中药芪参复康对焦虑模型大鼠β ep及细胞因子的影响论文

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时间:2018-11-18

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1、中药芪参复康对焦虑模型大鼠βEP及细胞因子的影响论文【摘要】目的:对中药芪参复康(QSFK)胶囊抗焦虑作用的神经免疫调节机制进行初步探讨.方法:采用国际通用的高架十字迷宫模型(EPM)焦虑动物模型,用丁螺环酮(Bus)作对照,观察QSFK对EPM大鼠βEP,血清NO,IL1β,IL6和TNFα的影响.结果:与模型组比较,QSFK和Bus均能降低EPM大鼠血浆βEP含量(P0.01),对下丘脑βEP水平无明显影响;但两组均能升高EPM焦虑模型大鼠血清NO水平(P0.05);QSFK还可升高EPM大鼠血清IL

2、1β和TNFα水平.freelazetest,EPM),观察了QSFK对EPM大鼠β内啡肽(βEP)、血清一氧化氮(NO)、白细胞介素1β(IL1β)、白细胞介素6(IL6)、肿瘤坏死因子α(TNFα)等细胞因子水平的影响,对本方抗焦虑作用的神经免疫调节机制进行初步探讨.1材料和方法1.1材料SD品系雄性大鼠,体质量(180±10)g,由西安交通大学实验动物中心提供.QSFK胶囊是由炙黄芪15g、西洋参10g、白术10g、天麻10g、枸杞子10g、熟地黄10g、白芍10g、阿胶10g、丹参10g、当归10g、

3、川芎10g、淫羊藿10g、酸枣仁15g、远志10g、茯苓10g、鹿茸5g中药材组成.由本院中药制剂中心提供,0.3g/粒.丁螺环酮片剂(buspirone,Bus)5mg/片,为西南合成制药股份有限公司产品.研钵粉碎后用蒸馏水溶解,加入20g/L羧甲基纤维素钠1~2滴充分混匀,配成100g/L浓度.4℃保存,使用前混摇均匀.βEP放免试剂盒由第二军医大学神经生物学教研室提供;IL1β,IL6,TNFα放免试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免研究所提供;DigBehvEPMR型大鼠高架十字迷宫为上海吉量软件科技有

4、限公司产品;SN695B型智能放免γ测量仪为上海核所日环光电仪器有限公司产品;DU7型紫外分光光度计为美国Beckman公司产品.1.2方法大鼠每笼10只,不限食水.室温(18±2)℃,保持安静.将大鼠随机分为模型,BUS,QSFK共3组,每组10只.其中QSFK组按1.2g/(kg·d)给予灌胃,Bus组给予1mg/(kg·d)灌胃,模型组灌服等容积的生理盐水.各组连续给药10d,末次给药1h后做行为学测试[2].大鼠EPM行为学测试结束后,立即断头处死,迅速在冰盘上剪开颅盖和脑膜,分离下丘脑,称质量,制成匀浆,

5、加入1mol/LHAC1mL,室温放置2h,再加入1mol/LNaOH1mL,中和酸,4℃,4000r/min,离心20min,取上清液,置-20℃冰箱保存待测下丘脑βEP;断头取血,其中2mL置于加入0.3mol/LEDTA2Na40μL和抑肽酶40μL抗凝剂的试管中,4℃,4000r/min,离心20min,取血浆,待测血浆βEP;其余血液室温放置,3000r/min,离心20min,取血清,-20℃冰箱保存待测NO,IL1β,IL6,TNFα.其中NO测定按照NO试剂盒(南京生物医学制剂公司)说明在DU

6、7型紫外分光光度计上测定NO浓度.βEP,IL1β,IL6,TNFα均采用放免法严格按试剂盒说明书方法进行测定.统计学处理:各组数据用x±s表示,采用单因素方差分析(OneanKeuls检验,全部数据用SPSS11.0forg/kgBus可以明显升高经EPM探究后大鼠血清NO水平,推测作为抗焦虑药物Bus的抗焦虑作用除了已经了解到的对中枢神经递质、调质影响之外,可能还包括对NO调节的机制,值得进一步研究.实验结果还显示,QSFK也可显著升高EPM大鼠血清NO水平,提示其抗焦虑作用可能与提高血清NO浓度有关.免

7、疫系统对神经系统的影响是通过ILlβ,TNFα等细胞因子实现的,这些被称为免疫调节递质的细胞因子的激活可以引起一系列生理、行为、情感和认知的改变.迄今为止,焦虑与其伴有的机体免疫功能改变的心身交互作用机制及其因果关系目前尚不十分清楚,有关焦虑患者免疫功能的研究结论也不一,但有许多资料表明焦虑患者确实存在免疫功能的失调[5],在异常免疫状态可引发焦虑[6].我们观察到,在经EPM探究后即刻时间,1.2g/kg剂量QSFK可以显著提高EPM大鼠血清IL1β,TNFα水平,对IL6影响不明显,提示QSFK可使EPM大鼠

8、经EPM探究本已升高的细胞因子水平继续升高,推测可能与加强机体对外来刺激的防御性保护反应有关.我们发现,QSFK可降低EPM焦虑模型大鼠βEP的释放,提高血清NO水平,推测QSFK有可能通过上述途径实现对机体免疫功能的调节,改善焦虑症可能伴有的免疫功能失调.【

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