冰冻切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）染色试剂.doc

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1、冰冻切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）染色试剂盒产品说明书（中文版）主要用途冰冻切片弹性纤维（ELASTIC）马森（MASSON）染色试剂是一种旨在使用标准化的化学脱蜡方法和伟郝夫（Verhoeff）苏木素以及三色染料（trichrome），分析和区分冰冻组织切片中的弹性纤维的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。广泛用于结缔组织、肌肉组织和纤维蛋白的研究等。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。技术背景弹性纤维（elasticfiber），又称为黄色纤维（yellowf

2、iber），是固有结缔组织（Connectivetissueproper）细胞外基质的成分之一，由平滑肌细胞和成纤维细胞产生弹力蛋白质（elastin）、原纤维蛋白（fibrillin；FBN）等构成。弹性纤维具有可伸展性。存在于皮肤、肺、动脉、静脉、弹力软骨、牙周韧带（periodontalligament）、脂肪组织中。弹性纤维缺失导致皮肤松弛症（cutislaxa）、威廉姆斯综合征（WilliamsSyndrome）等疾病。基于摩罗利（mallory）首次应用三色系统的方法，马森（masson）进行了改良，在三色复合染料体系

3、中，使用苯胺篮（anilineblue）替代绿篮。同时使用伟郝夫（Verhoeff）苏木素选择性染色弹性纤维，三色复合染料帮助区别其它包括肌肉、胶原纤维、纤维蛋白（fibrin）等组织成分。马森方法操作复杂，可以细致区分多种组织成分。产品内容清理液（ReagentA）200毫升固着液（ReagentB）10毫升韦格液（ReagentC）100毫升祛色液（ReagentD）20毫升岑克液（ReagentE）100毫升范氏液（ReagentF）10毫升比氏液（ReagentG）10毫升酸性液（ReagentH）10毫升染色液（Reag

4、entI）10毫升修正液（ReagentJ）10毫升脱水液A（ReagentK）10毫升脱水液B（ReagentL）10毫升透明液（ReagentM）10毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证6月用户自备5小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器培养箱或烘箱：用于样品反应孵育微波炉：用于样品反应孵育处理中性树脂：用于切片封片光学显微镜：用于切片染色后观察分析实验步骤一、样品固着处理1．准备好5微米厚的冰冻切片2．小心加上200微升清理液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品

5、表面3．室温下孵育2分钟4．小心移去切片上的清理液（ReagentA）5．小心加上200微升固着液（ReagentB）在切片上，铺满整个切片样品表面6．室温下孵育5分钟7．小心移去切片上的固着液（ReagentB）8．小心加上200微升清理液（ReagentA）在切片上，铺满整个切片样品表面9．室温下孵育2分钟10．小心移去切片上的清理液（ReagentA）二、样本染色处理操作一：标准染色1．小心加入1毫升韦格液（ReagentC）在切片上，铺满整个切片样品表面2．放进60℃恒温培养箱孵育60分钟3．小心移去韦格液（Reagent

6、C）4．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟5．小心移去切片上的清理液（ReagentA）6．小心加入200微升祛色液（ReagentD）在切片上，铺满整个切片样品表面7．室温下孵育5分钟8．小心移去祛色液（ReagentD）9．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟10．小心移去切片上的清理液（ReagentA）11．小心加入1毫升岑克液（ReagentE）在切片上，铺满整个切片样品表面12．放进60℃恒温培养箱孵育60分钟13．小心移去岑克液（ReagentE）14

7、．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟15．小心移去切片上的清理液（ReagentA）16．小心加入200微升范氏液（ReagentF）在切片上，铺满整个切片样品表面17．室温下孵育30分钟18．小心移去范氏液（ReagentF）51．室温下，小心将切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟2．小心移去切片上的清理液（ReagentA）3．小心加入200微升祛色液（ReagentD）在切片上，铺满整个切片样品表面4．室温下孵育5分钟5．小心移去祛色液（ReagentD）6．室温下，小心将

8、切片置入50毫升清理液（ReagentA）中孵育2分钟7．小心移去切片上的清理液（ReagentA）8．小心加入200微升比氏液（ReagentG）在切片上，铺满整个切片样品表面9．室温下孵育5分钟（注意：可以延长至15分钟，增强染色效果）10．小