降糖保肾汤对糖尿病大鼠肾脏的影响

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1、降糖保肾汤对糖尿病大鼠肾脏的影响：李美子，郝营丽，陈正爱【摘要】目的探讨降糖保肾汤(jiangtangbaoshendecoction,JTBSD)对糖尿病(diabetesmellitus,DM)大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法采用单次腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)建立DM大鼠模型。大鼠随机分为4组：正常组、模型组、JTBSD组、盐酸贝那普利(Benazeprilhydrochloride,BNPH)组。给药12周，收集24h尿液测定尿肌酐，心脏采血检测各组大鼠血尿

2、素氮(bloodureanitrogen,BUN)、血肌酐(serumcreatinine,SCr)，并计算肌酐清除率(creatinineclearancerate，CCr)水平，光镜下观察肾组织的病理改变，免疫组化观察肾组织转化生长因子β1(transforminggroa公司产品;SABC试剂盒、DAB显色试剂盒和兔抗TGF-β1多克隆抗体均为武汉博士德生物工程有限公司产品。　　1.2动物大鼠BUN、SCr、CCr的影响随机法将80只大鼠分为两组：10只大鼠列为正常组，正常组腹腔注射枸橼酸

3、缓冲液;另70只单次腹腔注射STZ50mg/kg(临用前用0.05mol/L枸橼酸缓冲液溶解，pH为4.4,4℃)，注射STZ72h后，尾静脉采血测空腹血糖并同时测尿糖，血糖≥16.7mmol/L，尿糖“+++”以上者列入DM观察对象。再将造模成功的大鼠随机分为模型组(20只)、JTBSD组(15只)和BNPH组(15只)。造模7d后，JTBSD组每天灌服JTBSD30g生药/kg体质量，BNPH组每天灌服BNPH10mg/kg体质量，正常组和模型组每日灌服等体积的蒸馏水，共12周。12周末，收

4、集大鼠24h尿液，记录尿量和检测尿素氮。之后，用3%水合氯醛10ml/kg腹腔麻醉，心脏采血，测大鼠的BUN、SCr水平，并计算CCr。对4组数据用SPSS11.0软件进行单因素方差分析处理。结果见表1。表1JTBSD对STZ所致DM大鼠BUN、SCr、CCr的影响　　2.2JTBSD对STZ所致DM大鼠肾脏组织病理的影响实验大鼠分组、造模及给药同“2.1”项方法。12周末，打开腹腔快速切除肾脏，左肾肾脏皮质立即置入10%中性福尔马林液固定，用于HE染色。结果见图1。图1JTBSD对STZ所致D

5、M大鼠肾脏组织病理的影响(HE染色100×)　　2.3JTBSD对STZ所致DM大鼠肾脏细胞因子TGF-β1的影响实验大鼠分组、造模、给药同“2.1”项方法。12周末，打开腹腔快速切除肾脏，左肾肾脏皮质立即置入10%中性福尔马林液固定，用于免疫组化标本的制备。结果见图2。图2JTBSD对STZ所致DM大鼠的肾脏细胞因子TGF-β1的影响(免疫组化染色，100×)　　3讨论　　BUN和SCr都是机体蛋白质代谢产物，它们的浓度取决于氮的分解和肾的排泄功能，在摄入食物及体内分解代谢比较稳定的情况下，其

6、浓度的多少取决于肾的排泄能力。因此，血清肌酐和尿素氮浓度在一定程度上可反映肾小球的滤过功能[2]。DN时，原有的肾脏功能遭到破坏，BUN、SCr和CCr上升，双肾滤过率逐渐下降。TGF-β是一种多向性、多效性和多功能的细胞因子。在哺乳动物中存在三种形式的TGF-β，分别为TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3，其中TGF-β1所占比例最高(>90%)，活性也最强，是起主要作用的TGF-β因子[3,4]。TGF-β与其受体(TβR)结合后，通过细胞膜上的Smad蛋白可将TGF-β信号从细胞

7、表面传至细胞核内，从而调节靶基因的转录[5]。TGF-β1在DN进展中发挥着重要的作用，其介导肾脏病变的机制有如下几点：①TGF-β1刺激ECM积聚;②抑制细胞增殖、促进细胞肥大;③促进细胞凋亡;④改变细胞表型;⑤与其他细胞因子的相互作用。本实验表明JTBSD能明显降低DM大鼠的BUN、SCr、CCr，能够使DM大鼠肾组织系膜基质增生减轻、肾小球硬化明显减轻、血管水肿减轻，使DM大鼠肾组织中TGF-β1表达明显减少。JTBSD对DM大鼠肾脏具有明显的保护作用，其作用机制可能与防止肾脏功能改变、减

8、轻大鼠肾脏组织病理改变、抑制肾脏细胞因子TGF-β1的表达有关。【参考文献】　[1]Jckle-MeyerI,SzukicsB,NeubauerK,etal.Extracellularmatrixproteinsasearlymarkersindiabeticnephropathy[J].EurJClinChemClinBiochem,1995,33(4)：211.　　[2]徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学，第3版[M].北京：人民卫生出版社，2003：1220.　　[3]冯文焕，高鑫，叶