不同血液样本中乙醇浓度结果差异的探讨

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1、不同血液样本中乙醇浓度结果差异的探讨谢加奖(福建省厦门市仙岳医院检验科福建厦门361012)【摘要】目的：通过比较分析不同方法不同血清样木中乙醇浓度测定结果的差异，强调在乙醇司法鉴定中，检材要严格釆用全血进行鉴定。方法：按GA/T105-1995要求使用AgilentG1888顶空自动进样器和Agilent7890A气相色谱仪建立乙醇定量分析方法，对57例受检对象的全血和血清样木进行测定，同时用贝克曼UniCelDxC800系统的ETOH试剂检测血清乙醇浓度。结果：同一受检对象同时用用不同方法对全血和血清进行检测，结果有显著差异，

2、P<0.05。结论：在进行乙醇司法鉴定时，对送检样木类型要严格统一采用顶空气相法对全血进行鉴定。在检材只有血清的情况下进行鉴定时，必须制备相应的标准曲线对其进行分析。【关键词】乙醇；气相色谱法；血液乙醇含量；法医毒物分析【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2015)08-0236-02如何提高和保证毒物分析鉴定质量是广大法医毒物分析工作者面临的共同课题。法医毒物分析的质量保证包含影响分析结果的所有因素，从人员、仪器设备、设备、试剂、参考物质、检材、分析方法到数据记录和结果报告。测量不确定度的评定在

3、毒物分析工作中也受到越来越多的重视。围绕血液中乙醇浓度(BAC)的研究目前侧重于测定结果的准确性、BAC推算和延长检测时限方面。木文主要从样木的类型，即全血/血清对乙醇结果的影响进行分析，进而强调在鉴定不同样木类型时，有必要分别制备相应的标准曲线进行测定。1.材料和方法1.1试剂及溶剂配置1.1.1试剂无水乙醇（99.8%，天津市光复科技发展有限公司），叔丁醇（分析纯，西陇化工股份有限公司）。1.1.2溶液的配置乙醇标准溶液：吸取2.5ml无水乙醇标准品置于25ml容量瓶中，添加重蒸馏水至刻度，混匀，得8000mg/100ml乙醇

4、储备液，将储备液稀释分别得到浓度为4000、2000、1000、lOOmg/lOOml乙醇使用液。内标物（叔丁醇）标准溶液：吸取0.256mI叔丁醇标准品置于100ml容量瓶中，添加重蒸馏水至刻度，混匀，得200mg/100ml叔丁醇标准使用液。1.2仪器及实验条件1.2.1Agilent7890A气相色谱仪色谱柱：J&W123-9234:26:260°C:30m×320um×1.2umDB-ALC2:1570.59063；柱温:50°C；检测器：火焰离子化检测器（FID）；检测器温度：300°C；进样口温

5、度：200°C；载气（N2）：3mL/min,压力20.0psi;样品瓶压力15.0psi;燃气（H2）:30mL/min；空气400mL/min;尾吹流量（N2）:25mL/min。1.2.2AgilentG1888顶空自动进样器配ImL定量进样环。加热箱温度70°C；定量环温度105°C,传输线温度110°C；气相循环时间12min；样品瓶加热平衡吋间15min；样品瓶加压吋间0.20min；定量环填充吋间0.20min,进样时间0.50min。1.3标准曲线制备取0.50mL空白血液1份及0.49mL空白血液4份（分别添加1

6、0uL浓度为1000、2000、4000、8000mg/100ml的乙醇标准使用液得到乙醇浓度为0、20、40、80、160mg/100ml的血液样品，再分别添加O.lOmL叔丁醇标准使用液，气相工作站编辑系列，进样检测。1.4检材血样测定取检材血样（全血/血清）0.50mLl份于样品瓶内，分别添加O.lOmL叔丁醇内标使用液，密封，混匀，置于顶空自动进样器中，同上编辑系列，进样检测。1.5W克曼UniCelDxC800系统的ETOH试剂检测血清乙醇浓度原理（酶法）：洒精脱氢酶（ADH）催化将乙醇氧化为乙醛，同时将烟酰胺腺嘌呤二核

7、苷酸（NAD）还原成NADH，系统监测340纳米的光吸收变化速率，由NADH-•起的光吸收变化速率与样品中的乙醇浓度成正比。1.6统计学分析运用SPSS16.0统计软件包进行统计学处理，组间比较采用方差分析，以P<0.05为差异显著。1.结果按GA/T105-1995《中华人民共和国公共安全行业标准》采用顶空气相色谱法建立定量分析方法，同一受检对象采用血清和全血同时测定乙醇浓度，并进行组间比较，组间设计方差分析结果F=50.763,P=0.000,提示三组结果两两比较，差异显著，P<0.05。其均值见表1，两两结果比较见表2。2.

8、讨论在本研究的57例检案中，仅3例乙醇浓度小于20mg/100ml,7例乙醇浓度在20〜80mg/100ml,47例乙醇浓度大于80mg/100ml。饮洒影响驾驶员的驾驶行为导致交通事故的发生，经济合作和发展组织（OECD）［3］及我国交通部门的报