有机酸柱使用手册

《有机酸柱使用手册》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、有机酸分析柱使用手册ChrompackOrganicAcidsColumn注意ChrompackOrganicAcids色谱柱填充的是聚合物材料，需要特殊的维护。向柱内导入以下介绍了的以外的有机溶剂会导致聚合物材料膨胀和过度增压。因此，你应当在安装柱子以前，先用异丙醇，然后用0.1N的硫酸十分彻底地冲洗管路以彻底去除有机溶剂。在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。未正确地使用不能享受保修待遇。1．简介ChrompackOrganicAcids柱填充有氢形式的阳离子排斥树脂，特别开发用于在低牙条件下分离包括酒、

2、果汁、奶制品、生物样品、工业原料和环境样品中的有机酸。2．洗脱推荐使用浓度范围在0.002到0.05N的稀硫酸溶液。大多数的分析使用0.01N的硫酸（pH=±2.3）都可以获得成功。其他的强酸例如磷酸和高氯酸也可以使用，但是卤酸例如盐酸不推荐使用，因为它们会腐蚀不锈钢。当有强酸用于柱子的洗脱液的时候，柱子就进行了自身再生。所以，特别的再生步骤是不需要的。但是这样并不能直接对洗提强度和大多数有机酸的保留性质进行校正，较强的洗提强度通常只减少最后馏出的化合物的保留时间。在使用以前，所有的洗脱液都要用0.45μm滤膜过滤和脱气。对

3、于这个柱子，使用有机相修正，例如乙腈（最大20%），可以缩短保留时间。这样做，总是会造成背压的升高。所以，较高的操作温度和较低的洗提流速通常可用于防止产生过高压力。注意，一旦对柱子使用了有机相修正，柱子就会保留使用了有机相修正的洗脱液的色谱特性，即使洗脱液已经恢复到原始的100%的水相，柱子的性质也不会回到当初发货时的状态了。因此，如果你的应用中包括有芳香酸或不饱和酸，它们会出现较长的保留时间，我们推荐使用Chrompack的芳香酸柱（Cat.no.28352），它是专门设计用于此类化合物的。3．流量和压力推荐用于Chrom

4、packOrganicAcids柱的流量是0.3-0.8ml/min。任何情况下洗脱流量都不能超过0.8ml/min，记住柱子压力产生的原因有洗脱流速，柱温，洗脱液的黏度等等。要限制洗提流速，使泵压力不超过2200PSI。在45°C，0.6ml/min流速时，预期的压力应当在600-1500PSI之间。如果在此条件下，柱压超过了1200PSI，通常指示有污染物沉积在填充材料上，必须采取改正的措施。（见有关柱效丧失的原因一节）。4．样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。你必须防止将脂肪，油脂，蛋白质物质和重金属离

5、子导入色谱柱，不管是流动相还是样品。特别地，要禁止导入颗粒杂质。这些最终都会造成操作压力的增高而且非常困难或者不可能去除。生物样品在注射以前必须除去蛋白质。较好的除蛋白试剂是磺基水杨酸。1．柱前过滤器柱前过滤器含有0.5-2.0um的多孔不锈钢烧结物，安装在样品注射器和柱子之间用于从洗脱液中去除颗粒物。这样可以防止分析柱产生压力增高的问题，延长柱子的寿命。当有保护柱的时候，柱前过滤器就可以不用了。2．保护柱保护柱应当用在这个柱上，因为样品和洗脱液污染可能会造成柱压力的增高。样品中诸如盐和蛋白质类的污染物可能会使柱效降低，在注

6、射进柱子以前应当去除。3．样品量通常使用的样品量在10-50微升的范围内，但是进样高达100微升应当没有问题。进样500微升或者更多可能会导致峰变宽或者融合。4．温度ChrompackOrganicAcids柱可以在20-90°C使用。提高柱温会改善柱效。然而，柱温也会样品的保留，所以建议使用柱温箱以保证得到可以重复的结果。由于某些分离对温度非常敏感，所以有必要仔细地操控温度以优化分离效果。如果在室温使用这个柱子，洗脱流速必须降低保持泵压不高于2200PSI。5．贮存柱子提供给你的时候使用0.01N的硫酸作为平衡。这也是建议

7、的用于贮存的洗脱液。柱子在保存的时候，一定要使用提供的螺丝和垫圈将端口密封。色谱柱必须以这种方式使用和保存，在任何时候都要保证不使柱床干涸。不正确的贮存（没有密封）或不正确的使用，会导致填充材料部分地干涸，会发生高的柱压。在这种情形下，可以倒转柱子，要以0.1ml/min的流速在90°C向柱子泵入0.01N的硫酸。逐渐增加流速到0.5ml/min。你将会得到正常的压力，柱子将可以用于任意方向。如果这样还不能解决问题，柱子可能有颗粒物或其他物质的污染。6．柱效丧失的可能原因1．额外的峰展宽。要保证管路的长度和内径都保持最小。2

8、．不正确的柱温。3．不正确的洗脱流速。4．在开始洗脱的时候，平衡时间不够。1．洗脱液的pH或离子强度不正确。2．不正常的阳离子（如Na+或H+）。3．聚合物污染。a.高柱压伴随柱效降低。1．颗粒物积聚在烧结物或者聚合物床上。（a）样品来源---过滤或离心（b）洗脱液来源---过滤洗脱液，封