山药对老龄小鼠游泳耐力和免疫器官形态结构的影响

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1、山药对老龄小鼠游泳耐力和免疫器官形态结构的影响【摘要】　　目的研究山药水煎液对亚急性衰老小鼠游泳耐力和免疫器官形态结构的影响。方法30只小鼠随机分为空白对照组（A）、衰老模型组（B）和衰老用药组（C）。B、C组腹腔注射D半乳糖（50mg·kg-1·d-1），连续60d，建立衰老模型；A组腹腔注射生理盐水（50mg·kg-1·d-1）。第46天C组灌胃山药水煎液（50mg·kg-1·d-1），A、B组灌胃等体积蒸馏水，连续15d。第61天进行力竭游泳试验，观察并记录力竭游泳时间，后断头采血，测定血尿素氮（BUN）、血乳酸（BLA）、

2、血红蛋白（Hb）含量，剖取胸腺、脾脏称其重量，计算相关脏器指数，常规石蜡切片，HE染色。结果与B组比较，C组小鼠力竭游泳时间显著延长（P<0.05）、BUN、BLA含量显著降低（P<0.01），胸腺、脾脏指数上升（P<0.05），胸腺皮质/髓质、脾脏白髓/红髓比例升高。结论山药水煎液可以改善老龄小鼠的游泳耐力，并在一定程度上延缓免疫器官的衰老。【关键词】山药；游泳耐力；胸腺；脾　　山药具有健脾补肺、固肾益精和降血脂、抗衰老等诸多功效〔1〕。研究发现随着年龄的增长，机体的抗氧化功能逐渐降低〔2〕，运动时随着自由基的堆

3、积，机体脂质过氧化反应会相应增强〔3〕，脂质过氧化增强会造成免疫损伤，破坏细胞结构，肌细胞的耐疲劳性减弱，使机体的运动能力减低〔4，5〕。研究表明山药具有较强的抗氧化活性和清除自由基的功能〔6，7〕，基于山药的强抗氧化性和清除自由基功能，本试验探讨山药对老龄小鼠游泳耐力和免疫器官形态结构的影响。　　1材料与方法　　1.1动物分组　　Km雄性小白鼠30只，5周龄，体重（25±5）g，购自华北煤炭医学院动物养殖中心，动物合格证号：SCXK（京）20050013。小鼠预饲养7d，随机分为3组，分别为空白对照组（A）、衰老模型组（B）、衰

4、老用药组（C），均以基础饲料喂养。　　1.2药品和试剂　　D半乳糖购于北京三博远志生物技术有限责任公司，Sigma公司生产。血尿素氮（BUN）试剂盒（北京北化康泰临床试剂有限公司，批号:20061206），血乳酸（BLA）试剂盒（南京建成生物工程研究所）。怀山药：购于北京同仁堂唐山分店。　　1.3方法　　1.3.1山药水煎液的制备　　称取山药片100g，粉碎后按1∶8比例加水，60～80℃热水提取4h，收集提取液，浓缩至100ml。试验时用生理盐水配成所需浓度。　　1.3.2衰老模型制备和给药方法　　A组腹腔注射生理盐水(50mg

5、·kg-1·d-1)，B、C组腹腔注射D半乳糖（50mg·kg-1·d-1），连续60d。第46天，A、B组灌胃蒸馏水（50mg·kg-1·d-1），C组腹腔注射D半乳糖的同时灌胃山药水煎液（50mg·kg-1·d-1）,连续给药15d。每天记录小鼠体重变化，以调整给药剂量。　　1.3.3力竭游泳试验　　第61天进行力竭游泳试验，将同组小鼠分别放入恒温水槽（水深>30cm）、水温（25±1）℃，进行力竭游泳试验，当鼠头沉入水下5s不能抬起并不能完成翻正反射计时停止，为力竭游泳时间。　　1.3.4生理指标测定和统计　　1.3

6、.4.1小鼠体重、胸腺重量、脾脏重量、胸腺指数、脾指数及体重增重率统计　　A、B、C三组小鼠每3天称重一次，取每组平均值记录。试验结束将剖取的胸腺、脾脏用澳豪斯AdventurerTM天平称湿重并计算其指数。脏器指数=脏器重量/体重（mg/10g）。增重率=（试验后体重-试验前体重）/试验前体重×100%。1.3.4.2BUN、血红蛋白（Hb）含量的测定将采得的血液迅速用TGL16G冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂）离心5min（3000r/min），取上清液，用BUN试剂盒和722S可见分光光度计（上海棱光技术有限公司）测定BUN

7、、Hb含量（可见光比色法）。　　1.3.4.3切片制备　　称重后的小鼠胸腺、脾脏迅速固定，常规石蜡切片，HE染色。光镜下观察三组小鼠胸腺、脾脏组织结构，显微拍照。　　1.4统计学方法　　所有数据采用统计软件SPSS11.5进行方差分析和多重比较（LSD），数据以x±s表示。　　2结果　　2.1山药对小鼠体重增重率和力竭游泳时间的影响　　A、B、C三组小鼠的体重增重率分别为（14.88±3.39）%，（12.88±6.9）%，（13.87±5.51）%；组间比较无显著性差异（P>0.05）。力竭游泳时间B组最短〔（96.28±9

8、.63）min〕，与A组〔（135.05±12.73）min〕差异显著（P<0.05）；C组〔（116.83±15.94）min〕与A组差异无统计学意义，与B组比较，有显著性差异（P<0.05）。灌胃山药水煎液的C组力竭游