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时间:2018-11-15
《小鼠抗中性粒中心体抗体(aca)elisa试剂盒技术资料》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒技术资料屮文名称:小鼠抗中性粒冲心体抗体(ACA)ELISA试剂盒ELISA试剂盒:欢迎来电询价保存条件及有效期:1.试剂盒保存:2-8"C。2.宥效期:6个月本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆(Q界羽生衿试验原理:ACA试剂盒是闯相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知ACA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将ACA和生物素标记的抗体同吋温育。小鼠抗中性粒/中心体抗体ELISA试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同吋作用。产生颜色。颜色的
2、深浅和样品屮ACA的浓度呈比例关系。ELISA试剂盒组成:i式剂盒组成础配g36孔保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个誨标包被板1X481X962-S'C保存标堆品0.5:1x1瓶0.5mlX1瓶2-S'C保存标准品稀釋液1.5=1XI瓶1.5mlXI瓶2-S*C保存誨标试剂3=1X1瓶5mlXl瓶2-S'C保存样品稀S液3=1X1瓶5mlXl瓶2-SC保存S色剂A液3=1X1瓶3mlXl瓶2-S'C保存S色剂3液3=1X1瓶5mlXl瓶2-S*C保存终止液3:1XI瓶SmlXl瓶2-SC保存20倍浓缩洗涤液20=1X1瓶30mlX1瓶2-S'C保存试剂的准备2
3、0x洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20x洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。洗板方法1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置lmin后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。2.自动洗板机:每孔注入洗液350
4、iL,浸泡lmin,洗板5次。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋屮取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放冋4°C。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50
5、iL;3.样本孔先加待测样本10
6、iL,再加样本稀释液40pL;空白孔不加4.除空ITJ孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗原100pL,用封板膜封住
7、反应孔,37°C水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置lmin,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。6.每孔加入底物A、B各50(iL,37°C避光孵育15min。7.每孔加入终止液50(xL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算芥样本浓度值。试剂盒性能1.准确性:标准品线性冋归与预期浓度和关系数R值,大于等于0.9900。2.灵敏度
8、:最低检测浓度小于1.0pg/mL。3.特异性:不与其它吋溶性结构类似物交叉反应。4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5.贮藏:2-8°C,避光防潮保存。1.宥效期:6个月局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此称准曲线无法得到精确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性冋归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与人其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板问变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450mn的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AmAC-1标准品浓度为横坐标(X),做得
9、相应的曲线,样品的AmAC-1含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml样品收集、处理及保存方法血清…操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,lOOOxg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆…--EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。lOOOxg离心30分钟去除颗细胞上清液---lOOOxg离心10分钟去除颗粒和聚合物。保存-…如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70°C保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。小鼠抗中性粒/中心体
10、抗体(ACA)ELISA试剂盒不要在37°C或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。免责声明1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承扪。宥关更多ELISA试剂盒请咨洵上海乔羽生物技术人员,我们公司的经营原则是“质量第一,诚信第一,品牌第一”,以“质景是企业的生命,诚信是经营的资本”为警醒,
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