长期施肥对土壤微生物量碳的影响研究.docx

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1、长期施肥对土壤微生物量碳的影响研宄宋健土壤微生物量是植物营养物质的源和库，并积极参加养分循环，代表土壤养分的活性部分，因此常被用于评价土壤质量的生物学性状。土壤呼吸和微生物代谢商综合了微生物量的大小和活性，可以较好地反映土壤环境质量的变化。基木的土壤质量或健康生物指标应当伍括微生物碳、氮，潜在矿化氮，土壤呼吸，微生物商等。微生物量，土壤呼吸及其衍生指数，一些土壤功能微生物、土壤酶等均可看做目前具有潜力的生物学指标。许多研宄表明，土壤微生物量、土壤呼吸及其衍生指数较其他土壤性质能够迅速地响应施肥管理（有机

2、肥和无机肥）、作物体系、耕作和体闲以及土地利用方式的差异。在施肥管理方面的研究表明，施用有机肥可以显著提高土壤微生物量碳、氮的含量及基础呼吸强度，其中随着有机肥施用量的增加，土壤微生物量碳、氮的增加越明显。施用无机肥对于土壤呼吸没有显著影响，但是由于气候条件、土壤类型以及耕作施肥的复杂多样性，其对土壤微生物量的影响不尽相同。李娟等报道，灌溉褐潮土上配合施用氮、磷、钾肥较不施肥土壤显著增加土壤微生物量碳、氮，而旱作褐土上适量施用氮磷无机肥与不施肥相比，土壤微生物量碳、氮没有显著差异A前，测定微生物量碳最常

3、用的方法是氯仿薰蒸浸提法，它最大的优点是简单快速，可应用于淹水土壤的微生物量测定，并且可以与同位素技术结合，研究土壤和环境的物质循环及转化。一、采样与样品预处理土壤样品的采集方法和要求与测定其它土壤性质时没有本质区别。采集到的新鲜土壤样品立即去除植物残体、根系和可见的土壤动物（如蚯蚓）等，然后迅速过筛（2〜3mm）,或放在低温下（2〜4°C）保存。如果土壤太湿无法过筛，进行晾干时，必须经常翻动土壤，避免局部风干导致微生物死亡。过筛的土壤样品调节到㈩间持水量的50%左右，在室温下于密闭装置中预培养1周，密

4、闭容器中要放入两个50mL的烧杯，分别加入水和稀NaOH,以保持其湿度和吸收释放的CO2。预培养后的土壤最好立即分析，若需要放置一段时间，在低温下（2〜4°C）最好不要超过10do土壤FH间持水量釆用改进的Shaw（1958）方法测定。在漏斗下端连接一带夹子的橡胶管，漏斗用玻璃纤维堵塞。取50.00g土壤于漏斗中，夹紧橡胶管，加入50ml水，保持30min，再打开夹子使多余的水流入量筒，30min后测定流出的水量，同时测定土壤湿度，计算土壤田间持水量，用烘干土壤质量表示。一林启美老师文件二、方法一氯仿薰

5、蒸浸提法（FE）1、方法原理土壤经氯仿薰蒸处理，微生物被汆死，细胞破裂后，细胞内容物释放到土壤中，异致土壤中的可提取的碳大幅度增加。通过测定浸提液中全碳的含量可以计算土壤微生物量碳。浸提液中碳可用重铬酸钾容量法测定，也可用微量碳分析仪测定。此处介绍比较简单的重铬酸钾容量方法。2、仪器及设备培养箱；真空干燥器；真空泵；往复式振荡机(速率200rev/min)；冰柜；磷酸浴。3、试剂1.无乙醇氯仿：量取500mL氯仿于1000mL的分液漏斗中，加入50mL硫酸溶液［(H2SO4)=5%］，充分摇匀，弃除上层

6、硫酸溶液，如此进行3次。再加入50mL去离子水，同上摇匀，弃去上部的水分，如此进行5次。得到纯氯仿存放在棕色瓶中，并加入约20g无水K2C03,在冰箱的冷藏室中保存备用。(试剂浓硫酸(II2S04)=95^98%,稀释19倍)2.硫酸钾溶液［c(K2S04)=0.5mol-L-1］:称取硫酸钾(K2S04,化学纯)87.10g,加热溶于去离子水中，稀释至1L。(需加热溶解)3.重铬酸钾［c(l/6K2Cr207)=0.2000mol-L-1］:称取经130摄氏度烘干2〜3h的重铬酸钾(K2Cr207分析

7、纯)9.8110g,溶于1000mL的去离子水中。4.重铬酸钾标准溶液：［c(l/6K2Cr207)=0.1000mol•L-1］:称取经130oC烘干2〜3h的重铬酸钾(K2Cr207,分析纯)4.9055g,溶于1000mL的去离子水中。5.邻啡罗啉指示剂:称取邻啡罗啉指示剂［C12H8N2•H20,分析纯］1.49g,溶于含有0.70gFeS04*7H20的100mL去离子水中，密闭保存于棕色瓶中。6.硫酸亚铁溶液［c(FcS04)=0.05mol-L-1］：称取硫酸亚铁(FeS04•71120)

8、约13.9005g,溶解于600〜800mL去离子水中，加浓硫酸(化学纯)20mL,搅拌均匀，定容至lOOOmL,于棕色瓶中保存。此溶液不稳定，需在用时每天标定其浓度。7.硫酸亚铁溶液浓度的标定：吸取重铬酸钾标准溶液5.00mL，放入lOOmL三角瓶中，加水约20mL,加浓硫酸5mL和邻啡罗啉指示剂2滴，用FcS04溶液滴定，根据FcS04溶液的消耗量即可计算FeS04溶液的准确浓度。硫酸亚铁溶液标定方法：吸取0.1000molL-1(1/