竹叶总黄酮提取物的分离纯化方法的研究论文

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1、竹叶总黄酮提取物的分离纯化方法的研究论文【摘要】目的优化竹叶总黄酮的分离纯化工艺。方法采用单因素实验，以芦丁为标准品，用分光光度法测定样品中总黄酮含量。结果乙醇浸取浓度、萃取有机溶剂、大孔树脂以及乙醇洗脱浓度对竹叶总黄酮的分离纯化有一定影响。结论竹叶粉末采用75%乙醇提取，氯仿萃取除杂质，再经D101大孔树脂吸附，70%乙醇洗脱，可使总黄酮含量达到85%以上。【关键词】竹叶；总黄酮；提取工艺Abstract：Objective：Tooptimicetheextractiontechnologyoftotalflavoneinbambooleaves.Me

2、thodsSinglefactorizeextractingprocess.Concentrationoftotalflavoneeasuredbythespectrophotometer,rutinusedasstandardsample.ResultsContentofethanol,extractsoforganicsolution,bambooleaves.Conclusionoveimpurity,D101resinisusedforadsorption,then70%alcoholisusedtobooleaves；Totalflavone；

3、Extractingtechnology竹叶为禾本科纲竹属植物毛竹Phyllostachyspubescens的叶子。竹叶黄酮有抗衰老、抗应激、抗疲劳、调节血脂、阻断亚硝化反应、增强免疫能力、抗菌、抑菌等作用［1］。目前竹叶黄酮被大量应用于药品、食品、化妆品等生产中。竹叶是在竹材加工过程中的剩余物，目前还没有被充分利用。竹叶主要含有黄酮类化合物.freelg，用水溶解，定容100ml，得浓度为0.2mg/ml的芦丁标准液。分别精确量取上述标准液1，2，3，4ml和5ml置于10ml的容量瓶中，用60％的乙醇补充至5ml，各加5％的NaNO2溶液0.3ml

4、，摇匀，放置6min，再各加10％的Al(NO3)3溶液，摇匀，放置6min，加入1mol/L的NaOH溶液4ml，稀释至刻度，放置20min，在510nm处测定，以吸光度A对浓度C进行线性回归。C=1.8475A-1.6193，r=0.9999结果表明，芦丁水溶液在0.02～0.1mg/ml范围内与其吸收度呈良好的线性关系。移取适量竹叶提取液于10ml容量瓶中，用60％的乙醇补充至5ml，按上述测芦丁的方法依次加入NaNO2，Al(NO3)3，NaOH，放置20min，在510nm处测定吸光度，根据标准曲线求出相应的黄酮浓度。2.2最佳乙醇提取液浓度的

5、选择黄酮类化合物在植物中大多以黄酮苷或游离苷元的形式存在，而黄酮苷和游离苷元在水中的溶解度相对较小，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯等有机溶剂。所以，醇提法就成了从植物中提取黄酮类物质最常用的一种方法。因此，对最佳乙醇浓度进行了实验，称取过筛的竹叶粉末10g5份，置锥形瓶中，分别用95%，85%，75%，65%，55%的乙醇各100ml于65℃恒温水浴中进行提取，时间3h，分别检测浸取液总黄酮含量。结果见图1。2.3萃取液的选择取20g经过筛的竹叶粉，加入200ml一定溶度的乙醇溶液，减压回流浸取3h，趁热抽滤得到浸取液，将浸取液静置至室温后测定其总黄酮含量，

6、蒸干浸取液即得粗提物。称取一定量的粗提物，配制成一定浓度的水溶液（即原料液），分别用石油醚、氯仿、醋酸乙酯萃取至有机相色淡，收集水相，减压浓缩干燥。检测含量结果见表1，说明氯仿萃取效果最好，萃取后的总黄酮提高了2倍多，而其它两种萃取剂对总黄酮变化不大。图1乙醇浓度对粗提液黄酮含量的影响说明当乙醇浓度为75％时，粗提液中的总黄酮达到最大。表1有机溶剂萃取对总黄酮含量的影响2.4大孔树脂的筛选2.4.1静态吸附和解吸取10种前处理的大孔树脂各20g，分别加入竹叶提取液100ml，每5min振摇1次，2h后分别测定树脂对竹叶总黄酮的吸附率。然后将已吸附的树脂过

7、滤抽干，用70％的乙醇解吸，每5min振摇1次，2h后分别测定树脂对竹叶总黄酮的解吸率。结果见表2。表2大孔树脂对竹叶总黄酮的吸附率与解吸率实验结果表明，吸附率大于90%，解吸率大于60%的有AB-8，HP20，SP207，D101等4种大孔树脂。2.4.2动态吸附和解吸取静态吸附优选后处理好的4种树脂各10ml于树脂柱内，加竹叶粗提液于柱顶，以2BV/h的流速进行动态吸附，按树脂床体积的倍数时收集流出液，测定竹叶总黄酮的含量，绘制各树脂的泄漏曲线，结果见图2。然后先用5BV水以2BV/h的流速洗脱，再以70%乙醇以2BV/h的流速洗脱，按树脂床体积收集

8、，于510nm处测定吸光度，计算乙醇洗脱液中总黄酮的浓度。结果见表3。表3动态解