFβ1抗体对HSCiNOS,NO的影响体外培养的HSC能分泌一定量的NO,TGFβ1抗体增加HSC的iNOS活性,使NO的合成与分泌增加,不同剂量组与对照组比较差异均有
7、统计学意义,随着TGFβ1抗体剂量加大,iNOS活性和NO的合成增加,但20mg/L与15mg/LTGFβ1抗体组比较差异无统计学意义(P0.05),表明20mg/LTGFβ1抗体达到增加HSC的iNOS活性和NO的合成最大效应(表1).3讨论肝纤维化的形成机制较为复杂,多种细胞因子对其发病起着重要作用,单一细胞因子并非孤立发挥作用,各种细胞因子通过自分泌和旁分泌彼此相互作用,形成细胞因子网络,共同调控肝纤维化的发生和发
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