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1、用ELISA评价胶体金测试卡检测乙型肝炎病毒血清标志物两对半的性能论文.freelin,而ELISA的为1h。100例HbsAg阴性标本除2例HbcAbELISA检测阳性而胶体金测试卡检测阴性外,其他结果均相同。200例HbsAg阳性标本中,胶体金测试卡法检测6例HbsAg阴性,符合率97.0%;9例HBeAb检测阴性,符合率92.9%;7例HbcAb检测阴性,符合率96.5%。结论胶体金测试卡与ELISA相比,不需要特殊设备,.freelanceofcolloidalgoldcardindetectingHBVade.ResultThedetectin
2、gtimeforsinglesampleinbycolloidalgoldcardand1hbyELISA;outofthe100casese;outofthe200casesent,easytoobservetheresults,quickinthedetectionofsinglesample,simpletooperateandhighsensitivespecificity,itcanmeettheneedofemergentcases.KEY～3型自动酶联免疫系统分析仪1.4方法及结果判断1.4.1胶体金测试卡采用免疫层析法,其中HBsAg、H
3、BeAg采用双抗体夹心法,HBsAb采用双抗原夹心法,HBeAb、HBcAb采用竞争抑制法,按说明书要求操作。阳性结果判断HbsAg、HBsAb、HbeAg测试卡的试纸条分别出现检测线和质控线,HBeAb、HbcAb测试卡的试纸条只出现质控线,测试卡未出现质控线为失效。分时统计结果显示时间。1.4.2ELISA所有标本均用SM-3型自动酶联免疫系统分析仪检测。HBsAg、HBsAb、HBeAg样本OD值S/CO≥1为阳性,反之为阴性;HBeAb、HBcAb样本OD值S/CO≥1为阴性,反之为阳性。2结果2.1统计胶体金测试卡检测标本显示结果的时间,10m
4、in174例,15min63例,20min51例,25min12例,超过25min(试剂盒要求25min报告结果)结果做无效处理。ELISA检测单个标本需1h。2.2100例HbsAg阴性标本中,2例HbcAb胶体金测试卡检测阴性,患者于60d复查,2例HbcAb结果均为阳性。其他结果均相同。结果见表1。表1100例HbsAg阴性标本两法检测结果2.3200例HbsAg阳性中,胶体金测试卡检测6例HbsAg阴性,符合率97.0%,患者于60d复查,结果HbsAg均为阳性。胶体金测试卡检测HBsAb、HbeAg的符合率为100%,9例HBeAb阴性,符合率
5、92.9%,7例HbcAb阴性,符合率96.5%。结果见表2。表2200例HbsAg阳性标本两种方法检测结果3讨论本实验胶体金测试卡所用检测时间比焦玉东2报道的HbsAg胶体金试纸条30min内显示结果缩短了5min,这是试剂盒差异造成的。胶体金测试卡检测单个标本的时间明显比ELISA时间短,因为高浓度的抗体(或抗原)集中固定在纤维素的微孔中,待测抗原(或抗体)流经微孔与固定的抗体(或抗原)接触,很快完成反应,通过目测胶体金标记物得到直观的显色效果。ELISA检测抗原(或抗体)在液相中经扩散作用,逐渐与固相表面的抗体(或抗原)结合,同时标记抗体(或抗原)
6、也需要此过程形成标记抗原抗体复合物,检测时间较长。胶体金测试卡成本高;ELISA成本比较低。胶体金测试卡不需要仪器设备和洗涤,易于操作,大大减少了污染机会;ELISA需洗涤和显色反应过程,中间环节多,较复杂。从表1结果表明胶体金测试卡的特异性较好。出现差异的患者复查结果表明胶体金测试卡检测存在一定的假阴性,敏感性和稳定性不如ELISA。SXSYM系统ELISA检测HbsAg时,S/CO值从1.27到250.59均呈线性,相应的HbsAg浓度范围为0.031～400.0ng/ml3。检测乙肝两对半,胶体金测试卡只是定性筛选;ELISA可用定值血清确定其浓度
7、。由于胶体金测试卡检测结果判定是比较检测线和控制线颜色,当检测线颜色较弱,肉眼难以判定,造成其检测的假阴性增多。胶体金测试卡法不需要特殊设备,快速检测单个标本,易于观察结果,操作简便,特异性较高,能满足急诊的需要。但从实验结果表明,由于胶体金测试卡的原理及方法学差异,灵敏度和稳定性稍低于ELISA,线性范围也较窄;HbcAb、HBeAb和HBcAb试剂质量有待提高,不适于住院病人和献血员4,特别手术病人的检测。胶体金测试卡成本高于ELISA,不适合批量标本检测。因此,实验室应根据需要,结合工作情况选用实验方法。【
