十三种杀菌剂对草莓胶孢炭疽菌的室内毒力测定

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1、十三种杀菌剂对草莓胶孢炭疽菌的室内毒力测定　　关键词：草莓炭疽病菌（Colletotrichumgloeosporioides）；毒力测定；杀菌剂；筛选　　ToxicityTestof13TypesofFungicidesforStraicCrops，HubeiAcademyofAgriculturalSciences，gloeosporioides（Penz.）Sacc.，eansofmyceliumgroethod.TheresultsshoongixofPropiconazolandProchlora

2、zshog/Lrespectively，folloothalonil.These10fungicidesg/Lrespectively.　　Keygloeosporioides（Penz.）Sacc.；toxicitytest；fungicide；screening　　草莓（FragariaananassaDuchesne）有“果中皇后”之称，营养丰富，经济价值很高。自1931年首次报道草莓炭疽病以来，已有多国报道该病的发生，其广泛的传播性和潜在危害已被广泛关注[1]。高温湿润的气候条件适宜该病发生。因此，

3、其对7～8月份草莓生产苗繁育造成的损失尤为严重。我国于1997年由叶正文等[2]首次发现草莓炭疽病，湖北省该病发生越来越重，严重阻碍了草莓产业的发展，尤其是在高温多湿的育苗季节更为严重。目前对该病害的研究主要有叶正文等[2]对抗病品种筛选、龙军等[3-9]对该病原菌生物学特性的研究等，针对防治该病害的农药筛选研究很少。力求筛选出对草莓胶孢炭疽病病菌毒力大、抑菌效果好的杀菌剂供生产上使用。因此试验选用13种杀菌剂作为供试药剂，采用菌丝体生长速率法对草莓胶孢炭疽病病菌进行室内毒力测定，以期筛选出对草莓胶孢炭疽病

4、病菌毒力强的杀菌剂，为防治草莓炭疽病提供参考。　　1材料与方法　　1.1供试菌株　　草莓炭疽病病原菌于湖北省农业科学院经济作物研究所分离，并通过分子鉴定保存的炭疽病病原胶孢炭疽菌[Colletotrichumgloeosporioides（Penz.）Sacc][10]，经过单孢纯化后获得供试菌株。　　1.2供试药剂　　经预备试验筛选出以下几种药剂做药效测定（表1）。　　1.3杀菌剂室内毒力测定　　采用杀菌剂室内生长速率法测定[10]。上述药剂均用无菌水配制成系列浓度梯度的溶液，在无菌操作台上将不同梯度的药

5、剂加入到灭过菌的冷却到40～50℃的PDA培养基中，倾入后立即水平方向平稳摇动三角瓶，使药剂在培养基中均匀分布后倒平板。在每个平板中央接入一块直径为0.5cm的菌苔，以不加药剂为空白对照。25℃恒温黑暗培养6d后用“垂直十字交叉法”测量菌落直径，检查药剂的抑菌效果，每处理5皿，重复3次。　　将PDA培养基放入121℃高压灭菌20min。按每个三角瓶分装60mL。分装后放在无菌操作台上，用移液枪移入被稀释后的不同浓度的农药，并摇匀。然后快速将其分别倒入3个培养皿中。每个培养皿倒入20mL，待其冷却凝固后在培养

6、皿左上方贴标签纸标记（预备做农药抑菌试验的农药的编号），然后用打孔器将供实验菌打孔，移入培养皿内[4]。然后将培养皿倒置于培养箱中，25℃恒温黑暗培养6d，观察并测定抑菌圈直径。检查药剂的抑菌效果，每处理3皿，重复3次。通过十字交叉法对抑菌圈的大小进行测定。　　抑菌率=■×100%　　将药剂对菌丝的抑制率转换成几率值（y），药剂各浓度（mg/L）转换成对数值（x），进行线性回归分析，求出毒力回归方程和相关系数，最后计算出各药剂对病菌菌丝生长的抑制中浓度（EC50）。　　1.4数据分析　　试验数据的分析均用S

7、PSS11.5和Excel2003完成。　　2结果与分析　　2.1杀菌剂对病原菌EC50的比较　　不同药剂对炭疽病病原菌菌丝生长的抑制中浓度（EC50）见表2。从表2中可以看出，13种药剂对炭疽病病原菌菌丝的生长速度具有不同程度的抑制作用，抑制效果表现出明显的差异。　　从各药剂的毒力回归方程和EC50可以看出，13种药剂中好力克、丙环·咪鲜胺和施保功3种杀菌剂对病菌的毒力作用最强，EC50值分别为0.0022、0.0056和0.0093mg/L；其次是福星，EC50为0.17mg/L；施保克EC50为1.1

8、1mg/L，百泰EC50为1.23mg/L，凯特EC50为1.57mg/L，世高EC50为1.83mg/L，凯润EC50为4.22mg/L，溴菌腈EC50为4.42mg/L，相对较低；而腈菌唑、翠贝和二氰蒽醌对病菌的抑制作用差，其中二氰蒽醌的抑制作用最差，EC50值达到106.99mg/L。　　2.2病原菌对杀菌剂的敏感性比较　　回归方程的斜率越大，表明病菌对该杀菌剂的敏感性越差。杀菌剂按照斜率值（表2）从大到小