补肾活血方对小鼠自身免疫性卵巢功能衰退的防治作用

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1、补肾活血方对小鼠自身免疫性卵巢功能衰退的防治作用作者：董莉,姜琳,孟炜,朱南孙【摘要】目的：探讨补肾活血中药对小鼠自身免疫性卵巢功能早衰（prematureovarianfailure,POF）的防治作用。方法：以BALB/c雌性小鼠卵巢组织制备卵巢抗原，皮下和两后脚掌多点注射免疫同种雌性小鼠建立卵巢早衰模型。分别在第1次免疫以及第3次免疫后给予补肾活血中药，灌服中药后分析阴道脱落细胞涂片，酶联免疫法检测外周血雌二醇（estradiol,E2）、卵泡刺激素（folliclestimulatinghormone,FSH

2、）以及黄体生成素（lutEinizinghormone,LH）浓度。结果：POF小鼠卵巢间质可见淋巴细胞浸润，外周血FSH和LH升高，E2下降明显（P<0.05）；而补肾活血中药能减少POF小鼠外周血FSH和LH含量，提高体内E2水平，早期预防比后期治疗用药作用显著。结论：补肾活血中药主要通过纠正紊乱的生殖内分泌轴，恢复部分卵巢功能，对免疫性卵巢早衰具有防治作用。【关键词】卵巢功能早衰;中草药制剂;小鼠　　Objective:ToinvestigatethepreventiveeffectofBushenHuox

3、ueRecipe(BSHXR),apoundtraditionalChineseherbalmedicine,onautoimmuneprematureovarianfailure(POF)inmice.　　Methods:OvarianantigenaleBALB/cmice.AmousemodelofPOFmunizationinjectionoftheovarianantigenofisotypefemalemiceonmultiplesubcutaneoussitesandticemunization.Thel

4、evelsoffolliclestimulatinghormone(FSH),lutEInizinghormone(LH)andestradiol(E2)inperipheralbloodelinkedimmunosorbentassay.　　Results:LymphocyteinfiltrationaofPOFmice.ThelevelsofFSHandLHberofgroaturefollicles.Theefficacyofearlytreatmentent.　　Conclusion:BSHXRcanreco

5、verovarianfunctioninPOFmicemainlybyregulatingtheindiscriminatehormonelevel,andBSHXRhaspreventiveeffectonautoimmunePOFinmice.　　Keyature;herbalpreparations;mice　　卵巢早衰（prematureovarianfailure,POF）是一类严重影响妇女生殖健康及身心健康的疾病。患者于40岁前出现闭经，伴烘热、汗出、烦躁等低雌激素症状，并常伴随其他内分泌自身免疫疾患，故其

6、治疗比较困难。POF的发病率为1%～3%，占继发性闭经的10%～20%［13］。由于病因不明，治疗颇为棘手，尚无有效措施，尤其对于特发性或自身免疫性卵巢功能衰竭的患者而言，如何减缓卵巢功能衰退的速度以恢复卵巢功能，提高生活质量，是目前生殖内分泌临床研究的一项重要课题。　　本研究用BALB/c雌性小鼠卵巢组织制备卵巢抗原，皮下和两后脚掌多点注射免疫同种雌性小鼠建立卵巢早衰模型。分别在第1次免疫以及第3次免疫后给予补肾活血中药，检测生殖内分泌及卵巢形态学改变，探讨补肾活血方（BushenHuoxueRecipe，BSHX

7、R）防治POF的作用机制，为临床运用中药治疗POF提供理论及实验依据。　　1材料与方法　　1.1实验材料　　1.1.1实验动物SPF级BALB/c雌性小鼠200只，体质量15～20g，由上海中医药大学实验动物中心提供。动物合格证号为SYXK(沪)20042005。　　1.1.2药物及试剂补肾活血方由仙灵脾15g、巴戟天15g、覆盆子15g、菟丝子15g、蛇床子10g、石楠叶10g、枸杞子15g、党参15g、黄芪20g、当归15g、川芎10g等组成，由上海中医药大学岳阳医院制剂室采用醇提法制作成合剂（相当于含生药2.5

8、g/ml）。卵泡刺激素（folliclestimulatinghormone,FSH）、黄体生成素（luteinizinghormone,LH）及雌二醇（estradiol,E2）小鼠ELISA试剂盒为美国RB公司生产。弗氏完全佐剂（pleteFreund'sadjuvant,CFA）和弗氏不完全佐剂（inpleteFreund