不同方法检测同种异基因造血干细胞移植受者巨细胞病毒感染的探讨

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1、不同方法检测同种异基因造血干细胞移植受者巨细胞病毒感染的探讨作者：张龙天莉，周健，魏旭东，蒋东霞，程爱民，胡杰英，郭淑利，朱兴虎，宋永平【摘要】　　本研究探讨同种异基因造血干细胞移植(alloHSCT)后早期有效检测巨细胞病毒(CMV)感染的方法。应用荧光定量PCR和ELISA试剂盒分别检测19名alloHSCT受者，214份标本的血浆DNA负荷量和血清IgM抗体，同时应用流式细胞术检测188份标本白细胞pp65抗原。结果表明：pp65抗原、DNA定量和IgM抗体的阳性检出率分别为30.85%(58/188)、35.51%(76/214)和13.08%(28/214)，连续

2、阳性病例和临床诊断的符合率分别为7/8、7/8和3/8。DNA定量与pp65抗原阳性检出率的差别无统计学意义(P＞0.05)，但两种检测方法有明显的相关性(P＜0.05)。IgM抗体阳性检出率明显低于DNA定量和pp65抗原，其差别均有统计学意义(P＜0.05)，与另两种检测方法虽有关系，但不密切。结论：流式细胞术和荧光定量PCR检测alloHSCT受者CMV早期感染可靠、简便快速，值得临床推广使用。【关键词】巨细胞病毒感染；同种异基因造血干细胞移植；流式细胞术；荧光定量PCR；pp65抗原　　DetectionandScreeningforHumanCytomegalovi

3、rusInfectioninAllogenEicHematopoieticStemCellTransplantationRecipientsbyDifferentMethodsAbstractTheaimofstudyethodforcytomegalovirus(CMV)inallogenEIchematopoieticstemcelltransplantation(alloHSCT)recipientsandtoparetheefficiencyoffluorogenicquantitativePCR(FQPCR),floetry(FCM)andELISA.Thepla

4、smaDNAloadingandserumlevelofIgMantibodyagainstCMVin214clinicalspecimensfrom19alloHSCTpatientseFQPCRandELISArespectively,thepp65antigenin118peripheralbloodleukocytesampleseasuredbyFCM.Theresultsshoount(P＞0.05),andtheyhavemanifestedrelationships(P＜0.05).ThepositiverateofIgMantibodydetectedby

5、ELISAshoallerrelativityethods(P＞0.05).ItisconcludedthatFQPCRandFCMaresensitive,rapid,suitableandreliablemethodsformonitoringrecipientreactiveCMVinfectionofalloHSCTrecipientsandareegalovirusinfection;alloHSCT;floetry;fluorogenicquantitativePCR;pp65antigen近年来，新型免疫抑制剂的出现及多种免疫抑制剂联合应用同种使异基因造血干

6、细胞移植（alloHSCT）得到快速的发展，非血缘关系造血干细胞移植、单倍体造血干细胞移植、非清髓造血干细胞移植已广泛开展。alloHSCT受者中人巨细胞病毒（humancytomegalovirus,CMV）感染极为普遍［1］，活动性CMV感染是继发曲霉菌、细菌混合感染的高危因素，且不易与细菌和真菌感染区别；其引起的间质性肺炎是器官移植失败重要原因之一［2］。更昔洛韦（ganciclovir,GCV）的使用使CMV疾病的治疗有了较大转机。目前有两种预防CMV感染的方法，其一是对具有CMV感染危险因素的患者给予GCV预防性治疗，时间一般为2-4个月。预防性治疗能有效预防CM

7、V疾病，但也存在着明显的缺点。GCV使移植后造血重建时间延长,可以导致更多的细菌和真菌感染；部分患者可能接受了不必要的治疗，增加了经济负担；另外，GCV还干扰机体对CMV特异性免疫反应。另一种是，移植后受者出现CMV活动的证据，但无临床表现，给予GCV预先性治疗。但取得预先性治疗疗效的切入点还在于早期发现CMV活动性感染，CMV多引起潜伏感染，早期所致疾病的临床表现多为非特异性，所以早期诊断主要依靠实验室检查。因此，建立早期快速、灵敏特异、可靠的CMV检测和鉴定方法，提高检测效率是所有环节的