不同土壤因子与虎杖主要成分的相关性分析论文

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1、不同土壤因子与虎杖主要成分的相关性分析论文马云桐,万德光,黄清龙【摘要】目的测定不同区域虎杖生长的土壤因子中养分含量及对应虎杖药材中主要成分含量,并对之进行相关比较分析,为虎杖不同产地药材的质量评价及栽培中科学施肥提供依据。方法采用文献方法测定土壤养分及药材中主要成分的含量,并对所测数据进行多重性比较与相关分析。结果不同地域土壤养分含量、虎杖主要成分含量间有显著与极显著差异。结论有机质、速效性N,P,K含量高的土壤.freelcuspidatumSieb.etZucc.的干燥根及根茎。具有祛风利湿、散瘀定痛、治痈

2、肿疮毒等作用[1]。虎杖中主要含有蒽醌类、二苯乙烯类、水溶性多糖和鞣质等成分[2],其中大黄素、虎杖苷是其主要有效成分。现代药理学实验表明大黄素、虎杖苷对人体有许多医疗保健作用[3~5],主要包括强心扩张血管降压[6]、抗血栓形成[7,8]、降血脂[9]、镇咳[10]、保肝利胆[11]、抗菌[12~14]、抗病毒[15]、抗癌等[16]药理作用。植物中次生代谢物质的形成与积累除了随季节的气候(气温、湿度、日照等)变化外,亦受土壤中矿质营养、肥力等因素的影响。近十余年来,国内外对虎杖中大黄素虎杖苷的提取技术、测定方

3、法等进行了大量研究[17~20],但尚未见有关土壤营养状况差异与虎杖药材主要有效成分间的相关性分析。本研究对分布在四川10个不同地区的虎杖材料中大黄素、虎杖苷及生长地的土壤养分含量进行测定,所测数据采用多重比较与相关分析,比较了不同营养状况下的虎杖品质差异,对虎杖的规范化栽培、肥料的合理施用及高品质药材的获得均有一定的指导意义。1器材1.1材料实验土壤、药材由作者于200408~09采自四川的不同地区。根据取样的广泛性与代表性原则,每个采样地点选取大小、生长情况基本一致的鲜根茎和分别以五点式掘取土壤样品,自然状

4、态下去除表面水分后,均带回室内处理。土壤样品于室内自然风干,经磨细过筛处理备用;采得的虎杖根及根茎经加工切片后,放置自然通风处风干,于60℃下烘24h,干后粉碎,并过筛装袋备用。1.2仪器与试剂Agilent1100高效液相色谱仪,SPD-6AV紫外可见检测器。甲醇、乙腈为色谱纯;乙醇、浓硫酸、三氯甲烷为分析纯;水为重馏水;大黄素(批号110756-200110)、虎杖苷(批号111575-200301)均由中国药品生物制品检定所提供。2方法与结果2.1测定样品的制备2.1.1大黄素样品的制备取前述制备的样品粉末

5、(过3号筛)约0.1g,精密称定后置于125ml圆底烧瓶中,加入三氯甲烷25ml和2.5mol·L-1硫酸溶液20ml,称定重量,置80℃水浴中加热回流2h,冷却至室温,再称定重量,用三氯甲烷补足减失的重量,摇匀。分取三氯甲烷液,精密量取10ml,蒸干,残渣加甲醇使溶解,转移至10ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。2.1.2虎杖苷样品的制备取样同上,置于125ml圆底烧瓶中,加入稀乙醇25ml,加热回流30min,冷却至室温,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,取上清液,过滤即得。2.2土壤养分测

6、定分别精密称取风干土样(准确到0.001g),按下述方法测定:全氮用高氯酸-硫酸消化蒸馏法;速效氮用氯化钾提-蒸馏法;全磷用高氯酸-硫酸酸溶-钼锑抗比色法;速效磷用碳酸氢钠-硫酸钼锑抗混合显色法;全钾用氢氧化钠-钾钠离子测定法;速效钾用中性醋酸铵;有机质用重铬酸钾氧化法;pH值用氯酸钾浸提电位测定法结果见表1。2.3样品测定分别精密吸取5,10μl上述测定样及预制的对照品,注入液相色谱仪分别测定。色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱KromasilODSC18(5μm,4.6mm×150mm);条件分别为:大黄素是以甲

7、醇-0.1%磷酸溶液(80∶20)为流动相;检测波长为254nm;体积流速为1ml·min-1;柱温为室温;虎杖苷是以乙腈-水(23∶77)为流动相;检测波长为306nm;体积流速0.4ml·min-1;柱温29℃。将测定的峰面积,按预制的标准曲线项下的回归方程分别求得大黄素、虎杖苷的质量,再计算出虎杖中大黄素、虎杖苷的含量。结果见表1。表1各采样点的土壤养分与虎杖中主要有效成分含量(略)2.4数据处理以每个点的土样中全氮、全磷、全钾、速效氮、有效磷、速效钾、有机质;对应点虎杖药材中大黄素、虎杖苷等所测定的结果建

8、立分析数据库,计算后进行多重比较与相关分析。2.5不同地域土壤养分与虎杖中主要成分含量比较结果见表2。虎杖中大黄素的含量是大邑的为最高,邻水其次;马边、巴中最低;虎杖中有效成分虎杖苷的含量是邻水为最高,马边和都江堰其次;宜宾、峨眉最低。表2不同产地土壤养分与虎杖中有效成分含量多重比较(略)结果表明,邻水、大邑土壤pH值呈中性,全氮、全磷含量高的土壤中速效性氮和有效磷含量亦

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