猪脑提取物对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的保护作用论文

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1、猪脑提取物对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的保护作用论文李永金，张鹤云，封云，陈素仙，张太平，陆任云，陈月芳，黄晓佳【摘要】目的观察猪脑提取物对痴呆大鼠学习记忆的影响.freeler病(AD)大鼠。将大鼠随机分成假损伤组、对照组、猪脑提取物组、猪脑提取物预防给药组及阳性药脑活素组。肌肉注射给药，连续给药30d。采用Y-迷宫和被动回避性跳台法测定大鼠的学习记忆水平;分光光度法测定大脑皮质MDA的含量，及海马的NO的含量和NOS的活性。结果与对照组大鼠相比，给予猪脑提取物第10，20，30天后，大鼠迷宫、跳台的错误次数明显减少;给药30d后，

2、大鼠大脑皮质MDA，海马NO含量和NOS活性明显降低。结论猪脑提取物可提高痴呆大鼠学习记忆能力，其作用机制与其降低大鼠脑内的MDA、NO、NOS有关。【关键词】猪脑提取物;阿尔茨海默病;学习记忆阿尔茨海默病(Alzheimer'sDisease，AD)是一种与年龄高度相关的，以进行性学习记忆、认知功能减退为主要临床症状，以老年斑、神经元纤维缠结、神经元丢失为主要病理改变的中枢神经系统退行性疾病，其发病机制目前尚不清楚1。在发达国家AD已成为继心脏病、癌症、中风之后人类疾病第4位的死因，因此积极开展对AD的研究具有重要意义。动物脑提取

3、物含有小分子肽、神经生长因子等多种活性成分，可用于治疗AD等一些脑功能性疾病2～4，目前已有众多的脑提取物产品进入临床，国外生产的脑活素已被广泛应用于阿尔茨海默病、脑中风、脑震荡、脑损伤的治疗，取得了一定的疗效。我们利用新生猪脑制备猪脑提取物，并对其进行药效和机制的初步探讨。1材料与仪器1.1动物雄性DA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)测定试剂盒为南京建成生物工程研究所产品;其余为国产分析纯。1.3仪器江湾Ⅰ型C脑立体定位仪，为第二军医大学产品;MG-2迷宫刺激器,.freelin离心15min，取上清用截至分子量1万的

4、超滤膜超滤，获得分子量1万以下的组份，冻干浓缩，即为有活性的猪脑提取物4。2.2分组与给药将大鼠随机分成假损伤组、模型对照组、猪脑提取物组、猪脑提取物预防给药组(0.15mg·kg-1)及阳性药脑活素组(4mg·kg-1)。其中按猪脑提取物剂量分成高(0.75mg·kg-1)、中(0.15mg·kg-1)、低(0.03mg·kg-1)剂量组。共7组，每组13只，肌肉注射给药，连续给药30d;假损伤组及模型对照组给生理盐水，其中预防给药组术前给药7d。2.3损毁海马Glu神经元的AD动物模型制备依据文献方法5，6，对双侧海马CA1区立

5、体定位后，将用0.01mol·L-1PBS缓冲液溶解的QA2μl(含150nmol)缓慢注入海马CA1区，假损伤组注入同等体积PBS。每侧注入时间为5min，留针5min，起针局部消毒后缝合皮肤。术后连续3d肌注青霉素防止感染。2.4Y-迷宫分辨学习能力检测依据文献方法5，6，将大鼠置于迷路箱的任一支臂中，适应5min，在灯亮5s时，给于电刺激(70V、延迟5s)直至大鼠最终逃避到安全区后10s，作为1次测验。凡大鼠受电击能从起步区逃至有灯光信号的安全区为正确反应，否则为错误反应。每次训练后休息30s，每天训练10次，记录错误次数A

6、/10，作为学习成绩。24h后重复以上试验，记录上述指标，作为记忆成绩。分别于术前、术后10，20，30d进行测试，均于下午14:00～17:00进行。2.5被动回避性跳台试验各组动物给药后1h进行被动回避性跳台试验7。将大鼠放入实验箱内，适应5min后，通以36V交流电以大鼠从台上跳下双足接触电珊遭到电击为错误反应，记录3min内出现错误的次数，训练后24h进行测验，记录3min内出现错误的次数作为记忆成绩。分别于术前、术后10，20，30d进行测试，均于上午8:00～11:00进行。2.6生化指标MDA、NO、NOS的检测快速断

7、头取海马组织及大脑皮质，称重，按1∶10(DA的含量。MDA，NO，NOS的测定方法按其各自分析试剂盒操作要求进行。样品蛋白定量采用改良Loer病大鼠学习记忆影响及其分子机制J.中国药理学通报，2000，16(5):570.6李永金，顾振纶，陈月芳，等.槲皮素对阿尔茨海默病大鼠学习记忆影响及与海马细胞凋亡关系的研究J.中草药，2003，34(7):632.7姜红柳，杨振，孟勤，等.人参皂苷Re对小鼠学习记忆障碍的作用J.中国药理学通报，2008，24(10):1399.8沈梅红，李忠仁，马骋，等.针药并用对喹啉酸损毁海马CA1区痴呆

8、大鼠记忆的影响J.中医药学刊，2003，21(6):883.9王羽，董志，朱丽霞，等.桂利嗪对兴奋毒损伤的海马神经元保护作用及其机制的实验研究J.中国药学杂志，2006，41(20):1549.