129例血培养患者外周血淋巴细胞亚群结果分析

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1、129例血培养患者外周血淋巴细胞亚群结果分析山丙省阳泉市第一人民医院检验科045000;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液研究所200020*在当今抗牛.素和激素广泛应用以及有创诊疗技术的发展，血液感染发病率逐渐升高，而菌血症治疗时间长，费用多，病死率高，危害极大。血培养是血液感染诊断的金标准，但培养时间长，即使阴性也不能除外感染，淋巴细胞及其亚群作为机体免疫功能的一个重要指标，在病原菌感染后，会发生一系列数量和比例的变化。木研究选择129例血培养患者，回顾性分析其外周血淋巴细胞亚群数量的变化，找出其规律，为临床对蘭血症的诊断、治疗提供理论依据。1.资料

2、与方法1.1.资料:木次研究选取2013年10月至2014年11月在木院住院同时进行血培养及外周血淋巴细胞亚群测定的患者129例，男81例，女48例，年龄18-70岁(平均年龄44&p

3、Usmn;22岁)，患者除感染外均无其他己知影响机体免疫功能的疾病发生，感染的诊断符合世界卫生组织(WHO)诊断标准[1],且送检血培养与淋巴细胞亚群送检时间不超过24小时，并选同期健康体检人员36例作为健康对照组，男21例，女15例，平均年龄43±19岁。1.2.方法：1.2.1试剂与仪器：美国BD公司BACTEC9120全自动血培养仪及BD公司配套血培养瓶，

4、美国BD公司PHOENIX-100全自动细菌鉴定药敏系统及原装配套试剂，美国贝克曼公司FC-500流式细胞分析仪，稀释液(COULTERISOTONIIIDILUENT),清洗液(COULTERCLENZ),四色复合试剂异硫氰酸盐荧光素(FITC)标记的CD45、藻红蛋白(PE)标记的CD4、藻红蛋白-得克萨斯红(ECD)标记的CD8、藻青蛋白5(PC5)标记的CD3。双色复合试剂FITC标记的CD3、PE标记的CD(16/56)。单色试剂PC5标记的CD19,藻青蛋白7(PC7)标记的CD45。1.2.2血培养：静脉采血16-20ml立即注入厌諷菌和需諷菌

5、培养瓶各1瓶，每瓶8-10ml，并送实验室，实验室接受标本编号、登记后，将血培养瓶置BD公司BACTEC9120全自动血培养仪中培养；当仪器阳性报警时，用无菌注射器抽取培养液涂片、革兰氏染色、镜检，根据染色镜检结果接种营养血平板和/或巧克力平板，置于37°C孵育24h,待菌落形成后挑取单个菌落配成0.5个麦氏单位菌液置BD公司PHOENIX-100全自动细菌鉴定药敏系统对病原菌鉴定，另取菌落涂片、革兰氏染色、镜检确认。1.1.3.淋巴细胞亚群检测:静脉采集外周血2ml加入EDTA-K2抗凝管中。取两管分别标记T、B&NK,分别加入抗凝血lOOul,T

6、系四色荧光素抗体2Oul加入T管；CD45、CD19、CD3单色荧光素抗体，CD16/56单色荧光素双抗体各20ul加入B&NK管。两管轻轻混匀，避光染色15min后，均再加入500ul裂解液混匀，避光lOmin取出，300g离心5min,弃去上清液，加2ml0.01MPBS液洗涤，离心弃去上清液，再加入0.5ml0.01MPBS混匀，上流式细胞仪检测。1.2.统计学分析：采用SPSS17.0统计软件进行统计分析，计数资料以±s表示，组间比较采用t检验分析，以P<0.05为差异有统计学意义。2.结果本次入选129例患者血培养结果中

7、，病原菌阳性生长93例，阴性36例，且阳性结果均己排除污染菌。分组按奋菌生长组和无菌生长组，且奋菌生长组又分为革兰氏阴性细菌感染组、革兰氏阳性细菌感染组、混合细菌感染组、真菌感染组，结果显示冇菌生长组总T淋巴细胞、T4淋巴细胞、4/8较健康对照组明显升高(P<0.05),革兰氏阴性感染组患者总T淋巴细胞、T4淋巴细胞、4/8、DP-T淋巴细胞、B淋巴细胞百分含量较健康对照组明显升高(P<0.05)o革兰氏阳性组T4淋巴细胞、4/8比值与对照组有统计学意义(p<0.05)o真菌感染组总T淋巴细胞、T4淋巴细胞、4/8比值较健康对照组明显减少(

8、P<0.05)o无菌生长组T4淋巴细胞百分比增高(P<0.05)o见附表。1.讨论淋巴细胞是机体免疫反应中主要作用细胞。机体在正常情况下，各淋巴细胞亚群保持一定的数量和比例，协同调节，实现机体免疫功能正常运行。而当病原微生物侵入机体时，免疫应答会使淋巴细胞亚群的数量或功能发生变化,导致机体免疫功能失调。外周血中总T淋巴细胞，其表面的CD3分子参与T淋巴细胞识别抗原，介导机体的细胞免疫应答反应。T4淋巴细胞也称诱导/辅助性T淋巴细胞，具冇辅助B淋巴细胞产生淋巴因子，增强和扩大免疫应答。T8淋巴细胞包括抑制性/细胞毒性细胞，具奋直接杀伤感染微生物的靶

9、细胞的功能。4/8比值是监测人体细胞免疫功能，反应机