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时间:2018-11-19
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1、千里光属植物水煎剂的抑菌作用比较作者:敖弟书,钱刚,罗素元,王安丽【摘要】目的比较千里光属植物水煎剂抑菌效果,为千里光潜在药用价值的开发利用提供依据。方法二倍稀释法被用于检测4种千里光对5种细菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果4种千里光对甲型副伤寒杆菌表现出相同的抑菌效果,但对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和福氏痢疾杆菌抑菌作用不同,表现为全缘千里光对金黄色葡萄球菌抑菌作用最强(MIC=1.95g/L),对大肠埃希菌和甲型副伤寒杆菌抑菌能力最差(MIC=7.81g/L)。结论全缘千里光可能具
2、有更高的抗菌有效药用成分,同种千里光对不同细菌表现出不同最低抑菌浓度可能是由于不同细菌生物学性状的差异所致。【关键词】千里光;抑菌作用;最低抑菌浓度千里光SenecioscandensBuch-Ham系菊科(positae)千里光属多年生草本植物[1],是我国应用历史悠久的传统中药,有清热解毒、杀虫、明目、凉血、生肌、驱风除湿的功效[2]。千里光在我国南方分布多个种,包括掌裂千里光、麻叶千里光、全缘千里光、羽叶千里光等[3,4]。有研究表明,千里光的药理学作用集中体现在抗菌[5]、抗钩端螺旋体[6]
3、、抗滴虫并具有抗氧化及自由基清除活性[7]等作用;临床试验表明,千里光对炎症性疾患及细菌性感染具有一定疗效[8],但迄今尚无针对不同种千里光的抗菌效果进行研究的报道。本研究组根据资源产地和形态学特征收集整理不同种千里光,以此为基础,比较不同种千里光抗菌效果,以分析千里光的遗传资源与药理学性状之间的关系,为进一步明确千里光的药理作用成分和种质改良提供参考依据。 1材料 1.1参试千里光资源参试的8份千里光资源系本研究组采自贵州省遵义、毕节、贵阳和安顺4个地区的野生种,包括掌裂千里光、麻叶千里光、全
4、缘千里光和羽叶千里光各2份(表1)。表1参试千里光SenecioscandensBuch.-Ham.的产地与表型(略) 1.2供试菌种5种供试菌种系遵义医学院微生物学教研室保存菌种,均为标准株,包括金黄色葡萄球菌(S.aureus)No.CMCC26001,铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)No.ATCC27853,大肠埃希菌(E.coli)No.ATCC25922,甲型副伤寒杆菌(S.ParatyphiA)No.CMCC50001,福氏痢疾杆菌(S.flexneri)No.CMCC5157
5、3。 1.3培养基M-H液体培养基。 2方法 2.1抗菌原液(千里光煎剂)的制备剪取千里光第7片叶以上的部位,于30℃烘干至恒重。参照陈奇[9]的方法,称取10g千里光置于砂锅,加20ml蒸馏水浸泡30min后,用慢火煎至水量浓缩为10ml过滤,药渣另加20ml蒸馏水继续煎煮、过滤,将2次滤液共20ml煎煮浓缩,定容至10ml,即得浓度为1g/ml的千里光水煎剂,经高压蒸气灭菌后备用。 2.2中药最低抑菌浓度(MIC)的测定按NCCLS推荐的琼脂稀释法测定实验菌株的MIC值。制备千里光琼脂平
6、板,千里光和药敏培养基琼脂按比例混合,使千里光的终浓度分别为250.0,125.0,62.5,31.25,15.62,7.81,3.90,1.95,0.98g/L。 2.3菌液的制备菌液调整为0.5麦氏单位后再按照1:10进行稀释,用1μl定量接种环点种于琼脂表面,最终琼脂上所含接种菌量为104个/ml。采用多点接种法,首先点种对照平板(不含千里光水煎剂),随后从最低浓度开始,依次点种不同浓度的千里光平板,于37℃孵育,24h后记录无菌生长的最低千里光浓度。 3结果 3.1千里光抗菌效果比较本
7、研究结果显示,当终浓度高于15.62g/L时,4种千里光资源对参试的5种细菌生长均表现出抑制作用(图1-a)。尽管各种千里光都表现出抗菌作用,但量化抗菌效果的最低抑菌浓度存在差异。当全缘千里光水煎液终浓度为7.81g/L时,仅大肠埃希菌出现菌斑(图1-b);而当其终浓度为3.90g/L时,大肠埃希菌和甲型副伤寒杆菌能够生长(图1-c);在其终浓度为1.95g/L时,表现为金黄色葡萄球菌不能生长,其余4种细菌能正常生长(图1-d)。对掌裂千里光而言,当其终浓度为3.90g/L时,铜绿假单胞菌、大肠埃希
8、菌和甲型副伤寒杆菌能够正常生长(图1-e)。当麻叶千里光的水煎液终浓度为7.81g/L时,表现为铜绿假单胞菌和大肠埃希菌出现菌斑,而其它三种参试细菌不能正常生长(图1-f);而对终浓度同为7.81g/L的羽叶千里光,表现为对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、甲型副伤寒杆菌和福氏痢疾杆菌有抗菌作用(图1-g)。4种千里光的终浓度为0.98g/L时表现为对参试的5种细菌没有抗性(图1-h)。 3.2不同种千里光的最低抑菌浓度如表2所示,参试的4种千里光对不同细菌抗菌作用有不
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