dna条形码技术在生物分类中的应用

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1、DNA条形码技术在生物分类中的应用作者:韦健红,吴文如,喻良文,林小桦,李薇【摘要】DNA条形码技术是通过使用DNA序列对物种进行快速、准确识别的技术。目前在动物分类中最常使用的基因序列是线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ亚基(mtCOⅠ)。该技术的出现可以为研究物种的进化规律、遗传变异、系统发育以及生物多样性等提供理论依据。为了让更多非生物分类学研究者了解并将其应用于更多的领域,本文概述了DNA条形码技术的工作流程、技术特点以及在生物分类中的应用和对未来的展望。【关键词】DNA条形码;生物分类;线粒体COⅠ基因;物种鉴定;应用分析 

2、)Abstract:DNAbarcodingisataxonomicmethodthatusesashortgeicmarkerinanorganism′sDNAtoidentifyitasbelongingtoaparticularspecies.Currently,ithasbeenyitochondrialcytochromeCoxidasesubunitⅠ(mtCOⅠ).Itcouldprovideatheoreticalbasisforstudyingthelaytolearnmoreandapplythetech

3、nologyinmorefields.  Keyy;mitochondrialCOⅠgene;speciesidentification;applicationanalysis  继2002年Tautz等[1]提出要用DNA序列作为生物分类系统的主要平台,即DNA分类学后,加拿大Guelph大学的动物学家PaulHebert[2,3]在2003年就明确提出了DNA条形码(DNABarcoding)的概念。DNA条形码技术简单地说,就是通过使用一个或一些短的DNA基因片段作为条形码来对物种进行快速、准确识别的技术。由于该技术具

4、有利用生物种群中的某些遗传保守性很强的DNA片段进行物种鉴定和亲缘关系的定位,了解其分支来源,甚至可以预知其进化方向等诸多用途,使其成为近年来生物分类学家关注的热点。为了让更多非生物分类学研究者熟悉并将其应用于更多的领域,本文概述了DNA条形码技术的主要工作流程、技术特点、在生物分类研究中的应用及争论焦点,并展望了该技术的应用前景。  1DNA条形码技术主要工作流程  DNA条形码技术所应用的分子生物学技术并不复杂,主要工作流程包括样品采集、DNA提取、设计和合成通用引物、选引物,优化反应条件进行PCR扩增、PCR产物的纯化

5、、序列测定和分析。简单来说,即通过对一组来自不同生物个体的短的同源DNA序列(约800bp)进行PCR扩增和测序,随后对测得的序列进行多重序列比对和聚类分析,从而将某个体精确定位到某个分类群中。  序列数据分析是DNA条形码探索的最重要环节,首先进行序列比对和人工校正,通过MEGA或PAUP计算种内和种间的K2P距离(Kimura2parameterdistance)[4]用于表示不同分类阶元之间的序列变异程度,比较种、属和科3个水平上的序列差异,然后根据计算结果建立NJ树(nEighbourjoiningtree),

6、最后依据DNA条形码遗传距离就能对未知标本进行分类和鉴定。  2DNA条形码的技术特点  DNA条形码技术提供了信息化的分类学标准和有效的生物分类学手段,成为进展最迅速的学科前沿之一。目前它主要应用于生物信息学和分类学领域,该技术具有以下几个特点。  (1)不受发育阶段的影响。同种生物的DNA序列信息在不同的生命周期是相同的,所以该技术检测对象可以是生物生命过程中的每一时期,如虫卵、幼虫、成虫、植物生长的任意生长阶段等,较之传统的方法扩大了研究对象的范围并有利于标准化的实现。  (2)不受个体形态特征的影响。传统分类对各种形

7、态特征齐全的标本的依赖,对于被子植物来说,根据缺少花果的标本,很难正确鉴定。应用DNA条形码技术分类即使当样本受损也不会影响识别结果,而且还能准确地辨别形态相似性很高的物种。  (3)不受物种的限制。一个标准DNA条形码数据库一但建立,可使各种物种的鉴定成为可能,不限于濒危物种、土著物种或入侵种等。  (4)可以鉴定出许多群体中普遍存在的隐存分类单元。  (5)获取信息量大。可通过建立DNA条形码数据库,一次快速鉴定大量样本。  (6)精确性高。DNA条形码技术利用碱基ACTG组成的序列使物种鉴别数字化。这种数据库使得全球范

8、围内的现生物种能够很准确的鉴定出来。这种技术相对于表形标记鉴定方法。分子标记鉴定技术具有更加准确、可靠、客观的特点。  (7)操作方法简便并且高效容易掌握。不要求具备很精准的生物专业技术,便于交叉学科的研究者能很好运用该技术,从而加快生物分类的进程。  3DNA条形码的应用  作为一种新兴

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