纯钛表面聚吡咯涂层的生物安全性研究论文

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1、纯钛表面聚吡咯涂层的生物安全性研究论文【关键词】牙种植体,聚吡咯,生物安全性,生物相容性材料【Abstract】AIM:ToevaluatethebiologicalsafetyofpolypyrrolefilmelectropolymerizedonTisubstratesforpossibleuseasdentalimplant.METHODS:Thebiologicalsafetyentsincludinghemolysistest,shorttermsystemictoxicitytest,oralmucousmembraneirritationtestandcytotoxicity

2、test(MTTtest).RESULTS:Thematerialhadnohemolyticactivities.Theshorttermsystemictoxicitytestresultsshoals.Nolocalresponseucosamembraneirritationtest.MTTrevealedthatL929cellsgrehavegoodbiologicalsafety.【Keyplants;polypyrrole;biologicalsafety;biopatiblematerials【摘要】目的:评价纯钛表面聚吡咯涂层的生物安全性,为口腔种植体表面改性提供依据.方

3、法:分别通过溶血试验、口腔黏膜刺激试验、细胞毒性试验(MTT法)和急性全身毒性试验,初步评价纯钛表面聚吡咯涂层的生物安全性.结果:纯钛表面聚吡咯涂层材料无溶血现象,不影响凝血功能;短期全身毒性实验的受试小鼠心、肾、肝的组织切片均未见病理变化;口腔黏膜刺激实验未见异常组织学反应;MTT试验显示L929细胞在涂层浸提液中生长良好,细胞毒性为0级.结论:纯钛表面聚吡咯涂层材料具有良好的生物安全性.【关键词】牙种植体,聚吡咯,生物安全性,生物相容性材料口腔种植修复是目前最具前景的义齿修复手段.freelo龄新西兰大耳白兔1只,雄性,体质量1.5kg(第四军医大学实验动物中心),昆明成年小白鼠16只,

4、体质量18~22g(第四军医大学实验动物中心),60~70d金黄色地鼠10只,体质量140~160g(西安交通大学动物实验中心),小鼠结缔组织成纤维细胞L929细胞株(第四军医大学口腔生物实验室),钛材TA2(Ti西北有色金属研究院),对甲苯磺酸钠(ToSNa,西安化学试剂厂),Pyrrole(Py,美国Sigma公司),217型KCl饱和甘汞电极(上海化学试剂厂),ZF5型恒电位仪(上海正方电子电器有限公司),JSM840型扫描电镜(日本Jeol公司),BX41型光学显微镜(日本Olympus公司),MPSUV260型紫外分光光度仪(日本岛津公司),酶联免疫检测仪(美国BioTek公司),

5、DMEM培养液(美国GibcoBRL公司),胎牛血清(浙江金华清湖犊牛利用研究所),胰蛋白酶(上海浦东生化试剂厂),MTT(美国Sigma公司).1.2方法1.2.1纯Ti表面PPy涂层制备与表面形貌观察将TA2加工成直径18mm,厚1mm的圆型试件,金相砂纸从280#逐级打磨至800#.激光焊接机将直径0.3mmTi丝焊接于圆型试件侧面,作为工作电极引线.采用ZF5型恒电位仪在Ti试件表面恒电流电化学聚合PPy,聚合电流密度控制为1mA/cm2.电解液为0.1mol/L对甲苯磺酸钠、0.1mol/LPyrrole水溶液,pH值为4.0左右.Ti试件为工作电极,铂片为对电极,217型KCl饱

6、和甘汞电极为参比电极.涂层厚度由聚合过程中通过的电量来计算.每通过100mC/cm2单位面积的电量大约生成0.28μm厚度的PPy涂层[4].PPy涂层厚度均控制为100μm.采用JSM840型扫描电镜进行表面形貌观察.1.2.2溶血试验将10个Ti表面PPy涂层试件无菌试管完全浸没于20mLDMEM培养液中,置于37℃培养箱中72h,获得浸提液.心脏穿刺抽取新西兰大耳白兔血10mL,立即加入20g/L的草酸钾0.5mL,抗凝,取8mL兔血加入10mL生理盐水中稀释备用.实验分为3组,每组平行3份试样.阴性对照组:0.2mL稀释兔血加入10mL生理盐水;阳性对照组:0.2mL稀释兔血加入10

7、mL三蒸水;涂层实验组:0.2mL稀释兔血加入10mL浸提液.37℃水浴60min,离心,取上清.在MPSUV260型紫外分光光度仪上测A540nm值.溶血率计算公式为:溶血率(%)=(实验组A540nm-阴性对照组A540nm)/(阳性对照组A540nm-阴性对照A540nm)×100%.溶血率大于5%则预示阳性结果.1.2.3急性全身毒性试验将PPy涂层用锋利刀片从Ti表面刮下,研磨粉碎后高温高压消毒,无

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