复元胶囊对实验性大鼠骨关节炎软骨中tnf

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1、复元胶囊对实验性大鼠骨关节炎软骨中TNF【摘要】目的观察复元胶囊对实验性大鼠骨关节炎软骨中的TNF-α和VEGF的影响。方法56只SD大鼠随机分为：正常对照组6只，生理盐水灌胃；模型对照组10只，造模后生理盐水灌胃；四环素组，复元胶囊低、中、高剂量组各10只，造模后分别用四环素、复元胶囊不同剂量灌胃。治疗10周后分别取各组胫骨平台关节软骨，采用HE染色进行Mankin’s评分，免疫组织化学染色法测定关节软骨中的TNF-α和VEGF表达的阳性细胞数。结果正常对照组HE染色Mankin’s评分与实验组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。各组关节软骨切片TNF

2、-α和VEGF免疫组化染色分析，正常对照组TNF-α和VEGF与实验组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论复元胶囊可能通过调控TNF-α和VEGF抑制炎症和血管增生，从而达到延缓关节软骨退行性改变的作用。【关键词】骨关节炎；复元胶囊；软骨；肿瘤坏死因子α；血管内皮生长因子　　Abstract：ObjectiveToobservetheeffectsofFuYuanCapsuleontumornecrosisfactor-alpha（TNF-α）andvascularendothelialgrolydividedintofivegroups:norma

3、lgroupodelcontrastgroupoderateandhighdoesgroupalgroupandmodelcontrastgroupoved.Sectionsofthearticularcartilageatoxylineosin.ThecartilagehistologicalchangesethodofMankin.ImmunohistochemicalstainingedtoinvestigatetheexpressionofTNF-αandVEGF.Articularcartilageicroscopeandimageanalysism

4、ethodeasuretheexpressionintensityofTNF-αandVEGF.ResultsThereongnormalgroupandothergroups（P＜0.05）.ImmunohistochemicalstainingindicatedthattheexpressionintensityofTNF-αandVEGFamongnormalgroupandexperimentalgroupsmationandandangiogenesis.　　Keyornecrosisfactor-alpha；Vascularendothelialg

5、roornecrosisfactor-alpha，TNF-α）和血管内皮生长因子（vascularendothelialgrol/100g），麻醉后纵行切开右侧后膝部内侧皮肤，切断内侧副韧带，打开关节腔，切除内侧半月板，切断前后交叉韧带，术中避免关节面软骨人为损伤。彻底止血，逐层缝合伤口组织，无菌包扎固定。术后用青霉素8×104U·kg-1肌注7d预防感染。术后一周每天驱赶大鼠30m，连续10周。　　2.2分组造模后存活的50只SD大鼠随机分为5组：模型对照组10只；治疗组又分为低、中、高剂量组，每组各10只；四环素组10只。另外6只为正常对照组。　　　　2.

6、3给药方法　　根据Meeh-Rutg·kg-1·d-1灌胃10周；正常组和模型组分别给予3ml生理盐水灌胃10周。　　2.4标本采集及检测方法　　于右侧胫骨平台取关节软骨，置于4%多聚甲醛固定，100g/L乙二胺四乙酸（ethylenediamietraaceticacid,EDTA）脱钙4周，每周换液一次，4周后石蜡包埋、切片，HE染色进行Mankin’s评分，免疫组织化学法检测TNF-α和VEGF的蛋白表达。　　2.5图像分析　　每个标本取5张切片，每张切片在显微镜下放大400×，随即取5个视野，采用细胞图像分析系统和医学图像分析软件，阳性强度用阳性细胞数

7、表示。　　2.6统计学分析　　用SPSS12.0软件处理，数据以±s表示，用方差分析和组间数据比较，P＜0.05有统计学意义。　　3结果　　3.1大体观察正常对照组:胫骨平台面呈半圆形，表面光滑，无增生迹象；实验组：右侧关节肿大，软骨表面粗糙，局部凹凸不平,关节面糜烂，多数形成软骨溃疡,深浅不一，有赘生物形成，关节腔内有关节液。大体观察见造模成功。　　3.2光镜下观察和Mankin’s评分Mankin’s骨关节炎评分法：1～5为早期，6～9分为中期，10～14为晚期。正常对照组:关节软骨4层结构清晰,软骨面光滑、完整,软骨细胞排列整齐,基质染色均匀；模型组：滑

8、膜部分呈结节样增生，软骨细胞减少，软骨