一规模猪场疫病实验室诊断、分析实例

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1、一规模猪场疫病实验室诊断、分析实例本文对一猪场送检的血清和病料进行了猪瘟、蓝耳、伪狂犬野毒抗体以及猪瘟、蓝耳病原的检测。结果表明该场母猪猪瘟抗体水平很差；蓝耳病毒抗体水平较高，但为野毒感染产生；伪狂犬病毒抗体方面，有3份样本存在野毒抗体；保育猪没有猪瘟病毒感染，但蓝耳病毒检测结果为阳性。最后，笔者对该猪场的免疫情况以及发生的疫情进行了全面的分析讨论，提出了猪场疫苗免疫接种工作的思路与方法。关键词：猪瘟病毒;蓝耳病毒;伪狂犬病毒;抗体;诊断一规模猪场疫病实验室诊断、分析实例曾瑛曾晓毛湖南邵阳市畜牧科学研究所(422000)曾琥程湖南大齐

2、牧业有限公司(411131)中图分类号：S855.3文献标志码B摘要本文对一猪场送检的血清和病料进行了猪瘟、蓝耳、伪狂犬野毒抗体以及猪瘟、蓝耳病原的检测。结果表明该场母猪猪瘟抗体水平很差；蓝耳病毒抗体水平较高，但为野毒感染产生；伪狂犬病毒抗体方面，有3份样本存在野毒抗体；保育猪没有猪瘟病毒感染，但蓝耳病毒检测结果为阳性。最后，笔者对该猪场的免疫情况以及发生的疫情进行了全面的分析讨论，提出了猪场疫苗免疫接种工作的思路与方法。关键词猪瘟病毒;蓝耳病毒;伪狂犬病毒;抗体;诊断2011年3月我市一规模猪场怀孕后期的母猪出现高烧，流产，正常产的

3、仔猪中出现新鲜死胎，弱仔和正常仔，母猪产后泌乳性能差，弱仔及多数正常仔猪陆续死亡。出现疫情以前生产的哺乳仔猪未表现感染发病。此外40日龄左右的保育仔猪同时也表现出了发病症状，高烧、咳嗽、不食，喘气，治疗效果不理想。至5月份，疫情基本平息，猪场方送21份母猪血液和4头发病保育仔猪的脏器病料猪到实验室进行猪瘟病毒、蓝耳病毒、伪狂犬野毒抗体检测以及病料的猪瘟、蓝耳病原检测。现笔者将检测结果整理并分析如下，供同行参考。1材料与方法1.1检测血清与病料21份血清（编号为31、202、252、258、220、222、262、250、255、262

4、、275、2057、2024、206的血清来自3-4月的发病母猪；编号为7601、760、765、7624、7660、7665、7340的血清来自健康母猪），4头发病保育仔猪的脏器病料。1.2主要试剂和试剂盒猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒，蓝耳病毒抗体ELISA检测试剂盒以及伪狂犬野毒抗体ELISA检测试剂盒均为美国IDEXX公司生产。TrizolReagent购自Invitrogen公司，FristStrandSynthesisKit购自TOYOBO公司，PCR试剂购自北京天根生化。1.3主要疫病疫苗免疫程序的调查就猪场方反应的疫

5、情对猪场生猪主要疫病疫苗免疫程序进行调查记录。1.4血清抗体的检测血清猪瘟、蓝耳病毒抗体和伪狂犬野毒抗体的检测按试剂盒的操作说明进行。1.54份病料的猪瘟、蓝耳病原检测。1.5.1样品总RNA的提取从4头保育猪的脏器中各取少许，来自1头猪的脏器做为1个样本，共4个样，按常规方法提取总RNA。1.5.2反转录扩增cDNA将提取的RNA作为模板配置反转录体系，用PCR仪进行反转录。具体操作按反转录试剂盒说明书进行。1.5.3PCR扩增以反转录扩增的cDNA为模板，用特异性扩增猪瘟病毒和蓝耳病毒基因的引物进行PCR扩增，引物资料见文献[1、

6、2]，PCR按常规方法进行。PCR反应退火温度均为58℃，PCR反应结束后取扩增产物6μl进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。2结果2.1免疫程序调查结果就猪场发生的疫情，针对性询问猪场疫苗免疫情况，结果为母猪伪狂犬与猪瘟疫苗每年普免2次，3、9月各免疫1次，没有进行蓝耳病疫苗的接种。保育猪猪瘟疫苗于20、60日龄各免疫1次，60日龄接种了伪狂犬疫苗。2.2血清抗体检测结果取送检的21份母猪血清分别进行猪瘟病毒抗体、蓝耳病毒抗体、伪狂犬野毒抗体3个项目的检测。检测结果见表1，由表1可见21份样本中有9份为猪瘟抗体阴性且所有样本猪瘟抗体阻断率值均在

7、80%以下；蓝耳病毒抗体则所有样本均为阳性，21份样本中S/P值3.0以上的3份，2.5以上、3.0以下的7份，2.0以上、2.5以下的4份；21份样本有3份为伪狂犬野毒抗体阳性，18份样本为阴性。表1母猪群抗体情况表编号猪瘟病毒抗体蓝耳病毒抗体伪狂犬病毒野毒抗体阻断率结果判定S/P值结果判定S/N值结果判定3136可疑2.8+0.97﹣20210—2.1+1.0﹣25248＋2+1.2﹣25844＋2.63+1.51﹣22010—1.0+0.95﹣22277＋1.5